高亚丽
- 作品数：3 被引量：3H指数：1
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- 相关领域：医药卫生更多>>
- 骨形态发生蛋白和白血病抑制因子诱导肝干细胞分化被引量：1
- 2011年
- 目的在永生化的小鼠肝干（祖）细胞（HP）模型上筛选并优化高效的肝细胞定向分化诱导方法，探讨HP向肝细胞定向分化过程及分子机制。方法分别采用含人白血病抑制因子（LIF）、骨形态发生蛋白（BMP）2和BMP9基因的重组腺病毒感染HP，在病毒感染后第4天、第7天和第10天用糖原染色和吲哚花青绿（ICG）摄取实验观察HP的分化成熟度，并在第4、7、10、14天通过检测白蛋白启动子调控的荧光素酶报告基因活性，观察细胞合成白蛋白情况。计量资料比较用t检验。结果BMP2和BMP9对HP的诱导作用最强，荧光素酶活性、PAS染色和ICG摄取细胞阳性率随诱导时间的延长明显上升，在诱导后第7天最高，HP对BMP9的诱导应答最强，与对照组相比，酶活性增加了近9倍（t=17．30，P〈0．01），BMP2处理组增加了5倍（f=16．41，P〈0．01），LIF处理组增加了3倍（t=6．04，P〈0．01）。诱导第7天时，PAS染色细胞阳性率在BMP2和BMP9组分别为30％和45％；ICG细胞阳性率在BMP2和BMP9组分别为40％和30%。LIF诱导后，PAS染色、ICG摄取细胞阳性率以及荧光素酶活性有一定增加。结论BMP2、BMP9和LIF能够诱导HP向发育晚期肝细胞分化，并初步具备成熟肝细胞的一些功能。
- 高亚丽蔡雪飞刘娇单晓亮陈庆美周帆唐霓
- 关键词：干细胞细胞分化骨形态发生蛋白质类白血病抑制因子永生化
- 1.重要细胞因子对肝前体细胞诱导分化实验;2.丙型肝炎病毒F蛋白的原核表达与腺病毒构建
- 1.重要细胞因子对肝前体细胞诱导分化实验
目的：目前临床治疗肝癌，肝硬化的主要手段是肝移植，但由于肝供体缺乏，手术风险大，费用高，易发生免疫排斥反应等原因制约了这一技术的发展，因此以肝细胞移植和生物人工肝为代表...
- 高亚丽
- 关键词：丙型肝炎病毒F蛋白原核表达同源重组肝前体细胞
- 文献传递
- 丙型肝炎病毒F蛋白原核表达载体的构建、表达和纯化被引量：2
- 2009年
- 目的:构建丙型肝炎病毒(Hepatitis Cvirus,HCV)F蛋白的原核表达载体,表达pET32a(+)-HCVF融合蛋白。方法:根据丙型肝炎病毒F基因的全序列设计引物,以HCV1a型cDNA质粒H/FL为模板,通过PCR方法扩增得到F基因的编码区序列,将其定向克隆于含有6×Histag的原核表达载体pET32a(+),转化大肠杆菌JM109,经菌落PCR筛选,双酶切和测序鉴定阳性克隆后,转化大肠杆菌BL21,采用IPTG诱导表达融合蛋白,表达产物经SDS-PAGE电泳分析和Western-blot检测鉴定,并用Ni-NTA亲和层析柱纯化。结果:F基因以正确的方式插入到pET32a(+)载体中,重组质粒转化大肠杆菌BL21后经IPTG诱导表达,出现了与预期分子量相符的蛋白条带,该蛋白通过Westernblot检测具有6×Histag蛋白的免疫学活性。结论:成功构建了丙型肝炎病毒F蛋白的原核表达载体pET32a(+)-HCVF并表达和纯化出重组融合蛋白,为进一步研究F蛋白的生物学功能奠定了基础。
- 高亚丽刘娇刘湘汤华陈沂蔡雪飞唐霓
- 关键词：丙型肝炎病毒F蛋白原核表达
