黄珍
- 作品数：1 被引量：1H指数：1
- 供职机构：中南大学湘雅二医院更多>>
- 发文基金：湖南省卫生厅科研基金湖南省科技计划项目更多>>
- 相关领域：医药卫生更多>>
- 金黄色葡萄球菌肠毒素SEC3抑制剂的筛选及活性鉴定被引量：1
- 2014年
- 目的从噬菌体随机12肽库中筛选出金黄色葡萄球菌SEC3抑制剂并鉴定其活性。方法用纯化的重组的金黄色葡萄球菌SEC3包被酶标板,按吸附-洗脱-扩增的淘洗过程对噬菌体随机12肽库进行3轮筛选;用竞争ELISA法观察单个噬菌体克隆的竞争抑制效应,评价其活性。结果噬菌体3轮筛选的投入产出比逐轮升高,回收率从4.5×10-6升高至6.3×10-4,升高140倍,提示具有良好的富集效果;与阴性对照（未加噬菌体）相比,随机挑选的8个噬菌体克隆（A1~A8）竞争抑制率为10.6%~38.3%,差异有统计学意义（t值为9.0~23.5,P〈0.05）,其中A1平均竞争抑制率最高,为（30.5±7.4）%,A5的平均竞争抑制率最小,为（16.4±4.7）%。以噬菌体滴度对数值为x轴,以克隆噬菌体各滴度对应的平均竞争抑制率为y轴,绘制竞争抑制曲线,其回归方程为Y=2.7943X-4.7733,相关系数r=0.935,决定系数R2=0.8727。在噬菌体滴度在108~1012pfu范围内,随着噬菌体滴度的增高,其抑制率也增高,且克隆噬菌体滴度在1011pf或1012pfu的竞争抑制率最高。结论用纯化的SEC3从噬菌体随机12肽库中筛选的SEC3抑制剂具有一定的竞争抑制活性,而且竞争抑制活性随着噬菌体滴度的增高而增强。
- 王敏郑荣黄珍李先平张婷婷曹虹
- 关键词：金黄色葡萄球菌肠毒素抑制剂噬菌体随机肽库
