吴杨
- 作品数：2 被引量：8H指数：2
- 供职机构：遵义市第一人民医院更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金贵州省科技创新人才团队建设项目更多>>
- 相关领域：医药卫生更多>>
- 靶向抑制胰岛素样生长因子Ⅰ型受体对裸鼠恶性胸腔积液的治疗作用被引量：6
- 2016年
- 目的 探讨靶向抑制胰岛素样生长因子Ⅰ型受体（IGF-1R）对裸鼠恶性胸腔积液的治疗作用。方法 Bal B/c裸鼠胸膜腔内注射人肺腺癌A549细胞，构建裸鼠正位恶性胸腔积液模型。将裸鼠随机分为模型组和TAE226治疗组，分别经口灌胃双蒸水和TAE226（20 mg/kg），观察两组裸鼠的胸腔积液、肿瘤重量。采用HE染色观察肿瘤组织学改变，酶联免疫吸附试验（ELISA）法检测胸水上清液IGF-1R蛋白的表达，逆转录聚合酶链反应（RT-PCR）检测肿瘤组织中IGF-1R mRNA的表达，免疫组化法检测肿瘤微血管密度（MVD）和细胞增殖指数（PI），Western blot法检测肿瘤组织中IGF-1R、p-IGF-1R、PI3K和p-PI3K蛋白的表达。结果 模型组和TAE226治疗组裸鼠胸腔积液分别为（241.4＋89.7）μl和（121.7＋78.8）μl，差异有统计学意义（P〈0.05）。模型组和TAE226治疗组的肿瘤重量分别为（671.4±281.4）mg和（316.7±186.3）mg，差异有统计学意义（P〈0.05）。RT-PCR检测显示，TAE226治疗组的IGF-1R mRNA表达水平为0.914＋0.029，模型组的IGF-1R mRNA表达水平为1.152±0.037，差异有统计学意义（P〈0.01）。ELISA检测结果显示，模型组和TAE226治疗组胸腔积液中IGF-1R蛋白表达水平分别为（41.0±4.7）μg/L和（24.0±3.1）μg/L，差异有统计学意义（P〈0.01）。免疫组化检测显示，模型组和TAE226治疗组的微血管密度（MVD）分别为（34.75±3.49）个/mm2和（22.25±3.63）个/mm2，PI分别为（75.25±7.15）%和（45.75±5.12）%，差异均有统计学意义（均P〈0.01）。Western blot检测显示，模型组中IGF-1R和PI3K蛋白的表达水平分别为1.03±0.33和1.05±0.28，TAE226治疗组分别为0.98±0.37和0.98±0.19，差异无统计学意义（P〉0.05）；模型组中p-IGF-1R和p-PI3K蛋白的表达水平分别为1.08±0.10和1.12±0.09，TAE226治疗组分别为0.51±0.08和0.86±0.09，差异有统计学意义（P〈0.01）。结论 抑制IGF-
- 张巍吴杨龚玲朱红兰黄贵川周国旗吴凯峰刘代顺
- 关键词：胸腔积液恶性肿瘤侵袭
- 黏着斑激酶在HUVEC的增殖、迁移、凋亡和毛细血管样结构形成中的作用被引量：2
- 2015年
- 目的:探讨以黏着斑激酶(focal adhesion kinase,FAK)特异性抑制剂TAE226处理或siRNA沉默FAK基因对人脐静脉血管内皮细胞(human umbilical vein endothelial cells,HUVEC)的增殖、迁移、细胞凋亡及毛细血管样结构形成的影响。方法:应用Real-time PCR检测HUVEC和胸膜间皮瘤(malignant pleural mesothelioma,MPM)细胞株Y-MESO-14、NCI-H290中FAK mRNA的表达。以FAK siRNA转染HUVEC细胞致FAK基因沉默或以TAE226处理,采用Western blotting法检测经/未经VEGF预处理的HUVEC中FAK蛋白的表达;采用MTT法检测TAE226或FAK siRNA处理对HUVEC增殖能力的影响,Annexin-V FITC/PI双染色流式细胞术检测两者对HUVEC细胞凋亡的作用,Transwell法检测TAE226及siRNA处理对HUVEC细胞迁移的影响,体外脉管生成实验检测HUVEC中毛细血管样结构形成的数量。结果:在HUVEC中FAK mRNA的表达量显著高于Y-MESO-14和NCI-H290细胞[(0.032±0.006)vs(0.014±0.001)、(0.006±0.002),均P<0.05]。HUVEC在VEGF刺激下,FAK和p FAK的表达量均有增高(P<0.05),FAK siRNA转染可以抑制VEGF预刺激下的FAK蛋白表达[(0.011±0.002)vs(0.036±0.004),P<0.01]。分别给予不同浓度TAE226或FAK siRNA处理,均可呈浓度依赖性地抑制HUVEC增殖、迁移和凋亡(P<0.01)。体外脉管生成实验发现,VEGF可促进HUVEC中毛细血管样结构的生成,TAE226[(14.32±7.83)vs(46.31±39.46)条,P<0.01]而FAK siRNA[(11.83±6.75)vs(42.86±27.63)、(48.32±18.19)条,均P<0.01]转染可明显抑制毛细血管样结构形成。结论:TAE 226处理或FAK siRNA转染可以抑制HUVEC增殖、迁移和诱导细胞凋亡,同时可显著抑制毛细血管样结构的形成,提示FAK可能成为靶向治疗恶性肿瘤的潜在靶点。
- 蒲盛蓝刘代顺龚玲吴杨朱红兰黄桂川张威
- 关键词：黏着斑激酶血管内皮细胞血管新生
