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一种基于RPA技术的马尔堡病毒检测试剂盒及其应用: 本发明公开了一种基于RPA技术的马尔堡病毒检测试剂盒及其应用。通过实验证明：本发明的马尔堡病毒的RPA引物和探针可有效扩增靶基因，特异性达100％，灵敏度为1×102copies/反应，病毒可达到与...; 杨银辉康晓平吴晓燕李裕昌姜涛曹雪峰李靖户义; 文献传递

呼吸道感染相关腺病毒的通用型核酸等温检测试剂: 本发明公开了呼吸道感染相关腺病毒的通用型核酸等温检测试剂。本发明提供了用于鉴定呼吸道感染腺病毒的重组酶多聚酶核酸检测成套核酸，由引物对和探针组成；所述引物对由序列表中序列1所示的单链DNA分子和序列表中序列2所示的单链D...; 康晓平杨银辉李裕昌吴晓燕姜涛李靖户义曹雪峰; 文献传递

一种基于RPA技术的黄热病毒检测试剂盒及其应用: 本发明公开了一种基于RPA技术的黄热病毒检测试剂盒及其应用。通过实验证明：黄热病毒的RPA引物和探针可有效扩增靶基因，特异性达100％，灵敏度为1×102copies/反应，且在临床模拟样本中可检测...; 杨银辉康晓平吴晓燕李裕昌姜涛曹雪峰李靖户义; 文献传递

呼吸道感染相关腺病毒的通用型核酸等温检测试剂: 本发明公开了呼吸道感染相关腺病毒的通用型核酸等温检测试剂。本发明提供了用于鉴定呼吸道感染腺病毒的重组酶多聚酶核酸检测成套核酸，由引物对和探针组成；所述引物对由序列表中序列1所示的单链DNA分子和序列表中序列2所示的单链D...; 康晓平杨银辉李裕昌吴晓燕姜涛李靖户义曹雪峰; 文献传递

一种基于RPA技术的黄热病毒检测试剂盒及其应用: 本发明公开了一种基于RPA技术的黄热病毒检测试剂盒及其应用。通过实验证明：黄热病毒的RPA引物和探针可有效扩增靶基因，特异性达100％，灵敏度为1×102copies/反应，且在临床模拟样本中可检测...; 杨银辉康晓平吴晓燕李裕昌姜涛曹雪峰李靖户义

蜱传脑炎病毒包膜糖蛋白胞外区的真核表达优化及其在血清学检测中的效果评价: 2016年; 目的:优化蜱传脑炎病毒包膜糖蛋白胞外区的密码子,提高其在真核系统中的表达量,为蜱传脑炎病毒感染血清的检测提供更为有效的检测抗原。方法:对蜱传脑炎病毒MDJ01株E蛋白胞外区进行真核密码子优化,获得优化的胞外区蛋白基因序列OPT-EC;将抗原基因与海肾萤光素酶基因Rluc融合构建重组质粒pc DNA3.1-Rluc-OPT-EC、pc DNA3.1-Rluc-EC,用重组质粒转染COS7细胞获得融合抗原Rluc-OPT-EC和Rluc-EC,并将融合抗原用于临床感染血清样本的免疫共沉淀检测以评价抗原的灵敏性和特异性。结果:真核密码子优化显著提高了Rluc-OPT-EC的表达量;OPT-EC的检测灵敏度可达86%以上,其对乙型脑炎病毒(JEV)感染血清、黄热病度(YFV)感染血清、禽流感病毒(AIV)感染血清和正常人血清的检测特异度高于90%,但是在西尼罗病毒(WNV)感染血清和登革病毒(DV)感染血清的检测中发生了交叉反应。结论:优化后的E蛋白胞外区蛋白作为TBEV感染的检测抗原,能够有效地区分JEV、YFV感染,但不能区分WNV和DV感染。; 霍耐凡康晓平户义李裕昌李靖张雨冉鑫贾佳曹雪峰杨银辉; 关键词：蜱传脑炎病毒血清学诊断

蜱传脑炎病毒prM-E蛋白的真核表达及其在荧光素酶免疫共沉淀技术中的应用？: 2016年; 为了探索一种新型的血清学技术的荧光素酶免疫共沉淀技术（LIPS），本研究利用真核表达系统制备了蜱传脑炎病毒结构蛋白prM-E与荧光素酶融合蛋白，并评价了其在LIPS系统中的检测效果。首先以蜱传脑炎病毒RNA为模板，采用RT-PCR技术扩增prM-E抗原基因，连接到pNLF1-secN质粒上构建真核表达载体pNLF-prM-E，使prM-E蛋白与荧光素酶串联融合表达，并将该质粒转染到Cos7细胞中。结果显示，转染重组质粒pNLF-prM-E的细胞上清中可检测到荧光素酶的高表达；进而用间接免疫荧光试验（ IFA）检测到转染的细胞与蜱传脑炎病毒抗体特异性结合；在此基础上，用LIPS方法对蜱传脑炎病毒感染患者血清进行检测，从20份患者血清中检出19份阳性，7份对照血清均为阴性。结果表明该重组抗原具有良好的特异性和灵敏性，可以用于LIPS系统中的候选检测抗原。; 冉鑫康晓平李裕昌吴晓燕霍耐凡贾佳曹雪峰杨银辉; 关键词：蜱传脑炎病毒真核表达诊断抗原

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曹雪峰