张伟
- 作品数：27 被引量：26H指数：3
- 供职机构：深圳北京大学香港科技大学医学中心更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金广东省自然科学基金深圳市科技计划项目更多>>
- 相关领域：医药卫生生物学更多>>
- 一种快速逆转录microRNA文库的方法
- 本发明公开了一种快速逆转录microRNA文库的方法。本发明方法是在逆转录时通过使用PolyA加尾酶，在所有miRNA的末端增加一段PolyA序列，同时将逆转录引物中与miRNA特异性结合的部分换成可以与PolyA序列相...
- 万峻杨旸张超于波关明张伟董小林
- 文献传递
- hsa_circ_0000417表达水平对神经胶质瘤细胞生物学行为的影响被引量：2
- 2020年
- 目的探讨hsacirc0000417表达水平对胶质瘤细胞增殖、迁移和侵袭能力的影响。方法采用实时荧光定量PCR法检测hsacirc0000417在正常人星形胶质细胞HA1800和人源神经胶质瘤细胞U87MG和U251中相对表达量;选择hsacirc0000417相对高表达的人源神经胶质瘤细胞U251随机分为siRNA-circ抑制剂组和siRNA-NC对照组,分别转染靶向hsacirc0000417接头序列的抑制剂siRNA-circ和阴性对照siRNA-NC,采用实时荧光定量PCR法检测2组U251细胞hsacirc0000417相对表达量;转染1、2、3、4 d时,采用CCK-8法测转染后2组细胞增殖率;转染24 h时,采用划痕试验检测2组细胞划痕愈合面积,采用Transwell小室试验检测2组侵袭细胞数。结果人正常星形胶质细胞HA1800 hsacirc0000417相对表达量(1.00±0.06)高于人源神经胶质瘤细胞U251(0.85±0.03)和U87MG(0.36±0.02)(P<0.05),人源神经胶质瘤细胞U251高于U87MG(P<0.05)。转染后siRNA-circ抑制剂组hsacirc0000417相对表达量(0.04±0.01)低于siRNA-NC对照组(1.00±0.09)(P<0.05);转染1、2、3、4 d时,siRNA-circ抑制剂组细胞增殖率[(90.55±6.30)%、(90.88±2.87)%、(72.42±7.83)%、(65.51±4.28)%]均低于siRNA-NC对照组[(100.00±5.24)%、(100.00±7.86)%、(100.00±4.51)%、(100.00±7.57)%](P<0.05)。转染24 h时,siRNA-circ抑制剂组划痕愈合面积百分比[(12.26±2.06)%]和侵袭细胞数[(207±95)个]少于siRNA-NC对照组[(19.01±3.89)%、(814±102)个](P<0.05)。结论 Hsacirc0000417可提高神经胶质瘤细胞U251的增殖、迁移和侵袭能力,hsacirc0000417有可能成为神经胶质瘤新的治疗靶点。
- 李源庆陈小帆张伟
- 关键词：神经胶质瘤增殖迁移
- 粉尘螨诱导建立“特应性皮炎-哮喘”小鼠模型被引量：7
- 2018年
- 目的建立粉尘螨变应原经皮致敏、滴鼻激发诱发的"特应性皮炎-哮喘"小鼠模型。方法以C57BL/6J小鼠为研究对象,通过反复破坏皮肤屏障后贴敷粉尘螨变应原经皮致敏、然后给予粉尘螨滴鼻激发气道炎症的方法制备特应性皮炎-哮喘小鼠模型,并从皮肤及肺组织病理、免疫炎症分子定量表达、支气管肺泡灌洗液中炎症细胞计数以及气道高反应性检测等不同方面对小鼠模型进行评估。结果模型小鼠致敏处皮肤组织病理呈典型的湿疹样改变,皮损中Th2型细胞因子表达显著升高,Th1型细胞因子表达与对照差异无统计学意义。模型小鼠支气管肺泡灌洗液中细胞总数显著增多,其中淋巴细胞和嗜酸细胞数量显著高于对照组。肺组织病理可见支气管周围明显的嗜酸性粒细胞为主的炎症细胞浸润,肺组织中Th2型细胞因子表达也显著升高。模型小鼠经气道吸入甲酰胆碱后肺阻力随甲酰胆碱浓度升高而显著增加,肺动态顺应性则显著下降。结论成功建立粉尘螨变应原经皮致敏诱导的"特应性皮炎-哮喘"动物模型,为特应性进程发病机制的研究提供了方法。
- 窦侠刘小明李子卓张雅瑞张杰董小林张伟
- 关键词：特应性皮炎哮喘粉尘螨动物模型
- 一种表达并纯化可溶性屋尘螨主要过敏原Der p 2蛋白的方法
- 本发明涉及一种在大肠杆菌中高可溶性表达并纯化屋尘螨主要过敏原Derp2蛋白的方法。本方法以大肠杆菌伴侣蛋白触发因子(Trigger Factor，TF)作为融合标签实现了Derp2的高可溶性表达并优化出高效的纯化工艺，用...
- 魏准于波曹拓杨旸窦侠张伟
- 文献传递
- 一种判定中国汉族人IL-12b基因rs6887695单核苷酸多态性与系统性红斑狼疮相关性的方法
- 本发明公开了一种判定中国汉族人IL-12b基因rs6887695单核苷酸多态性与系统性红斑狼疮相关性的方法。本发明通过HRMA结合非标记探针，成功地区分了所有的基因型，结果显示，在中国汉族系统性红斑狼疮患者中，IL-12...
- 张伟于波邵勇万峻关明吴琦张杰刘立
- 文献传递
- 一种判定中国人群TNIP1单核苷酸多态性与系统性红斑狼疮的关联性的方法
- 本发明公开了判定中国人群TNIP1单核苷酸多态性与系统性红斑狼疮的关联性的方法。本发明是采用非标记探针高分辨率溶解曲线法检测位于TNIP1内含子上的SNPrs7708392的基因型，检测结果显示，新发现位于rs77083...
- 万峻于波邵勇关明张伟陈岳文董小林张超
- 文献传递
- 一种通过TARC/CCL17评估特异性皮炎病情的诊断方法
- 本发明公开了一种通过TARC/CCL17评估特异性皮炎病情的诊断方法。本发明方法是利用病人血清中TARC/CCL17蛋白含量和一般诊断中所用SCORAD评分法的高度相关性，使用Elisa测定特异性皮炎患者血清中的TARC...
- 张伟魏准于波窦侠杨旸章东生
- 文献传递
- 一种血浆游离miRNAs绝对定量的方法
- 本发明公开了一种血浆游离miRNAs绝对定量的方法。本发明方法是通过对血浆游离RNA的提取、引物与探针的灵敏度和特异度评价、内参基因的选择、标准曲线的建立、数据的计算和校正这一整个过程，提供一种稳定、可靠的血浆游离miR...
- 万峻王奕诺张伟魏准杨旸
- 文献传递
- 一种小鼠腹腔注射和尾静脉注射用辅助固定给药装置
- 本发明涉及一种小鼠腹腔注射和尾静脉注射用辅助固定给药装置，一个固定小鼠的组装管道，一个固定尾巴的盖子和一个可调节的腹腔注射窗口。通过管道将小鼠活动空间限制，保证其无法伤害到实验者，利用盖子和夹子固定尾巴，控制小鼠无法移动...
- 杨旸冯雪莉胡浩陈小帆张伟章东生刘小娟黎满慧
- circZfp609在小鼠成肌细胞系C2C12细胞中表达及意义
- 2021年
- 目的探讨circZfp609在小鼠成肌细胞系C2C12细胞增殖和分化过程中的作用及意义。方法采用核质分离实验观察增殖期与分化期C2C12细胞circZfp609核质分布情况;增殖期与分化期C2C12细胞分别分为circZfp609敲低组、Zfp609敲低组和对照组,分别转染特异性敲低circZfp609的siRNA、特异性敲低Zfp609的siRNA和对照siRNA。采用实时荧光定量PCR法检测增殖期C2C12细胞circZfp609及Zfp609 mRNA相对表达量,采用CCK8法检测增殖期C2C12细胞的细胞增殖率;采用免疫荧光法观察分化期C2C12细胞肌细胞生成素(myogenin,MYOG)和肌球蛋白重链(myosin heavy chain,MHC)蛋白表达情况,采用Western blot法检测分化期C2C12细胞MYOG、MHC蛋白相对表达量。结果增殖期C2C12细胞质中circZfp609占52.75%,分化期C2C12细胞质中circZfp609占71.38%。增殖期C2C12细胞circZfp609敲低组circZfp609相对表达量(0.124±0.008)低于对照组(1.000±0.064)(t=59.262,P<0.001),Zfp609 mRNA相对表达量(1.269±0.173)与对照组(1.000±0.052)比较差异无统计学意义(t=2.533,P=0.131);Zfp609敲低组circZfp609相对表达量(1.063±0.138)与对照组(1.000±0.159)比较差异无统计学意义(t=0.931,P=0.442),Zfp609 mRNA相对表达量(0.580±0.062)低于对照组(1.000±0.121)(t=12.936,P=0.007)。增殖期C2C12细胞circZfp609敲低组培养第3、4天细胞增殖率[(62.93±14.35)%、(49.96±8.14)%]均低于对照组[(100.00±11.63)%、(100.00±16.76)%](t=11.431,P=0.002;t=8.245,P=0.003);Zfp609敲低组培养第2、3天细胞增殖率[(139.06±7.58)%、(157.12±13.50)%]均高于对照组[(100.00±9.25)%、(100.00±23.68)%](t=3.324,P=0.037;t=6.062,P=0.009),培养第4天细胞增殖率[(109.73±17.94)%]与对照组[(100.00±14.59)%]比较差异无统计学意义(t=0.834,P=0.465)。在C2C12细胞分化期,与对照组比较,circZfp609敲低组细胞MYOG、MHC蛋白表达增强,细胞纤维长度增长,极化明显,出现细胞融合;Zfp609敲低组细胞MYOG、MHC蛋白表达呈不同程度降低,细胞纤维�
- 黎满慧王海霞张伟方征宇
- 关键词：C2C12细胞增殖分化小鼠
