向星宇
- 作品数：4 被引量：2H指数：1
- 供职机构：南方医科大学基础医学院基因工程研究所更多>>
- 发文基金：教育部科学技术研究重点项目广东省农业科技攻关项目广东省粤港关键领域重点突破项目更多>>
- 相关领域：医药卫生更多>>
- Hsa-mir-196b慢病毒表达载体的构建及鉴定
- 2010年
- 目的构建Hsa-mir-196b慢病毒表达载体并对其进行鉴定。方法以正常人外周血DNA为模板,PCR扩增得到目的基因。通过HpaⅠ/XhoⅠ双酶切及其后的连接将其插入Lentilox3.7(pLL-3.7)质粒中。PCR筛选阳性克隆,测序鉴定。用pLL-3.7-mir-196b、pCMV-VSV-G和pCMV-dR8.91三质粒系统共感染HEK-293FT细胞,包装生产慢病毒。将所得病毒悬液梯度稀释后感染HEK293FT细胞,以检测病毒滴度,并用实时定量PCR检测慢病毒感染后Hsa-mir-196b的表达变化。结果 PCR及测序结果证明成功构建了pLL-3.7-mir-196b重组质粒。所得慢病毒上清滴度为(7.2±1.1)×107TU/ml。感染慢病毒的239FT细胞中,Hsa-mir-196b的表达量相对于未感染细胞提高了约24倍。结论成功构建Hsa-mir-196b慢病毒表达载体。
- 向星宇马文丽宋艳斌姜茂竹王妮莎郑文岭
- 关键词：慢病毒肿瘤
- hsa-miR-30e的克隆及其慢病毒表达载体的构建
- 2010年
- 目的克隆hsa-miR-30e并构建其慢病毒表达载体。方法 PCR扩增hsa-miR-30e的前体序列,克隆于慢病毒载体pll3.7,转染包装细胞293FT细胞,收获病毒颗粒,荧光定量PCR检测hsa-miR-30e的表达。结果经双酶切及测序鉴定,hsa-miR-30e的慢病毒表达载体构建成功,倒置荧光显微镜下观察转染后293FT细胞发出绿色荧光。结论成功构建hsa-miR-30e的慢病毒表达载体,为进一步研究hsa-miR-30e的生物学功能奠定了基础。
- 姜茂竹马文丽宋艳斌向星宇韩晋云郑文岭
- 关键词：慢病毒表达载体肿瘤
- 2000-2009年H1N1甲型流感病毒神经氨酸酶的进化分析和序列解析被引量：2
- 2011年
- 目的研究2000-2009年世界各地不同物种流感病毒神经氨酸酶的进化特征和关键位点的变异情况。结论从NCBI数据库下载所需序列,采用生物信息软件对其氨基酸序列进行种系发生树的构建,以及序列特性的分析。结果新型流感病毒和猪/禽流感病毒NA蛋白在进化关系上非常接近,并且抗原决定簇和糖基化位点的变异也大致相同。结论新型毒株NA蛋白可能由早期的H1N1猪/禽流感病毒进化而来,在进化过程中,一些重要位点的变异导致NA蛋白发生抗原性变异,从而导致流感的大爆发。
- 王妮莎马文丽危敏张宝郑文岭向星宇
- 关键词：NA变异位点
- 2000～2009年H1N1甲型流感病毒血凝素基因HA1的演变特征
- 2010年
- 目的研究2000～2009年世界各地不同物种的新型H1N1流感病毒HA1基因演变特征。方法从NCBI数据库下载所需序列,采用生物信息软件对其氨基酸序列进行基因特性分析以及构建种系发生树。结果病毒株HA1基因抗原决定簇和多个受体结合位点发生变异,并且新型病毒与猪H1N1流感病毒在大多数变异位点的氨基酸相同。结论新型毒株HA1基因可能由早期来自北美洲的H1N1猪流感病毒进化而来,在进化过程中,一些重要位点的变异导致HA1基因发生抗原性变异,从而导致流感的大爆发。
- 王妮莎马文丽赵海全危敏张宝郑文岭向星宇
- 关键词：HA1变异位点
