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儿童肺炎链球菌感染流行病学及耐药分析被引量：11: 2015年; 目的了解肺炎链球菌流行及耐药情况,为肺炎链球菌的预防及临床合理用药提供依据。方法收集西安市儿童医院2013年3月至2014年2月分离的肺炎链球菌菌株,综合分析各年龄段、季节的感染情况,获得儿童感染肺炎链球菌流行病学资料。采用E-test法检测菌株对青霉素、头孢曲松、头孢噻肟的敏感性,采用纸片法检测菌株对克林霉素、红霉素、万古霉素的敏感性。结果共分离到206株肺炎链球菌,年龄分布：2岁以下儿童146株,2~5岁46株,5~14岁14株;季节分布：春季37株,夏季18株,秋季49株,冬季102株。对青霉素、克林霉素、红霉素、头孢曲松、头孢噻肟、万古霉素的敏感率分别为70.4%、3.9%、2.4%、80.1%、82.5%、100%。结论儿童肺炎链球菌感染以2岁以下婴幼儿为主,冬季最多。青霉素仍可作为治疗普通肺炎链球菌感染的首选药物;三代头孢菌素可用于青霉素非敏感的肺炎链球菌治疗;未发现万古霉素非敏感菌株;红霉素、克林霉素的耐药率极高,不适合肺链链球菌的治疗。; 张书婉王敏江余建华曹三成黄君华; 关键词：儿童肺炎链球菌流行病学抗生素

雷帕霉素对K562细胞增殖和凋亡作用的影响被引量：1: 2016年; 目的:探讨雷帕霉素(RAPA)对人慢性髓系白血病K562细胞株增殖和凋亡作用的影响。方法 :取对数生长期K562细胞,用不同浓度的雷帕霉素(25、50、100nmol/L)处理K562细胞24、48、72h后收集细胞,MTT比色法检测处理组细胞的生长抑制率,流式细胞术检测细胞早期凋亡率。结果:MTT法检测结果显示,与对照组相比,不同浓度的雷帕霉素对K562细胞的增殖均有明显的抑制作用,100nmol/L雷帕霉素处理72h后抑制率高达48%,且呈浓度和时间双重依赖性,与对照组相比具有统计学意义(t=6.691,p<0.05);流式细胞术检测25、50、100nmol/L雷帕霉素作用24h后,K562细胞早期凋亡率分别为13.12±0.32,18.56±0.12,25.95±0.16,均较对照组明显增高,48h、72h细胞凋亡率明显增高,两两比较差异具有统计学意义(t=4.900,t=14.640,t=16.830,p<0.05)。结论:雷帕霉素对K562细胞的生长具有抑制作用,并诱导细胞凋亡。; 黄凤霞贺红艳黄君华李小峰张淑莉王影; 关键词：雷帕霉素 K562细胞增殖凋亡

PCR-DGGE结合测序在检测混合细菌感染中的价值被引量：3: 2014年; 目的探讨变性梯度凝胶电泳(Denaturing gradient gel electrophoresis,DGGE)结合测序在检测混合细菌感染中的作用,为细菌多重感染的诊断提供新的思路。方法以3份临床培养鉴定为混合感染的胆囊穿刺引流液为对象,提取细菌总DNA并扩增16S rDNA-V3区,后进行DGGE分析,将所得条带切胶纯化再扩增,扩增产物进行测序及BLAST比对,比较比对结果与临床培养结果的一致性。结果 DGGE可以很好地分离16S rDNA-V3区混合PCR产物,每一个扩增子的测序比对结果与临床培养结果一致。结论 PCR-DGGE结合测序的方法可以很好地鉴定临床混合感染标本中的病原菌,可作为快速检测方法在临床应用。; 黄君华张书婉张宁; 关键词：变性梯度凝胶电泳测序

16S rDNA测序在儿童血流感染细菌性病原菌分布中的应用被引量：9: 2014年; 目的探讨PCR方法在分析血流感染病原菌分布中的作用,为儿童细菌性血流感染的流行病学调查提供新的思路。方法从儿科重症监护病房(PICU)收集100份疑似血流感染患儿的外周静脉血进行血培养,同时扩增并测序细菌16S rDNA,比较培养结果与PCR结果。结果 100份血液标本中11份细菌培养阳性,阳性率为11%;PCR法23份阳性,阳性率为23%,二者比较差异具有统计学意义(χ2=10.08,P<0.05);在23例PCR阳性标本中,革兰氏阳性球菌占65.2%,其中表皮葡萄球菌最多(6例,26.1%),革兰氏阴性菌占34.8%,以大肠埃希菌为主(4例,17.4%)。结论 16S rDNA-PCR结合测序的方法可以很好地鉴定血流感染病原菌,与血培养相比能更客观地反映病原菌分布,可作为一种新的流行病学方法在临床应用;儿科重症监护病房血流感染病原菌以革兰氏阳性球菌为主,尤以表皮葡萄球菌最常见。; 黄君华张书婉; 关键词：血流感染细菌测序儿童

RNA-SAT在儿童肺炎支原体肺炎诊断中的价值被引量：7: 2018年; 目的探讨RNA实时荧光恒温扩增技术(RNA-SAT)在诊断儿童肺炎支原体肺炎(MPP)中的作用。方法选取221例临床诊断为社区获得性肺炎(CAP)的患儿为研究对象,其中MPP患儿75例,非MPP患儿146例,分别检测咽拭子肺炎支原体(MP)RNA和血清MP抗体(MP-Ab),对两种方法的检测结果进行统计学分析。结果以临床诊断为标准,RNASAT与MP-Ab检测法二者的敏感性分别为65.3%和64.0%(χ~2=0.02,P>0.01),特异性分别为97.9%和82.9%(χ~2=15.75,P<0.01);阳性预测值分别为94.2%和65.8%(χ~2=26.43,P<0.01),阴性预测值分别为84.6%和81.8%(χ~2=1.16,P>0.01)。结论 RNA-SAT作为一种无创的检测技术在儿童MPP的早期诊断中有较高的价值,结合MP-Ab检测可以有效提高MPP的诊断效率。; 张书婉徐蓓吴爽黄君华; 关键词：肺炎支原体社区获得性肺炎儿童

穿刺引流液中病原性真菌的ITS测序研究被引量：2: 2014年; 目的探讨内部转录间隔区(ITS)测序用于快速检测穿刺引流液中病原性真菌的价值。方法采用临床常见的14种细菌和4种真菌及人类基因组DNA验证真菌通用引物(ITS1/ITS4和ITS3/ITS4)的特异性和敏感性;采集90例临床疑似真菌感染患者的穿刺引流液标本10mL,其中8mL用于常规真菌培养,剩余2mL用于提取真菌DNA并分别用ITS1/ITS4和ITS3/ITS4作为引物进行扩增,将阳性扩增产物测序并与BLAST比对,将测序法与培养法的阳性率结果进行统计学比较。结果14种细菌及人类基因组扩增产物均为阴性,4种真菌扩增产物为阳性。ITS3/ITS4和ITS1/ITS4的最低检测限分别为102CFU/mL和103 CFU/mL。90例标本培养阳性率为4.44%(4/90),测序法阳性率为12.22%(11/90),二者差异具有统计学意义(P<0.05)。结论引物ITS1/ITS4和ITS3/ITS4的特异性良好,后者较前者扩增敏感性更高;测序真菌ITS区可作为临床快速检测穿刺引流液中病原性真菌感染的方法。; 黄君华张书婉张宁; 关键词：测序

实时荧光定量PCR在儿童继发性血流感染中的应用被引量：4: 2017年; 目的探讨荧光定量PCR(fluorescence real-time quantitative PCR,FQ-PCR)在检测儿童血流感染病原菌中的作用,探究原发感染部位细菌载量与继发性血流感染及培养阳性率之间的关系。方法收集14例原发感染部位培养鉴定为鲍曼不动杆菌且怀疑有继发性血流感染的患儿标本,提取细菌DNA并进行16S rDNA-PCR和SYBR Green荧光定量PCR,对原发部位标本和血液标本的定量结果及血培养结果进行统计学分析。结果 14例原发部位标本(9例肺泡灌洗液标本,5例腹水标本)荧光定量PCR均有结果,细菌载量的中位数(四分位数)为5.64×10~6(3.15×10~5,4.345×10~7)CFU/ml,相对应的14例血液标本也均得到PCR结果,细菌载量的中位数(四分位数)为1.585×10~5(2.315×10~3,5.817×10~5)CFU/ml,二者差异具有统计学意义(Z=-2.941,P<0.01);血培养10~份阳性,细菌载量的中位数(四分位数)为2.90×10~5(1.058×10~5,1.057×10~6)CFU/ml,4份培养阴性,细菌载量的中位数(四分位数)为1.79×10~3(8.60×10~2,2.315×10~3)CFU/ml,二者差异也具有统计学意义(Z=-2.828,P<0.01)。结论儿童继发性血流感染原发部位的细菌载量比血液中高,血液中细菌载量在10~5CFU/ml上时可使血培养阳性。; 黄君华张书婉; 关键词：荧光定量PCR 血培养

《临床检验基础》实验教学改革初探被引量：1: 2015年; 《临床检验基础》实验教学改革应从加强基本技能训练、开设综合性设计性实验、充分利用多媒体教学、开放实验室、开展第二课堂等五个方面抓起,努力提高实验教学质量。; 张淑莉黄君华黄凤霞贺红艳; 关键词：临床检验基础实验教学

多重PCR系统快速检测儿童血流感染7种常见病原菌被引量：4: 2016年; 目的建立快速检测儿童血流感染常见病原菌的多重聚合酶链反应（PCR）系统。方法在16S r DNA-PCR结合测序鉴定血流感染病原菌的基础上筛选出7种儿童血流感染常见病原菌,针对这些病原菌设计特异性引物组合成多重PCR系统,用临床常见的15种细菌、4种真菌及人类细胞检测该系统的检测性能,并将该系统与血培养法及16S r DNA-PCR进行比较。结果 180例血液样本中血培养法阳性14例,阳性率为7.8%;16S r DNA-PCR阳性28例,阳性率为15.6%;多重PCR系统阳性25例,阳性率为13.9%。多重PCR系统病原菌检出率高于血培养法（P〈0.05）,与16S r DNA-PCR比较,差异无统计学意义（P〉0.05）。结论所建立的多重PCR系统能够快速、准确地检测引起儿童血流感染的7种常见病原菌,比常规血培养法提早3~5 d将病原菌鉴定到种,对临床及时合理用药具有指导意义。; 黄君华张书婉; 关键词：多重聚合酶链反应血流感染细菌儿童

PCR-变性梯度凝胶电泳技术分析肺炎儿童下呼吸道菌群多样性被引量：1: 2016年; 目的初步探讨PCR-变性梯度凝胶电泳(PCR-DGGE)检测肺炎儿童下呼吸道菌群多样性的作用。方法收集10份培养阳性的患儿肺泡灌洗液2~5 m L,经细菌DNA提取、16S r DNA-PCR后进行变性梯度凝胶电泳(DGGE)分析,对优势条带进行测序。结果经培养10份标本中7份鉴定为一种菌感染,3份培养出两种病原菌;经PCR-DGGE分析8份标本出现多条明显条带,2份得到一条条带,共筛选出12个优势条带;DGGE法得到的细菌种类多于培养法。结论 PCR-DGGE可较好地鉴定混合细菌感染性肺炎病原菌并能检测到培养法没有检出的细菌;儿童肺炎主要以肺炎链球菌、大肠埃希菌、草绿色链球菌等病原菌为主。; 黄君华武永红张书婉; 关键词：肺炎变性梯度凝胶电泳儿童

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黄君华

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