张琼
- 作品数：8 被引量：2H指数：1
- 供职机构：华南农业大学兽医学院更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金国家重大科学仪器设备开发专项广东省自然科学基金更多>>
- 相关领域：农业科学医药卫生更多>>
- 狂犬病病毒HEP-Flury M基因重排在小鼠致病性和保护性研究
- 2020年
- 目的了解M基因重排对病毒致病性和免疫保护性的影响,从而为狂犬病疫苗的开发提供更适合的候选株。方法将病毒rHEP-Flury和M基因重排株颅内接种1~3 d龄的乳鼠,测定病毒在乳鼠上的半数致死量(LD 50)。将rHEP-Flury和M基因重排株以103、104和105 FFU免疫接种6~8周龄的成鼠,然后用标准攻毒株CVS-24进行颅内感染小鼠,测定小鼠的存活率。同时用ELISA方法检测小鼠血清抗体水平。结果狂犬病病毒HEP-Flury的M基因重排后,病毒对乳鼠的毒力随着M基因位置远离病毒启动子位置增强,即M2
- 梅明珠杨先锋龙腾张琼赵静田钦彭娇娇罗均姜贺林颖仪林志雄郭霄峰
- 关键词：基因重排基质蛋白
- 野毒狂犬病病毒反向操作系统的构建及基因替换对病毒致病性的影响
- <正>为了系统地分析强弱毒株基因替换对狂犬病病毒复制能力、致病力的影响,本论文以狂犬病病毒HEP-Flury为骨架,将野毒GD-SH01的5个结构基因分别替换HEP-Flury的结构基因,拯救获得了野毒株单基因替换以及全...
- 王怡飞田钦罗均梅明珠彭娇娇张琼罗永文郭霄峰
- 文献传递
- 两株猪流行性腹泻野毒的确证及N基因的分析
- 为了确证从发病猪场腹泻仔猪小肠内容物中分离获得的两株猪流行性腹泻病毒（PEDV）是强毒,本研究将病料接种经胰酶处理的Vero细胞,获得了可引起细胞产生合胞体的病毒。经三重鉴别PCR鉴定,确定分离的病毒为PEDV,分别命名...
- 莫炜钰罗均莫梅君赵静张琼朱盛和陈昊林颖仪郭霄峰
- 关键词：猪流行性腹泻病毒N基因进化分析
- 狂犬病病毒G蛋白的过表达及对病毒的抑制
- 2018年
- 【目的】探究G蛋白在狂犬病病毒(Rabies virus,RABV)复制中的作用,以揭示携带双G基因的重组RABV的Hep-dG与亲代毒株rHep-Flury在神经母细胞瘤(NA)细胞中滴度差异的原因,为RABV致病机制的研究奠定基础。【方法】通过病毒吸附、入侵、荧光定量PCR、Western-blot以及中和抗体阻断等试验,检测G蛋白过表达对IFN-β以及相关因子转录的影响。【结果】Hep-dG感染能显著上调NA细胞中IFN-βmRNA的表达,激活了下游因子STAT1的表达与磷酸化,在较低的感染复数(MOI=0.01)下,Hep-dG感染后24 h即可显著促进IFN-β基因的表达,36 h达到最高水平(P<0.001)。该病毒进入细胞后,产生了更多的病毒Leader RNA和RIG-I mRNA,且与IFN-βmRNA的表达高度一致。抗体阻断IFN-β后,Hep-dG在NA细胞中的病毒滴度显著上升(P<0.01),约为阻断前的7.9倍,且与亲代毒株rHep-Flury无显著差异。与阴性对照比较,5μg的pH-G质粒转染能刺激IFN-β的转录(P<0.05),表明真核表达RABV G蛋白能在一定程度上刺激IFN-β的转录。【结论】本研究初步揭示了G蛋白激活先天性免疫应答的原因和作用。RABV G蛋白的过表达,通过促进病毒Leader RNA的转录,激活了RIG-I介导的IFN-β通路,进而抑制了Hep-dG在NA细胞的繁殖。G蛋白的过表达也对干扰素通路起到一定的作用。
- 阳佑天张琼张博越刘文俊罗永文赵静梅明珠张莹罗均郭霄峰
- 关键词：狂犬病病毒G蛋白Β干扰素病毒滴度
- 两株猪流行性腹泻野毒的确证及N基因的分析被引量：1
- 2016年
- 将发病猪场仔猪小肠内容物病料经胰酶处理后接种Vero细胞,经观察CPE和特异性RT-PCR确认分离得到两株PEDV野毒株,并命名"CH/GDZH01/1311"(简称"ZH01")、"CH/GDZH02/1401"(简称"ZH02")。经扩增和测定N基因,分析得知它们属于G2-1亚群流行毒株。将ZH01和ZH02及其中连续传代的ZH02-f57毒株进行3日龄仔猪的回归试验,发现它们均有100%致死率,但ZH02-f57毒株引起的发病症状相对迟缓。该研究为PED变异毒株的弱毒疫苗研究奠定了基础。
- 莫炜钰罗均莫梅君赵静张琼朱盛和陈昊林颖仪郭霄峰
- 关键词：猪流行性腹泻病毒N基因进化分析
- 狂犬病病毒HEP-Flury M基因重排后在小鼠神经母细胞瘤细胞中的表型分析被引量：1
- 2020年
- 【目的】探究狂犬病病毒HEP-Flury M基因重排对基因转录和蛋白表达的影响,揭示病毒在小鼠神经母细胞瘤(NA)细胞中的表型变化与M基因重排的相关性。【方法】通过荧光定量PCR、Western blot以及病毒在NA细胞中的生长和扩散试验,对亲本毒株rHEP-Flury和M基因重排毒株M2、M4在NA细胞中的基因转录、表达、生长和扩散进行比较。【结果】狂犬病病毒结构基因的转录和表达主要受病毒基因组RNA合成的影响,但是在一个完整转录过程中单个结构基因的转录比例与其所在位置相关,M基因重排病毒的Leader RNA(LeRNA)和L mRNA的转录比例显著高于亲本毒株rHEP-Flury。M基因重排病毒在NA细胞中的生长和扩散都劣于亲本毒株rHEPFlury。【结论】狂犬病病毒亲本毒株rHEP-Flury具有狂犬病病毒原始的基因组顺序,在NA细胞中的生长和扩散都明显优于M基因重排病毒。结构基因在基因组中的位置主要决定其在一次转录过程中的转录比例,进而影响病毒在NA细胞中的生长和扩散。
- 梅明珠杨先锋龙腾张琼赵静田钦彭娇娇罗均姜贺林颖仪林志雄郭霄峰
- 关键词：狂犬病病毒基质蛋白神经母细胞瘤细胞
- 狂犬病病毒HEP-Flury P基因重排对病毒表型的影响
- 狂犬病病毒P蛋白对病毒的复制和致病性至关重要。我们操纵狂犬病病毒HEP-Flury的感染性cDNA克隆,将P基因从其野生型的基因2位移到1位,3位或者4位,同时我们保持病毒的其他核酸序列不变。病毒拯救成功后,我们对病毒在...
- 梅明珠龙腾张琼赵静田钦彭娇娇罗均王怡飞林仪颖郭霄峰
- 文献传递
- 两株猪流行性腹泻野毒的确证及N基因的分析
- 为了确证从发病猪场腹泻仔猪小肠内容物中分离获得的两株猪流行性腹泻病毒(PEDV)是强毒,本研究将病料接种经胰酶处理的Vero细胞,获得了可引起细胞产生合胞体的病毒.经三重鉴别PCR鉴定,确定分离的病毒为PEDV,分别命名...
- 莫炜钰罗均莫梅君赵静张琼朱盛和陈昊林颖仪郭霄峰
- 关键词：猪流行性腹泻病毒N基因进化分析
