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李琦
作品数:
1
被引量:1
H指数:1
供职机构:
吉林农业大学农学院
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发文基金:
转基因生物新品种培育专项
国家自然科学基金
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相关领域:
农业科学
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合作作者
董环宇
吉林农业大学农学院
晏佳琳
吉林农业大学农学院
宋阳
吉林农业大学农学院
马建
吉林农业大学农学院
王丕武
吉林农业大学农学院
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2015
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大豆凝集素和脂肪氧化酶双价RNAi表达载体的构建及其遗传转化
被引量:1
2015年
【目的】应用RNA干扰技术,同时抑制大豆凝集素(Soybean agglutinin,SBA)和脂肪氧化酶(Lipoxy—genase,Lox)基因在种子中的表达,改良大豆营养品质,为培育优质大豆材料奠定基础。【方法】根据RNAi原理,酶切获得Lox目的片段,构建以除草剂Bar基因为筛选标记、种子特异性启动子P7aP启动SBA和Lox双干扰的pCAMBIA3301-SBA—Lox(pSBA—Lox)干扰表达载体,并通过农杆菌介导法转化大豆(品种为吉农28),采用PCR、Southern杂交和实时荧光定量PCR对转基因植株进行检测。【结果】质粒PCR和酶切鉴定结果表明,双价RNAi植物表达载体pSBA-Lox构建成功。将其转入到大豆中,对转化植株进行PCR、Southern杂交检测,结果显示,外源基因以单拷贝形式整合到植物基因组中,并能遗传给后代。T1代转基因植株的实时荧光定量PCR分析显示,转基因植株中SBA基因和Lox基因在籽粒中的表达量比未转化受体植株均明显降低,SBA基因表达量降低了35.9%~47.2%,Lox基因表达量降低了32.8%~56.1%,而在幼嫩叶片中的表达量相比对照植株变化不大。【结论】获得了大豆凝集素和脂肪氧化酶表达量均明显降低的T2代转基因大豆。
张学明
宋阳
王丕武
马建
晏佳琳
付永平
曲静
张卓
董环宇
李琦
关键词:
大豆
凝集素
脂肪氧化酶
RNA干扰技术
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