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刘芳娜
作品数:
1
被引量:10
H指数:1
供职机构:
山东农业大学动物科技学院
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相关领域:
农业科学
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合作作者
张伟
山东农业大学动物科技学院
臧大鹏
山东农业大学动物科技学院
刁有祥
山东农业大学动物科技学院
杜爱庆
山东农业大学动物科技学院
张瑞平
山东农业大学动物科技学院
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2008
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猪胸膜肺炎放线杆菌溶血毒素的克隆表达及其对小鼠免疫保护作用
被引量:10
2008年
将猪胸膜肺炎放线杆菌血清3型分离株的ApxⅡA、ApxⅢA、ApxⅣA基因和血清5型分离株的ApxⅠA基因分别克隆到原核表达载体pGEX-5X-3,并在大肠杆菌BL21中进行表达。SDS-PAGE结果表明重组菌表达的最佳条件为诱导时间2小时和IPTG终浓度1mmol/L。通过硫酸铵盐析和SephadexG-200凝胶过滤层析纯化表达产物。Westernblot检测结果显示表达产物具有免疫活性。按照不同组合将表达产物与弗氏佐剂等比例混合,制备3种亚单位疫苗。并在30日龄和45日龄免疫小白鼠,在60日龄分别用血清1、3、5、7和10型胸膜肺炎放线杆菌攻毒。血清1、5和7型胸膜肺炎放线杆菌攻毒后,3种亚单位疫苗分别提供58.4%、66.6%和91.7%的保护率。试验结果表明重组蛋白具有免疫保护作用,且含有四种融合蛋白的亚单位疫苗免疫保护效果最佳。
杜爱庆
刁有祥
张伟
张瑞平
臧大鹏
刘芳娜
关键词:
胸膜肺炎放线杆菌
溶血毒素
免疫保护
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