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陈蕾
作品数:
2
被引量:7
H指数:1
供职机构:
北京生物制品研究所
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发文基金:
国家科技支撑计划
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相关领域:
医药卫生
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合作作者
徐静
北京生物制品研究所
王欣怡
北京生物制品研究所
崔文禹
北京生物制品研究所
沈心亮
北京生物制品研究所
刘敬
北京生物制品研究所
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2009
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肠道病毒71型抗原含量检测方法的建立及初步验证
被引量:1
2009年
目的建立肠道病毒71型(EV71)抗原含量检测方法并进行初步验证,用于疫苗研制及生产过程中抗原含量的检测。方法以抗EV71单克隆抗体为包被抗体,酶标抗EV71多克隆抗体为检测抗体,建立双抗体夹心ELISA方法,以本室自制EV71抗原参考品为定量标准,建立抗原标准曲线,确定定量限度及最佳定量范围,并对该方法的准确度、精密度和特异性进行初步验证。结果建立了双抗体夹心检测EV71抗原含量的ELISA方法,定量限度为0.23μg/ml,最佳定量范围为7.32~0.23μg/ml,相关系数为R^2=0.9976;准确性较好,回收率在90%~110%之间;精密性较好,变异系数小于10%;除与EV71样品有特异性反应外,与其他样品无交叉反应。结论建立了检测EV71抗原含量的双抗体夹心ELISA方法并进行了初步验证,为疫苗研制过程中抗原含量测定提供了简便、快捷的检测手段。
徐静
崔文禹
李树香
刘敬
王欣怡
陈蕾
沈心亮
关键词:
肠道病毒属
酶联免疫吸附测定
抗肠道病毒71型单克隆抗体的制备及鉴定
被引量:6
2009年
目的制备肠道病毒71型(EV71)单克隆抗体,并进行初步鉴定。方法将RD细胞和Vero细胞培养的EV71原液通过氯化铯超速离心纯化,分别作为免疫抗原和检测抗原,制备单克隆抗体。通过Westernblot分析、间接免疫荧光试验和ELISA法鉴定单抗的特异性。采用间接ELISA法测定单抗的酶标效价,微量细胞培养中和试验测定单抗的中和效价。结果获得1株可稳定分泌抗EV71单克隆抗体的杂交瘤细胞株,其分泌的单抗可与EV71特异性结合,酶标效价为1∶204800,中和效价为1∶28。结论已成功筛选出1株分泌抗EV71的单抗细胞株,为建立EV71疫苗抗原含量测定方法奠定了基础。
崔文禹
徐静
李树香
刘敬
王欣怡
赵玉秀
陈蕾
沈心亮
关键词:
肠道病毒71型
单克隆抗体
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