曹薇
- 作品数：18 被引量：8H指数：2
- 供职机构：中国农业科学院上海兽医研究所更多>>
- 发文基金：中央级公益性科研院所基本科研业务费专项资金项目国家科技重大专项上海市科技兴农重点攻关项目更多>>
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- 微小隐孢子虫CP15-P23-CP15/60基因的融合表达及抗血清的制备
- 2012年
- 以微小隐孢子虫基因组DNA为模板,PCR扩增获得子孢子表面抗原CP15、P23和CP15/60基因。利用重叠延伸PCR(SOE PCR)将该3段基因片段串联在一起,各基因片段之间引入柔性氨基酸接头(GGGGS)编码基因。将串联基因克隆到原核表达载体pET-28a(+)上,构建重组表达载体,转化到大肠埃希菌BL21(DE3)中进行诱导表达,将纯化的重组蛋白免疫Balb/c小鼠制备多克隆抗体。结果表明,获得了CP15-P23-CP15/60融合基因,并在大肠埃希菌中高效表达,Western blot显示重组蛋白能被牛抗微小隐孢子虫阳性血清识别,制备的多克隆抗体能被重组蛋白特异性识别,表明获得的重组蛋白具有较好的抗原性。
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- 关键词：微小隐孢子虫原核表达重叠延伸PCR
- 小附红细胞体mpg1基因的克隆及序列分析
- 根据猪附红细胞体(Mycoplasma suis)3：磷酸甘油醛脱氢酶样蛋白1基因(msgl)序列设计引物，对上海地区分离的小附红细胞体(M.Parvum)阳性猪全血DNA进行PCR扩增，获得小附红细胞体3：磷酸甘油醛脱...
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- 关键词：克隆
- 猪附红细胞体MSG1基因的克隆及序列分析
- 为研究猪附红细胞体(M.suis) MSG1基因的遗传变异特点,从上海地区3个屠宰场采集自然感染附红细胞体的猪血液,提取基因组DNA,根据GenBank已经报道的猪附红细胞体MSG1基因序列(登录号AM407404.1)...
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- 猪源附红细胞体检测试剂盒及方法和应用
- 本发明公开一种猪源附红细胞体检测试剂盒，该试剂盒包括：针对猪源附红细胞体G1基因设计的TaqMan探针和引物对，该探针与猪源附红细胞体G1基因第658～793位核苷酸序列特异性结合，该引物对用于扩增猪源附红细胞体G1基因...
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- 文献传递
- 小附红细胞体MPG1基因、蛋白及应用
- 本发明公开了一种小附红细胞体基因，该基因为MPG1基因，其编码的氨基酸序列与SEQ ID NO.1所示序列具有98.2％以上同源性。本发明还公开了上述基因编码的小附红细胞体MPG1蛋白。本发明的小附红细胞体MPG1基因和...
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- 文献传递
- 微小隐孢子虫CP15-P23-CP15/60基因的融合表达及其抗血清的制备
- 以微小隐孢子虫（Cryptosporidium parvum）基因组DNA为模板,PCR扩增获得子孢子表面抗原CP15、P23和CP15/60基因。利用重叠延伸PCR（SOE PCR）将该三段基因片段串联在一起,各基因片...
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- 关键词：微小隐孢子虫原核表达重叠延伸PCR
- 文献传递
- 小附红细胞体mpg1基因的克隆及序列分析
- 2014年
- 根据猪附红细胞体3-磷酸甘油醛脱氢酶样蛋白1基因（msgl）序列设计引物，对上海地区分离的小附红细胞体阳性猪全血DNA进行PCR扩增，获得小附红细胞体3-磷酸甘油醛脱氢酶样蛋白1基因（mpgl）并进行测序和分析，研究其遗传变异特点。结果显示，共获得了11条小附红细胞体mpgl基因序列，序列长度均为1011bp。同源性分析显示，所获得的1l条小附红细胞体mpgl基因序列之间的相似性为96．8％～99．9％，预测氨基酸序列的相似性在97．9％～100％之间；与GenBank中公布的猪附红细胞体msgl基因核苷酸序列相似性在96．6％～98．2％之间，氨基酸序列的相似性为98．2％～99．1％。系统进化分析表明，msgl基因与mpgl基因共同构成每个聚簇。
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- 关键词：克隆
- 微小隐孢子虫miR-2980真核表达载体的构建及初步鉴定(英文)
- 2012年
- [目的]构建微小隐孢子虫miR-2980真核表达载体,并进行鉴定。[方法]从微小隐孢子虫(Cryptosporidium parvum)基因组DNA扩增cp-miR-2980前体,克隆到pMD18-T载体上,经测序鉴定正确后亚克隆到pVAX1载体上,转染HCT-8细胞,提取细胞总RNA,RT-PCR检测cp-miR-2980的表达。[结果]成功地构建了cp-miR-2980真核表达载体pVAX-miR2980,RT-PCR检测证实其能在真核细胞HCT-8中表达。[结论]构建的真核表达载体pVAX-miR2980能在HCT-8细胞中成功表达cp-miR-2980,为后续研究cp-miR-2980的功能打下了基础。
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- 关键词：前体真核表达载体
- 微小隐孢子虫感染HCT-8细胞模型的建立及不同阶段虫体形态观察
- 为建立微小隐孢子虫体外感染模型，并对其在细胞内的不同发育阶段虫体形态进行观察，利用人回盲肠癌(HCT-8)细胞作为感染细胞，采用不同的接种细胞浓度和培养血清浓度进行培养，观察细胞的生长状况；在培养细胞中加入1×...
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- 微小隐孢子虫感染HCT-8细胞模型的建立及不同阶段虫体形态观察
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