张莹辉 作品数:34 被引量:39 H指数:4 供职机构: 中国兽医药品监察所 更多>> 发文基金: 秦皇岛市科学技术研究与发展计划课题 国家现代农业产业技术体系建设项目 北京市科技计划项目 更多>> 相关领域: 农业科学 医药卫生 环境科学与工程 生物学 更多>>
产气荚膜梭菌ε毒素重组突变体大肠杆菌表达条件的优化 2021年 为优化产气荚膜梭菌ε毒素重组蛋白的表达条件,以前期构建的产气荚膜梭菌ε毒素重组突变体为基础,通过控制变量法确定诱导温度、诱导时间、IPTG诱导浓度以及诱导时菌液浓度等原核蛋白表达条件。结果表明,ε毒素的重组突变体在37℃、菌液OD_(600)值为0.895~1.295,1.6 mM IPTG诱导6 h条件下可溶性表达量最高。这为下一步大规模生产ε毒素基因工程亚单位疫苗奠定基础。 朱真 杜吉革 薛麒 李启红 印春生 张莹辉 李倩琳 姚文生 陈小云关键词:产气荚膜梭菌 基因工程亚单位疫苗 蛋白表达 狂犬病病毒糖蛋白重组表达及其基因工程疫苗研究进展 被引量:3 2020年 狂犬病病毒糖蛋白(RVGP)是唯一暴露于病毒颗粒表面的抗原,能够诱导宿主产生中和抗体,也是唯一存在于所有新型狂犬病疫苗中的病毒成分。本文综述了国内外学者利用原核系统,以及包括酵母系统、植物系统、昆虫细胞系统在内的真核系统和哺乳动物细胞系统、病毒载体系统来表达具有免疫原性的重组狂犬病病毒糖蛋白(rRVGP),并对其与天然RVGP在结构和激发机体免疫反应方面的相似性进行的相关研究,为狂犬病基因工程新型疫苗提供研究思路。 张莹辉 姚文生 康凯 薛麒 李启红 陈小云 杜吉革 朱真 印春生关键词:狂犬病 糖蛋白 基因工程疫苗 一种无毒性破伤风梭菌基因工程亚单位疫苗及其生产方法 本发明涉及一种无毒性破伤风梭菌基因工程亚单位疫苗及其生产方法,本发明制备的无毒性破伤风梭菌亚单位疫苗,系采用经过密码子优化的破伤风毒素C片段的重组毒素(rTTc)生产,即最大限度地保证疫苗的安全性,又保持其有效性。同时,... 陈小云 朱真 李旭妮 杜吉革 李启红 薛麒 刘莹 张莹辉 姚文生 印春生文献传递 14型蓝舌病病毒VP7蛋白原核表达及间接ELISA抗体检测方法的建立 被引量:4 2020年 为建立蓝舌病(bluetongue,BT)的血清学诊断方法,本研究通过得到14型蓝舌病病毒(bluetongue virus,BTV)的s7基因,并在大肠杆菌表达系统中进行表达,原核表达得到VP7蛋白,并对表达的包涵体VP7蛋白进行纯化,Western blot分析表明,纯化的VP7蛋白具有良好的抗原性。以纯化的VP7蛋白作为包被抗原,建立间接ELISA检测方法。该方法与羊痘阳性血清,羊口蹄疫阳性血清和羊的小反刍兽疫阳性血清均无交叉反应,与中和试验比较,两者符合率为90%,ELISA批内和批间重复性试验显示,D值的变异系数小于10%。说明本方法具有良好的特异性和重复性。本研究在国内首次建立了14型BTV抗体间接ELISA方法,可用于BTV感染的流行病学调查以及疫苗接种动物的抗体水平监测,为以后相关BTV ELISA检测试剂盒研发提供技术平台。 孙雯 张莹辉 曹雨 朱真 杜吉革 李启红 陈小云 姚文生 钱莺娟 印春生关键词:蓝舌病病毒 VP7蛋白 原核表达 间接ELISA 一株无耐药性的粗糙型布鲁氏菌病保护菌株及其应用 本发明涉及兽用生物制品领域,特别涉及一种粗糙型羊种布鲁氏菌株及其应用。所述布鲁氏菌株,命名为RM,其保藏编号为:CGMCC No.27411。由本发明粗糙型羊种布鲁氏菌RM制成的布鲁氏病活菌制剂具有良好的遗传稳定性、安全... 李俊平 王楠 徐磊 张媛 程君生 靳继惠 彭小薇 朱小洁 张莹辉 张晓茜 李巧玲 张爱平 孙伟峰 许冠龙动物布鲁氏菌病实验室检测技术研究进展 被引量:3 2023年 布鲁氏菌病是由布鲁氏菌引起的人畜共患传染病,对我国畜牧业生产和公共卫生安全造成严重的威胁。科学准确诊断是布鲁氏菌病防控的重要技术依据,然而布鲁氏菌病的检测和确诊一直以来都并非易事,常常需要通过多种检测结果的综合分析,因此发展敏感性高、特异性好的布鲁氏菌的检测技术十分重要。总结并分析了近年来布鲁氏菌检测技术基础研究和临床应用研究方面的最新进展,结合国家动物布鲁氏菌病参考实验室工作经验,对各类检测方法的优缺点和适用范围进行了分析,旨在为动物布病诊断技术的选择和推广应用提供理论和实践依据,为动物布鲁氏菌诊断技术的研究提供方向性思考。 李林姣 彭小薇 刘铭赫 张莹辉 冯宇 徐磊 李俊平关键词:布鲁氏菌病 病原学 血清学 山羊痘病毒检测方法研究进展 被引量:3 2018年 就山羊痘病毒分离鉴定、电镜观察、ELISA试验、琼脂扩散试验、免疫荧光抗体试验、PCR试验等检测方法进行了综述,以期为山羊痘病毒的实验室诊断提供参考。 张莹辉 姚文生 康凯 王团结 薛麒 吴思捷 赵俊杰 印春生关键词:山羊痘病毒 狂犬病毒G蛋白原核表达及间接ELISA检测方法的建立 被引量:1 2022年 目前狂犬病疫苗的效力检验采用NIH法,需要使用狂犬病毒CVS-24毒株进行攻毒试验,具有一定的生物安全风险。为寻求替代NIH法中脑内攻毒试验的方法,研究扩增狂犬病毒G蛋白基因,并将其克隆至大肠杆菌pET-32a载体上进行表达,以该蛋白作包被抗原,摸索试验条件,建立了检测小鼠血清抗体效价的间接ELISA方法。使用此方法与国际公认的荧光抗体病毒中和试验(FAVN)法比较,两者检测结果曲线相关系数为0.986,表明相关性较好,但ELSIA方法更加快捷、简便。本试验建立的间接ELISA方法可用于检测小鼠血清中狂犬病抗体,为狂犬病毒血清抗体测定和单克隆抗体筛选提供依据。 张莹辉 朱真 杜吉革 薛麒 陈小云 冯宇 印春生关键词:狂犬病 G蛋白 原核表达 ELISA方法 蓝舌病毒14型的分离与鉴定 被引量:6 2019年 为了解我国新疆地区羊蓝舌病的流行情况,对某羊场疑似发生蓝舌病的羊病料进行了采集,并进行病毒分离和鉴定。应用间接ELISA试剂盒检测血清抗体,抗凝血样品接种敏感的BHK21细胞进行连续盲传,对细胞病变呈阳性的样品进行间接免疫荧光鉴定,同时针对VP7片段和VP2片段设计引物进行RT-PCR检测鉴定,并对其L2基因进行系统发育树分析。结果显示,血清中BTV抗体检测均为阳性,接种BHK21细胞后均产生了特异性细胞病变,并与FITC标记的抗BTV单抗特异性结合,针对VP7扩增出1156bp片段,针对VP2分别扩增出850bp和1581bp片段,经测序和序列分析确定为BTV-14型。结果表明,我国新疆地区存在蓝舌病毒14型,这也是我国境内首次分离到蓝舌病毒14型,为进一步防控我国蓝舌病疫情提供了科学依据。 曹雨 张莹辉 赵炜 陈新 薄宗义 姚文生 JUNG Yong-Sam 戴建君 钱莺娟 印春生关键词:蓝舌病毒 一种无毒性破伤风毒素和产气荚膜梭菌β毒素重组融合蛋白 本发明涉及一种无毒性破伤风毒素和产气荚膜梭菌β毒素重组融合蛋白。本发明系采用经过密码子优化、破伤风梭菌毒素C片段与含有多个氨基酸突变的产气荚膜梭菌β毒素突变体的重组融合蛋白,即最大限度地保留两种毒素蛋白的免疫原性,又避免... 杜吉革 刘莹 王磊 陈小云 李旭妮 李启红 朱真 薛麒 张莹辉 姚文生 印春生文献传递