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测定COVID-19疫苗中结构蛋白含量的特异性肽段及方法: 本发明公开了测定COVID‑19疫苗中结构蛋白含量的特异性肽段，包括测定结构蛋白S、S蛋白RBD区域、结构蛋白E、结构蛋白M和结构蛋白N的5种肽段。本发明还公开了COVID‑19疫苗中结构蛋白含量的测定方法：对待测样品进...; 卫辰龙珍邓海清徐康维李长坤马霄尹珊珊李月琪刘建凯黄涛宏; 文献传递

利用液相色谱串联质谱测定样品中Berol 185含量的方法: 本发明提供一种利用液相色谱串联质谱测定样品中Berol 185含量的方法，包括：A、配制不同浓度的Berol 185标准品溶液，进行液相色谱串联质谱检测；并根据液相色谱串联质谱检测结果，筛选出定量离子；B、分别提取不同浓...; 殷寻邓海清尹珊珊刘建凯

Sabin株脊髓灰质炎灭活疫苗宿主细胞DNA残留量检测方法研究: 2017年; 目的建立Sabin株脊髓灰质炎灭活疫苗Vero细胞DNA残留量的检测方法。方法提取Vero细胞基因组DNA，制备地高辛标记探针。比较样品不同处理方式的检测差异。对建立的残留DNA检测方法进行特异性、灵敏度和稳定性验证。结果 Vero 细胞基因组DNA的质量浓度为295 μg/ml，260 nm与280 nm波长处的吸光度比值为1.88。探针灵敏度达到0.01 pg/μl。采用苯酚抽提方式处理DNA参考品，检测灵敏度为1 ng；而用碘化钠处理DNA参考品，灵敏度达到10 pg。特异性检测表明，探针与非同源DNA无杂交。灵敏度和稳定性检测结果显示，探针于–70 ℃保存9个月，灵敏度仍为10 pg。结论建立了Sabin株脊髓灰质炎灭活疫苗Vero细胞DNA残留量的检测方法。采用碘化钠提取DNA，回收率高，操作简单，适用于Vero细胞的残留DNA检测。; 任玉莹刘建凯尹珊珊徐颖之邓海清殷建齐邢盛宇张艳红高宇皎郝倩刘杨; 关键词：脊髓灰质炎病毒疫苗灭活 VERO细胞

利用液相色谱串联质谱测定样品中Berol 185含量的方法: 本发明提供一种利用液相色谱串联质谱测定样品中Berol 185含量的方法，包括：A、配制不同浓度的Berol 185标准品溶液，进行液相色谱串联质谱检测；并根据液相色谱串联质谱检测结果，筛选出定量离子；B、分别提取不同浓...; 殷寻邓海清尹珊珊刘建凯; 文献传递

肺炎球菌荚膜多糖的制备: 公开了制备肺炎球菌荚膜多糖的方法，其包括：提供肺炎球菌发酵液；对所述肺炎球菌发酵液进行分离，得到第一上清液；使用含有氯离子的第一溶液，对所述第一上清液进行过滤，得到第一滤液；向所述第一滤液中加入第一十六烷基三甲基溴化铵(...; 刘艳丽刘建凯曹欣尹珊珊徐永学李金阳宁云云王研研林浩卿汪辉王元泽邓海清韩菲郝倩殷寻

19A型肺炎链球菌多糖结合物中游离多糖含量测定方法的建立被引量：2: 2017年; 目的建立19A型肺炎链球菌多糖（Streptococcus pneumoniae type 19A polysaccharide，19APS）结合物中游离PS含量的测定方法。方法在一定条件下分别用1、3和5g／L脱氧胆酸钠（sodiumdeoxycholate，IX）C）溶液（pH7．3）沉淀不同浓度的破伤风类毒素（tetanustoxoid，1vr），确定不同浓度DOC沉淀载体蛋白1vr的浓度范围。以1g／LDOC分离结合19APS（19APS-TT）和游离19APS，测定上清液中的游离PS含量，并验证该DOC沉淀法的准确度和精密度。结果分别以1和3g／LDOC沉淀19APS-TT时，TT浓度最好分别控制在〈150和〈200μg／ml。该DOC沉淀法的准确度和精密度均良好，加标PS回收率为94．0％～107．2％，相对标准偏差均〈4％。结论成功建立了19APS-TT中游离PS含量的测定方法。; 尹珊珊邓海清高宇皎刘杨郝倩张艳红刘建凯; 关键词：链球菌肺炎化学沉淀

b型流感嗜血杆菌精制多糖分子大小分布及重均分子质量检测方法的改良被引量：1: 2021年; 目的改良HPLC(AKTA层析)系统,采用HPLC-MALLS系统检测b型流感嗜血杆菌(Haemophilus influenzae type b,Hib)精制多糖的分子大小分布及重均分子质量(MW),并进行方法的验证。方法采用HPLC(AKTA层析)系统连接示差分析仪检测9批Hib精制多糖供试品的分配系数(KD)及K_(D)值为0.5的回收率(R_(X))。采用HPLC连接18角度静态光散射分析系统MALLS(HPLC-MALLS)检测供试品的M_(W)、K_(D)及R_(X),并对两种系统的测试结果进行相关性分析;验证HPLC-MALLS方法的重复性、准确性及定量限。结果 9批供试品经AKTA层析系统检测,K_(D)为0.29~0.37,RX为78%~90%;经HPLC-MALLS系统检测,KD为0.31~0.38,RX为84%~93%,MW为(1.418~2.281)×10^(5)g/moL,两种系统检测同批供试品的KD值回归方程为Y=0.903 X+0.051,r为0.978,表明检测结果具有显著相关性,两种方法等效。9批供试品经HPLC-MALLS/RI系统重复检测6次,M_(W)、K_(D)及R_(X)的RSD均小于3.8%,多糖回收率及其RSD分别为80%~87%和0.05%~3.46%;定量限为1 mg/mL。结论 HPLC-MALLS系统能与HPLC系统基本对接,在准确检测Hib精制多糖M_(W)的同时还可检测K_(D)及R_(X),且方法的准确性及重复性良好,可作为检测Hib精制多糖分子大小的改良方法。; 李向群韩菲尹珊珊邓海清刘建凯袁波

凝胶过滤层析纯化白喉类毒素工艺的优化: 2018年; 【摘要】目的通过定制设计优化白喉类毒素（diphtheria toxoid，DT）层析纯化工艺。方法将经硫酸铵沉淀的精制DT原液浓缩后分别用Sepharose4FF（4FF）和SephaerylS-300（S-300）凝胶过滤层析进行进一步纯化。根据定制设计，将上样体积、样品浓度、洗脱流速、层析介质设为实验因子，将层析载量、纯度、收率设为响应值，建立数学模型，确定凝胶过滤层析的最优层析参数，并对实验结果进行工艺验证。结果定制设计的实验结果显示，8-300凝胶过滤层析纯化的DT纯度和收率均高于4FF凝胶过滤层析。进一步分析确定，8-300凝胶过滤层析的最佳参数为：上样体积2．5％，样品浓度45mg／ml，洗脱流速45cm／h。当以最佳参数进行S-300凝胶过滤层析纯化时，层析工艺的验证结果符合预期。结论8-300比4FF更适宜作为DT纯化工艺的凝胶层析介质。; 何岩张明华邓海清段霄李硕航杨朝晖刘建凯郑海发; 关键词：白喉类毒素色谱法凝胶

测定COVID-19疫苗中结构蛋白含量的特异性肽段及方法: 本发明公开了测定COVID‑19疫苗中结构蛋白含量的特异性肽段，包括测定结构蛋白S、S蛋白RBD区域、结构蛋白E、结构蛋白M和结构蛋白N的5种肽段。本发明还公开了COVID‑19疫苗中结构蛋白含量的测定方法：对待测样品进...; 卫辰龙珍邓海清徐康维李长坤马霄尹珊珊李月琪刘建凯黄涛宏

高效阴离子交换色谱-脉冲安培法检测冻干b型流感嗜血杆菌结合疫苗的游离多糖含量: 2022年; 目的建立高效阴离子交换色谱-脉冲安培(HPAEC-PAD)法检测冻干b型流感嗜血杆菌(Hib)结合疫苗中游离多糖含量的方法,并对其进行验证,为Hib结合疫苗的质量监控提供依据。方法优化水解供试品的实验条件,利用HPAEC-PAD法检测供试品中多聚磷酸核糖基核糖醇(PRP)含量。色谱条件采用CarboPacPA10分析柱(2mm×250mm)与CarboPac PA10保护柱(2 mm×50 mm),氢氧化钠-醋酸钠溶液梯度洗脱,流速为0.25ml/min,脉冲安培检测器,进样体积为20μl。用乙醇分步沉淀法、C4固相萃取法和超速离心法分离Hib游离多糖,并对三种方法得到的结果进行比较。同时验证方法的系统适用性、特异性、线性、精密度及准确性。结果确定水解条件为终浓度0.4mol/L的NaOH,于37℃振荡1.5 h。本公司生产的冻干Hib结合疫苗不可用C4固相萃取柱分离游离多糖,确定了超速离心联合HPAEC-PAD法为冻干Hib结合疫苗游离多糖检测的最适方法。该方法专属性、分离度良好;PRP浓度在0.1962~19.616μg/ml范围内与峰面积呈良好的线性关系,R2>0.99。3批供试品分别测定6次,RSD分别为4.1%、2.3%、3.3%,不同时间测得的中间精密度RSD分别为8.3%、3.6%和9.1%。游离多糖的加标回收率分别为102.9%、94.3%、92.0%,RSD分别为3.9%、8.7%、5.3%。结论初步建立了冻干Hib结合疫苗游离多糖含量测定的超速离心联合HPAEC-PAD法。该方法具有良好的准确性、精密度及稳定性,可用于冻干Hib结合疫苗中游离多糖含量的检测。; 贾松华邓海清杜闪张艳红尹珊珊刘建凯; 关键词：B型流感嗜血杆菌结合疫苗超速离心

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邓海清

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