姬高升
- 作品数：7 被引量：4H指数：1
- 供职机构：四川省畜牧科学研究院更多>>
- 发文基金：国家现代农业产业技术体系建设项目国家自然科学基金国家生猪现代产业技术体系建设项目更多>>
- 相关领域：农业科学生物学医药卫生更多>>
- 藏猪、藏梅猪和大约克夏猪感染HP-PRRSV后肺组织间PRRSV受体基因差异表达的研究
- 康润敏姬高升曾凯吕学斌殷明郁
- 禽传染性支气管炎病毒H52反向遗传株的构建被引量：2
- 2016年
- IBV H52基因组全长27.6kb,分13个1.3～2.9kb的片段扩增H52全长cDNA,额外扩增N-3′片段,并克隆到载体PMD19-T上.利用No see′m技术在每个片段中引入BsaⅠ或BsmBⅠ酶切位点,D1片段中引入沉默突变位点,在5′UTR端和N-3′引入T7启动子,3′UTR端引入Poly（A）尾.将克隆好的13个片段酶切,纯化,体外无缝连接为全长cDNA.将全长cDNA及N-3′体外转录获得它们的转录体,将转录体共转染BHK-21细胞,48h后收获细胞液,将细胞液接种10日龄SPF鸡胚获得反向遗传株H52-R.在鸡胚中盲传5代后,通过RT-PCR对无义突变位点进行扩增及序列分析,在反向株H52-R中发现引入的无义突变位点.对反向株H52-R的一些生物学特性如HA、EID50等测定发现,H52-R的这些生物学特性与亲本株H52相似.
- 许记刚王红宁杨鑫李然姬高升
- 关键词：IBV
- 禽传染性支气管炎病毒M_(41)株反向遗传株的构建被引量：1
- 2015年
- 禽传染性支气管炎病毒是目前危害禽养殖业的重大传染病之一。由于病毒基因组大、操作困难,给研究其基因组结构开发有效的疫苗带来了困难。本研究在对IBV M41毒株全基因组序列测序的基础上用DNAStar软件的Map Draw程序分析酶切位点的分布情况,将全基因组分为14段分段扩增。采用Primer6设计含No See’m酶切位点,在5’端引入T7启动子核心序列的引物,分段克隆于PMD19-T载体,通过引入的"No See’m式"Bsa I和BsmB I酶切位点,将亚克隆体外拼接成基因组全长cDNA。再通过5’端引入的T7启动子核心序列对基因组全长cDNA进行体外转录,使用电击的方法将全长转录物转染BHK-21细胞,转染后转入SPF鸡胚培养,鉴定成功获得了IBV M41拯救株。为研究IBV强毒株的致病机理、毒力位点及IBV新型疫苗的研究提供了参考,奠定了基础。
- 李然许记刚吴暄姬高升杨鑫王红宁
- 关键词：IBV
- 藏猪、藏梅猪和大约克夏猪对JXA1分离株易感性差异的研究
- 康润敏姬高升曾凯吕学斌
- HP-PRRSV人工感染荣昌猪的实验研究
- 引言猪繁殖与呼吸障碍综合征会导致母猪繁殖障碍,哺乳仔猪和生长仔猪生长迟缓、间质性肺炎和死亡率增高,给全球养猪业带来了巨大的经济损失。有研究表明不同品种猪对PRRSV的易感性存在差异,并且这种差异是由某些遗传因子导致的,因...
- 康润敏姬高升吕学斌曾凯
- 文献传递
- 不同品种猪感染HP-PRRSV后肺组织间PRRSV受体基因差异表达的研究被引量：1
- 2017年
- 为进一步了解藏猪、藏梅猪和大约克夏猪对高致病性猪繁殖与呼吸综合征病毒(HP-PRRSV)JXA1分离株具有不同易感性的分子机理,本研究建立实时荧光定量RT-PCR方法比较分析藏猪、藏梅猪和大约克夏猪感染JXA1分离株前、感染后4、7和14d肺脏中HSPG2、SIGLEC1、CD163、VIM和NMMHC-ⅡA5个PRRSV受体基因的差异表达情况。结果显示,藏猪感染JXA1分离株后4和14d肺脏中HSPG2的表达量显著高于感染前(P<0.05),而感染后7dHSPG2的表达量显著低于感染前(P<0.05),藏梅猪在感染后14dHSPG2的表达量显著高于感染后7d(P<0.05);藏猪感染后4和14d肺脏中SIGLEC1的表达量显著高于感染前(P<0.05),大约克夏猪感染后4、7和14dSIGLEC1的表达量均显著低于感染前(P<0.05);藏猪和藏梅猪感染后14d肺脏中CD163的表达量均显著高于感染前(P<0.05),大约克夏猪则感染后7和14d均显著低于感染前(P<0.05);藏猪感染后7d肺脏中VIM的表达量显著高于感染前(P<0.05),大约克夏猪在感染后7d显著低于感染前(P<0.05);藏梅猪感染后4d肺脏中NMMHC-ⅡA的表达量显著高于感染前(P<0.05),大约克夏猪在感染后4和14dNMMHC-ⅡA的表达量显著高于感染前(P<0.05)。结果表明,5个PRRSV受体基因中,SIGLEC1和VIM基因可能是影响藏猪、藏梅猪和大约克夏猪对JXA1分离株易感性存在差异的潜在关键基因。
- 康润敏姬高升曾凯吕学斌殷明郁
- 关键词：藏猪大约克夏猪
- 高致病性猪繁殖与呼吸综合征病毒人工感染荣昌猪的试验研究被引量：1
- 2016年
- 为了评价中国地方猪种对高致病性猪繁殖与呼吸综合征病毒(HP-PRRSV)的易感性,使用1×106TCID50/m L的SCwhn09CD毒株人工感染中国地方品种荣昌猪,记录荣昌猪在试验期间的临床症状、体温变化、体重和死亡率。采用q PCR方法检测感染后第4、7、11和14天血清中的病毒拷贝数。病理切片观察感染后第14天肺部组织的损伤情况。结果显示:感染后荣昌猪表现为精神沉郁、饮食废绝、腹式呼吸、末梢皮肤发绀、持续高温、死亡、鼻腔内有黏性液体等典型猪繁殖与呼吸障碍综合征(PRRS)症状。感染后第3天直肠温度上升至40℃并一直持续到第14天,并在第12天达到峰值41.2℃。试验期间荣昌猪死亡率达66.7%。第4天血清中的病毒拷贝数达到峰值1.63×106拷贝/m L,随后缓慢下降至4.12×105拷贝/m L,但第4、7、11、14天间血清中的病毒拷贝数不存在显著性差异(P>0.05)。肺部组织出现了严重的支气管肺炎病变,肺泡壁显著增厚,致多数肺泡腔闭锁。
- 康润敏姬高升吕学斌曾凯
- 关键词：直肠温度死亡率
