陈小帆
- 作品数：15 被引量：7H指数：2
- 供职机构：深圳北京大学香港科技大学医学中心更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金中国博士后科学基金广东省自然科学基金更多>>
- 相关领域：医药卫生生物学更多>>
- 一种快速筛选特应性皮炎样本的方法
- 本发明公开了一种快速筛选特应性皮炎样本的方法。本发明方法是通过使用一个标准品miRNA‑151a，与血清样本中提取的RNA一同进行特异性的逆转录，得到的逆转录产物在进行荧光定量PCR以检测样品和标准品中miRNA‑151...
- 陈小帆曹恒昌邹彦芬杨旸张李娟于波
- 文献传递
- Pax3对神经细胞中的转录调控作用的实验研究
- 2021年
- 目的:探讨Pax3的过表达对Neuro-2a细胞中转录本的表达影响,初步分析Pax3对Neuro-2a细胞可能的转录调控作用。方法:反复冻融裂解法获取Pax3过表达腺病毒后将神经瘤母细胞系Neuro-2a传代培养,而后将Pax3过表达腺病毒和传代培养后的Neuro-2a细胞加入到同一培养皿中,蛋白质免疫印迹(Western blot)检测过表达Pax3蛋白的Neuro-2a细胞(Pax3过表达组)和对照组(NC组)Neuro-2a细胞的Pax3蛋白表达水平,实时荧光定量PCR(qRT-PCR)法检测Pax3过表达组和NC组Neuro-2a细胞的Pax3mRNA水平,Trizol法提取Pax3过表达组和NC组Neuro-2a细胞的总RNA,然后进行全转录本测序,最后将选出的有差异性的基因使用实时荧光定量PCR(qRT-PCR)验证。结果:与NC组相比,Pax3过表达组的Pax3蛋白和Pax3mRNA表达水平明显升高(P<0.05);Pax3过表达组中发现了1045个基因表达上调,1313个基因表达下调。通过qRT-PCR验证发现在Pax3过表达组中Nppb和Chrna5表达水平上升(P<0.05),Arhgap5、Rock1、Rif1、Brca2、Prkg2和Stag2表达水平下降(P<0.05)。结论:Pax3过表达腺病毒感染Neuro-2a细胞后,其蛋白和m RNA表达水平均升高,Rock1、Rif1和Stag2可能作为Pax3的下游靶点参与调控Neuro-2a细胞周期和干细胞特性。
- 霍冰清杨旸陈小帆万峻张伟
- 关键词：PAX3
- hsa_circ_0000417表达水平对神经胶质瘤细胞生物学行为的影响被引量：2
- 2020年
- 目的探讨hsacirc0000417表达水平对胶质瘤细胞增殖、迁移和侵袭能力的影响。方法采用实时荧光定量PCR法检测hsacirc0000417在正常人星形胶质细胞HA1800和人源神经胶质瘤细胞U87MG和U251中相对表达量;选择hsacirc0000417相对高表达的人源神经胶质瘤细胞U251随机分为siRNA-circ抑制剂组和siRNA-NC对照组,分别转染靶向hsacirc0000417接头序列的抑制剂siRNA-circ和阴性对照siRNA-NC,采用实时荧光定量PCR法检测2组U251细胞hsacirc0000417相对表达量;转染1、2、3、4 d时,采用CCK-8法测转染后2组细胞增殖率;转染24 h时,采用划痕试验检测2组细胞划痕愈合面积,采用Transwell小室试验检测2组侵袭细胞数。结果人正常星形胶质细胞HA1800 hsacirc0000417相对表达量(1.00±0.06)高于人源神经胶质瘤细胞U251(0.85±0.03)和U87MG(0.36±0.02)(P<0.05),人源神经胶质瘤细胞U251高于U87MG(P<0.05)。转染后siRNA-circ抑制剂组hsacirc0000417相对表达量(0.04±0.01)低于siRNA-NC对照组(1.00±0.09)(P<0.05);转染1、2、3、4 d时,siRNA-circ抑制剂组细胞增殖率[(90.55±6.30)%、(90.88±2.87)%、(72.42±7.83)%、(65.51±4.28)%]均低于siRNA-NC对照组[(100.00±5.24)%、(100.00±7.86)%、(100.00±4.51)%、(100.00±7.57)%](P<0.05)。转染24 h时,siRNA-circ抑制剂组划痕愈合面积百分比[(12.26±2.06)%]和侵袭细胞数[(207±95)个]少于siRNA-NC对照组[(19.01±3.89)%、(814±102)个](P<0.05)。结论 Hsacirc0000417可提高神经胶质瘤细胞U251的增殖、迁移和侵袭能力,hsacirc0000417有可能成为神经胶质瘤新的治疗靶点。
- 李源庆陈小帆张伟
- 关键词：神经胶质瘤增殖迁移
- 一种小鼠腹腔注射和尾静脉注射用辅助固定给药装置
- 本发明涉及一种小鼠腹腔注射和尾静脉注射用辅助固定给药装置，一个固定小鼠的组装管道，一个固定尾巴的盖子和一个可调节的腹腔注射窗口。通过管道将小鼠活动空间限制，保证其无法伤害到实验者，利用盖子和夹子固定尾巴，控制小鼠无法移动...
- 杨旸冯雪莉胡浩陈小帆张伟章东生刘小娟黎满慧
- 过表达原钙黏蛋白7对小鼠皮层神经元突起的影响
- 2020年
- 目的探讨过表达原钙黏蛋白7(Pcdh7)基因对小鼠原代皮层神经元突起发育的影响。方法体外原代培养C57/B6小鼠胚胎18.5 d的大脑皮层神经元,随机分为空白对照组、实验对照组(空载组)和过表达原钙黏蛋白7基因组(过表达组)。运用免疫细胞化学术检测神经元突起的标记物β-Tubulin Ⅲ的表达来反映各组培养的神经元轴突的长度和初级树突分支数,同时,采用Western blot检测各组神经元Pcdh7及磷酸化丝切蛋白的表达水平。结果过表达Pcdh7基因后,其皮层神经元轴突长度[(247.4±99.38)μm]显著高于对照组和实验对照组[分别为(179.4±97.91)μm和(172.1±65.20)μm],差异有统计学意义(P<0.01),但其初级树突分支数(2.74±1.302)却明显低于对照组和空载组(分别为3.726±0.890和3.793±1.196)(P<0.01);而Western blot结果显示,当原代培养的神经元过表达Pcdh7基因时,与对照组相比,其磷酸化丝切蛋白的表达水平明显降低(P<0.01)。结论在原代培养的小鼠皮层神经元中过表达Pcdh7基因,在致其神经元轴突过度生长的同时,并抑制其树突产生分支。其机制可能与下调磷酸化丝切蛋白的表达水平相关。
- 何英宇文婷李佳娜陈小帆熊轶
- 关键词：皮层神经元丝切蛋白
- 一种趋化因子TARC/CCL17体外表达和分离纯化的方法
- 本发明公开了一种体外重组表达人胸腺活化调节趋化因子TARC/CCL17的方法。本发明方法是通过大肠杆菌融合表达人TARC/CCL17蛋白，再使用蛋白酶切，亲和层析，凝胶层析和离子交换层析的方法纯化得到纯净的人TARC/C...
- 陈小帆曹恒昌邹彦芬杨旸张李娟于波
- 文献传递
- 环状RNA circRtn4对小鼠成肌细胞增殖和分化功能的影响被引量：1
- 2019年
- 目的探讨circRtn4在小鼠成肌细胞C2C12细胞中的表达情况及其对成肌细胞增殖和分化功能的影响。方法对数生长期小鼠成肌细胞C2C12细胞,采用PCR检测C2C12细胞中circRtn4表达情况,采用实时荧光定量PCR法检测分化前及分化第1、2、3、4天circRtn4相对表达量,采用核质分离实验确定细胞内定位。对数生长期C2C12细胞分为沉默组和对照组,分别转染特异性靶向circRtn4的siRNA和阴性对照siRNA,采用实时荧光定量PCR检测2组细胞circRtn4沉默效率和脱靶情况,采用CCK-8法检测培养前及培养第1、2、3、4天2组细胞增殖率,采用免疫荧光法和Western blot法检测2组分化第2天MYOG蛋白和分化第4天MHC蛋白表达情况。结果 C2C12细胞分化第3天circRtn4相对表达量(3.72±0.32)高于分化前(1.00±0.01)及分化第1天(0.76±0.03)、第2天(1.21±0.12)和第4天(2.51±0.33)(P<0.05),分化第4天高于分化前及分化第1、2天(P<0.05),分化第1天低于分化前(P<0.05);circRtn4在C2C12细胞质中占67.93%,细胞核中占32.07%;沉默组circRtn4相对表达量(0.03±0.02)低于对照组(0.97±0.03)(P<0.05),Rtn4 mRNA相对表达量(1.11±0.11)与对照组(0.99±0.03)比较差异无统计学意义(P>0.05);培养前及培养第1、2、3、4天,2组细胞增殖率比较差异均无统计学意义(P>0.05);沉默组分化第2天表达MYOG蛋白的细胞数减少,分化第4天表达MHC蛋白的细胞肌纤维化不明显,细胞极化和融合不明显;沉默组分化第2天MYOG蛋白(0.68±0.05)和分化第4天MHC蛋白(0.75±0.06)相对表达量明显低于对照组(1.00±0.09、1.00±0.13)(P<0.05)。结论 circRtn4在成肌细胞C2C12细胞中表达,在成肌细胞分化中后期表达量明显增加;circRtn4表达被沉默后,C2C12细胞增殖无明显变化,但其分化受到抑制。
- 王海霞陈小帆张伟
- 关键词：成肌细胞增殖分化小鼠
- 两种致敏途径诱导的过敏性气道炎症小鼠模型的免疫应答比较
- 2023年
- 目的比较两种致敏途径诱导的过敏性气道炎症小鼠模型的免疫炎症差异,为使用过敏性气道炎症小鼠模型的研究提供参考。方法建立卵清蛋白经腹腔致敏和经皮肤致敏诱导的过敏性气道炎症小鼠模型,通过ELISA分析小鼠血清中的总IgE和OVA特异性IgE。支气管肺泡灌洗液细胞行瑞士-吉姆萨染色以评估嗜酸性气道炎症。对肺组织进行苏木素伊红染色和高碘酸希夫染色以评估其组织病理学变化,肺免疫细胞进行mRNA测序和数据分析。结果经腹腔致敏和经皮致敏诱导的过敏性气道炎症小鼠模型均表现出肺组织嗜酸性粒细胞浸润、支气管上皮杯状细胞增生、Th2型细胞因子表达上调的炎症反应。但腹腔致敏模型系统免疫更强,经皮致敏模型局部免疫更强。哮喘相关通路如JAK-STAT信号通路在两个模型中均上调而Hippo通路仅在经皮致敏模型中下调。经皮致敏模型与金属蛋白酶、肥大细胞和嗜碱性粒细胞的关系更密切。结论过敏原经腹腔和经皮肤致敏途径不同,诱导产生的过敏性气道炎症小鼠模型的免疫学表型和分子机制存在差异。
- 汤敏丹李旭张考苑杨婷卓凡唐思怡窦侠陈小帆
- 关键词：过敏性气道炎症小鼠模型转录组免疫表型
- CircRNA翻译功能的研究进展及问题
- 2022年
- Circular RNA(CircRNA)即环状RNA,是一类在真核细胞中含量丰富,且具有重要的生物学功能的RNA分子。已有研究表明CircRNA存在非帽依赖的蛋白翻译机制,其编码的蛋白产物对癌症发生发展和寿命等方面发挥着非常重要的调控作用。本文就CircRNA的翻译机制及其产物功能等研究热点予以综述。
- 邓小英刘圣林胡浩陈小帆
- 关键词：翻译生物学功能生物标志物
- 特应性皮炎患者血清microRNA的差异性表达被引量：3
- 2016年
- 目的探讨深圳地区特应性皮炎(atopic dermatitis,AD)患者血清microRNA(miRNA)表达差异,为AD的早期诊断提供生物标志物。方法提取500例AD患者(AD组)和200例正常人(正常对照组)血清总RNA并进行miRNA测序,用实时荧光定量PCR验证差异表达的miRNA。结果与正常对照组相比,AD组患者血清中发现28个具有2倍以上差异的miRNA,其中21个miRNA在外周血血清中含量升高,7个miRNA在外周血血清中含量降低;对28个差异表达的miRNA采用实时荧光定量PCR进行验证,发现hsa-miR-186-5p、hsa-miR-409-3p、hsa-miR-423-5p、hsa-miR-6852-5p表达在AD患者外周血血清中升高。结论hsa-miR-186-5p、hsa-miR-409-3p、hsa-miR-423-5p、hsa-miR-6852-5p在AD的发病过程中可能起关键作用,对AD早期临床诊断有重要意义。
- 张李娟陈小帆张杰张伟
- 关键词：特应性皮炎MICRORNA血清标志物
