姚西宁 作品数:4 被引量:10 H指数:2 供职机构: 军事医学科学院放射与辐射医学研究所 更多>> 发文基金: 全球变化研究国家重大科学研究计划 更多>> 相关领域: 医药卫生 更多>>
基于抗原表位制备抗人GP73单克隆抗体 肝癌是我国最常见的恶性肿瘤之一,甲胎蛋白(alpha-fetoprotein,AFP)是目前临床上最常用的肝癌诊断血清标志物,其诊断的敏感性在39~64%之间,特异性在76~91%之间,这样的敏感性和特异性难以满足人们对... 姚西宁关键词:抗原表位 噬菌体展示 单克隆抗体 肝癌 甲胎蛋白 文献传递 抗人HPPCn单克隆抗体的制备及鉴定 被引量:2 2010年 目的:制备高灵敏度的抗人HPPCn单克隆抗体(mAb),以用于HPPCn的功能研究及其疾病相关性研究。方法:用重组蛋白免疫雌性BALB/c小鼠,采用常规杂交瘤技术进行细胞融合,经ELISA法进行阳性克隆筛选、通过有限稀释法进行亚克隆,获得稳定分泌抗人HPPCnmAb的细胞株。采用间接ELISA、Western blot、Ig亚类快速定性试纸分析法等鉴定抗体的生物学特性;通过细胞免疫荧光实验观察了HPPCn蛋白的细胞定位。通过噬菌体肽库技术分析抗体所识别的抗原表位。结果:得到了1株稳定分泌抗人HPPCn抗体的杂交瘤细胞株,命名为W2-D5。经Ig亚类分析确定,该细胞株分泌的抗体属于IgG1亚类。间接ELISA检测表明,该抗体检测HPPCn的极限为0.1μg/L;Western blot结果显示,该抗体能特异性识别HPPCn。细胞免疫荧光实验,证实了HPPCn蛋白定位在细胞核。通过肽库筛选及表位分析认为,该抗体识别的表位可能为HPPCn7-13(IHLELRN)。结论:成功地获得了抗人HPPCn的特异性mAb。 霍景瑞 姚西宁 刘英富 刘保才 吴峰 范国才 王清明关键词:单克隆抗体 效价 噬菌体肽库 基于抗原表位制备抗人GP73单克隆抗体 2010年 目的:制备抗GP73蛋白的单克隆抗体(mAb)。方法:将GW/3蛋白N末端的肽段(AAAERGAVELK)展示于T7噬菌体表面,扩增重组噬菌体作为抗原免疫小鼠,制备抗体。通过ELISA法检测小鼠血清抗体的效价,筛选分泌抗GP73蛋白抗体的杂交瘤细胞株;通过ELISA、Western blot等方法检测mAb的特异性。结果:利用表面展示GP73抗原表位的重组噬菌体为抗原免疫小鼠,通过细胞融合和筛选得到了能识别GP73蛋白的mAb,且特异性较好。结论:将蛋白质抗原的合适抗原表位展示在T7噬菌体表面,用这种重组噬菌体作为替代抗原可以制备识别全蛋白的mAb。 姚西宁 霍景瑞 刘英富 刘保才 吴峰 范国才 王清明关键词:噬菌体展示 GP73 抗原表位 高尔基体蛋白73与肝癌诊断 被引量:8 2010年 肝癌是我国最常见的恶性肿瘤之一,血清甲胎蛋白(α-fetoprotein,AFP)检查是目前肝癌诊断最常采用的手段,但血清AFP对肝癌诊断的灵敏度和特异性均不理想,因此,临床上迫切需要更理想的肝癌标志物。高尔基体蛋白73(Golgi protein 73,GP73)是一种II型高尔基体跨膜糖蛋白,与肝炎、肝硬化和肝癌等肝病的发生、发展密切相关,GP73对肝癌诊断的灵敏度和特异性为65%和90%,而核心岩藻糖化GP73对肝癌诊断的灵敏度和特异性则高达90%和100%。GP73有可能成为一种更理想的肝癌临床诊断标志物,而核心岩藻糖化的GP73在肝癌的早期诊断中可能具有更重要的意义。 姚西宁 王清明关键词:GP73 肝癌 肝癌标志物