刘忠英
- 作品数：19 被引量：361H指数：8
- 供职机构：中国人民解放军第一军医大学更多>>
- 发文基金：广东省自然科学基金国家自然科学基金广东省卫生厅资助课题更多>>
- 相关领域：医药卫生生物学更多>>
- β地中海贫血的大人群筛查及产前诊断被引量：73
- 1996年
- 为了探索在我国实施控制β地中海贫血（β地贫）重症患儿出生的预防计划的实践模式，对在广州市妇婴医院例行产前检查的６７３１例孕妇及其配偶（共１３４６２人）进行血液学筛查，检出β地贫阳性病例４５２人，发病率为３．３６％，采用能检测中国人１８种β地贫突变的快速反向点杂交法分析上述阳性样品，４４６例被确定了基因型，检出１１种β地贫突变，另有６例未发现突变，其中１例经ＤＮＡ序列分析后确定为一种世界上未见报道的新突变──密码子３７（ＴＧＧ→ＴＡＧ）琥珀突变。在上述人群中筛出双方均为β地贫携带者的初孕夫妇１２对（占０．１８％），通过遗传咨询，对其中１０个家庭的１２个胎儿进行了产前诊断，确定正常胎儿２例，β地贫杂合子５例，重症患儿（双重杂合子）４例，另１例为不完全诊断（已排除重症的可能）．对确诊的重症β地贫患儿于诊断后２周内终止妊娠。这是国内首次在系统筛查基础上完成的预测性产前诊断报告。
- 徐湘民廖灿刘忠英黄以宁张基增李坚彭朝辉邱洛琳蔡旭恒
- 关键词：Β-地中海贫血遗传筛查产前诊断流行病学
- 反向点杂交法用于80例β地中海贫血的快速产前诊断被引量：15
- 1996年
- 为探讨反向点杂交法（ＲＤＢ）在β地中海贫血（β地贫）基因诊断中的优越性，应用该方法对７６个家庭的８０例β地贫高风险胎儿进行产前诊断。在８０例被检胎儿中，完全诊断的有７７例：包括正常个体２２例；β地贫杂合子４９例；双重杂合子４例及纯合子２例。另有３例为不完全诊断，其中２例被排除了重症的可能；余１例有１／２的机会为β地贫双重杂合子。ＲＤＢ法可同时筛查１８种中国人β地贫突变，且操作简便快速。
- 廖灿徐湘民黄以宁刘忠英李坚刘忠英李坚彭朝晖蔡旭恒
- 关键词：地中海贫血产前诊断反向点杂交
- 广西柳州市血红蛋白H病的分子流行病学和血液学研究被引量：19
- 2002年
- 蔡稔梁昕潘莉珍黄丽华黄燕珍李莉艳赵永忠刘忠英徐湘民
- 关键词：血红蛋白H病分子流行病学血液学
- 一种缺失型人α珠蛋白基因的PCR检测方法
- 本发明提供一种缺失型人α珠蛋白基因的PCR检测方法，本发明采用4个(2对)引物P1、P2、P7、P4组成2对PCR反应，分别针对正常等位基因和缺失等位基因(-<Sup>SEA</Sup>/基因)，提供了引物的设计方案和结...
- 徐湘民肖维威钟雄霖刘忠英
- 文献传递
- 人全长PLCγ1基因真核表达载体的构建及鉴定(英文)被引量：1
- 2004年
- 目的构建人全长PLCγ1基因真核表达载体,以便进一步研究PLCγ1的作用及其机制。方法自行设计一对带有HindⅢ和NotⅠ酶切位点的引物,采用RT-PCR技术从MG63细胞中扩增人全长PLCγ1cDNA(3878bp),纯化后,经HindⅢ-NotⅠ酶切,插入真核表达载体pLNCX2中,构建重组质粒pLNCX2/PLCγ1。通过PCR,限制性酶切分析及DNA直接测序对所构建的重组质粒进行鉴定。同时经瞬时转染后,利用RT-PCR及Westernblotting转染后LoVo细胞中PLCγ1的表达。结果RT-PCR产物经琼脂糖电泳分析所得片段大小与预期相符(3878bp)。重组质粒经HindⅢ-NotⅠ酶切后,得到3878bp(PLCγ1基因)及6100bp(载体pLNCX2)两个片段,同时重组质粒经HindⅢ-BglⅡ酶切后,得到约1300bp及约8500bp两个片段,与预期一致。DNA测序也证实了重组质粒的正确。经RT-PCR和Westernblot分析证实转染pLNCX2/PLCγ1的LoVo细胞中PLCγ1的表达均高于转染空质粒pLNCX2的LoVo细胞及未转染的LoVo细胞。结论成功构建了人全长PLCγ1基因真核表达载体pLNCX2/PLCγ1,为进一步研究PLCγ1的作用奠定了基础。
- 李秀梅邓凡曾位森华亮陆地李明王宏刘忠英罗深秋
- 关键词：真核表达载体RT-PCR
- 婚前β地中海贫血的大人群筛查及预测性产前诊断被引量：5
- 1999年
- 为了阐明珠海市这座新兴的“移民城市”人群中β地贫的携带率及其基因背景并进行预测性产前诊断,作者对婚前检查对象进行该病血液学筛查后,再采用PCR/异源双链分析法和反向点杂交法(RDB)确定阳性病例的基因型,结果 9 854人例行婚检对象中检出 β地贫阳性病例227人,β地贫的携带率为2.30％。227例阳性病例中的223例被确定了基因型,共检出10种β地贫突变并总结出它们的构成比。在上述人群中筛出双方均为β地贫携带者的对象7对(占0.14％),通过婚前指导和遗传咨询,婚后定期随访,对其中6个家庭的高风险胎儿进行了产前诊断。确定重症地贫胎儿2例并分别于确诊后1周和2周内终止妊娠,杂合子3例和正常胎儿1例。这是目前国内首次报告的在婚前检查中进行大人群地贫系统筛查基础上完成的预测性产前诊断。
- 周玉球李文典吴丽蓉肖鸽飞朱兰芳侯志贤卢金汉徐湘民刘忠英彭朝晖
- 关键词：地中海贫血婚前检查遗传筛查产前诊断
- 毛细管等电聚焦电泳定量分析健康成人及地中海贫血携带者的HbA_2被引量：5
- 2003年
- 目的 对等电聚焦毛细管电泳 (capillary isoelectric focusing,CIEF)检测血红蛋白 A2 (HbA2 )含量做出用于筛查地中海贫血 (地贫 )携带者的方法学评价。方法 收集 10 5名健康成人、93例经常规地贫筛查有阳性表型的连续临床样品。通过正常人样品分析比较 CIEF测定 Hb A2 与 Helena Spife combo电泳系统结果的一致性 ;通过比较样品内和样品间 Hb A2 的 CIEF测定值的变异系数评价该法的精确度和稳定性 ;通过分析阳性样品的基因型来评价 CIEF检测地贫的准确性。结果 用 CIEF分析当地健康人的Hb A2 正常参考值为 3 .59%～ 5.2 3 %。CIEF结果与常规血红蛋白电泳结果具有良好的线性关系 ;以基因分析为确诊标准 ,用 CIEF检测 Hb A2 含量 ,及结合红细胞指数阳性测定值所筛查的 87例 α-地贫或 β-地贫携带者、6例成人血红蛋白 E病例样品均被准确诊断 ,未见假阳性或假阴性结果。结论 等电聚焦毛细管电泳是一种快速高效、高稳定性、高精确度的 Hb A2 测定方法 。
- 华亮李坚刘忠英钟惠珠廖灿徐湘民
- 关键词：地中海贫血血红蛋白A2CIEFHBA2
- 用跨越断裂点的PCR技术快速诊断一种HPFH缺失突变被引量：4
- 1999年
- 目的建立一种简便快速检测缺失型遗传性持续性胎儿血红蛋白综合征（ｈｅｒｅｄｉｔａｒｙｐｅｒｓｉｓ－ｔｅｎｃｅｏｆｆｅｔａｌｈｅｍｏｇｌｏｂｉｎ，ＨＰＦＨ）的ＰＣＲ基因诊断技术。方法基于本室通过序列测定获得的该基因断裂点周围新的ＤＮＡ顺序资料，采用跨越断裂点的三引物双重ＰＣＲ设计方案，１个共用引物与２个分别针对正常和突变基因的引物在单管反应中构成２对特异性的ＰＣＲ反应。结果２个特异性扩增片段分别为５６５ｂｐ和３７６ｂｐ，与预期的ＰＣＲ产物大小相符，其中５６５ｂｐ为正常等位基因的扩增产物；３７６ｂｐ产物示缺失型等位基因。此三引物双重ＰＣＲ可在同一反应体系中进行，其结果能区别样品的不同基因型。结论该法简便快速，可作为常规方法用于临床疑诊样品的分子筛查。
- 刘忠英钟雄林李志琴徐湘民
- 关键词：胎儿血红蛋白HPFH产前诊断遗传病
- 一种缺失型人α珠蛋白基因的PCR检测方法
- 本发明提供一种缺失型人α珠蛋白基因的PCR检测方法,本发明采用4个(2对)引物P1、P2、P7、P4组成2对PCR反应,分别针对正常等位基因和缺失等位基因(－SEA/基因),提供了引物的设计方案和结果的解释。根据本发明的...
- 徐湘民肖维威钟雄霖刘忠英
- 文献传递
- Gap-PCR作为临床一线α-地中海贫血携带者筛查技术的应用评价被引量：18
- 2002年
- 目的评价检测中国人3种常见的缺失型α-地中海贫血(地贫)基因的gap-PCR作为临床一线α地贫携带者筛查技术的可行性。方法 以双盲试验对随机抽取的382份血样同时采用gap-PCR分子筛查技术和血液学分析法分别检测α-地贫基因型和α-地贫表型,并以 Southern blot分析法作平行对照分析。结果在382份样品中,用gap-PCR法检出3种常见的α－地贫基因-SEA、α37和、-α^(+2)分别为21、7和3例、据此该市人群中α－地贫的基因携带率为8．12%。在这些阳性样品中有7例和3例分别检出自血液学表型正常(7/10)和缺铁性贫血(3/10)样品。这些结果与 Southern blot分析完全一致。血液学表型筛查法仅检出其中的21例(除2例α－地贫表型阳性未定型外),该法的假阴性率为32.3%。因血液学表型筛查漏检了7例静止型和3例轻型α－地贫样品,故此法总的漏检率为2.62%。结论 与血液学筛查法比较,gap－PCR分子筛查技术更具有特异性和可靠性,是临床上进行α－地贫基因携带者(尤其是静止型α－地贫)筛查的可选用的一线技术。
- 周玉球肖鸽飞李文典朱兰芳屈信军李莉艳刘忠英莫秋华徐湘民
- 关键词：Α-地中海贫血遗传筛查聚合酶链反应分子诊断
