董海平
- 作品数：5 被引量：33H指数：2
- 供职机构：上海交通大学医学院附属仁济医院更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金更多>>
- 相关领域：医药卫生更多>>
- 脑卒中后脑血管内皮细胞内质网应激抑制Wnt7/β-catenin通路导致血脑屏障损伤的机制研究
- 2023年
- 目的·探讨缺血性脑卒中后脑血管内皮细胞Wnt7/β-catenin信号失活是否导致血脑屏障(blood-brain barrier,BBB)完整性破坏,并研究内质网应激爆发是否介导了Wnt7/β-catenin通路的抑制。方法·采用线栓法阻断小鼠大脑中动脉建立大脑中动脉栓塞(middle cerebral artery occlusion,MCAO)模型,脑缺血60 min后拔除线栓。向MCAO模型小鼠腹腔注射内质网应激抑制剂4-苯基丁酸(4-phenylbutyric acid,4-PBA)作为4-PBA+MCAO组。并设置假手术组(Sham组)。MCAO后24 h用伊文思蓝(Evans blue,EB)测定小鼠BBB的通透性,干湿法测定脑组织含水量,免疫荧光测定小鼠脑血管内皮细胞和周细胞黏附性。对人脑微细血管内皮细胞(human brain microvascular endothelial cells,HBMECs)进行氧糖剥夺(oxygen and glucose deprivation,OGD)4 h,加入4-PBA培养24 h。细胞实验分为空白对照组、OGD组和OGD+4-PBA组。采用CCK-8测定细胞活力,通过检测FITC标记的牛血清白蛋白(FITC-BSA)的通过率来评估细胞通透性;通过ELISA测定HBMECs中血小板衍生生长因子β(platelet-derived growth factorβ,PDGF-β)的分泌水平;采用Fluo-3 AM钙离子荧光探针检测细胞的荧光强度并评估细胞内钙离子浓度,通过CM-H2DCFDA荧光探针测量活性氧(reactive oxygen species,ROS)含量以明确细胞内质网应激状态;蛋白质印迹法(Western blotting)检测HBMECs中的连接蛋白[紧密连接蛋白1(zonula occludens-1,ZO-1)和密封蛋白5(claudin-5)]、内质网应激蛋白[CCAAT/增强子结合蛋白同源蛋白(CCAAT/enhancer-binding protein homologous protein,CHOP)、葡萄糖调节蛋白78(glucose-regulated protein 78,GRP78)、门冬氨酸特异性半胱氨酸蛋白酶12(cysteine-containing aspartate-specific proteases 12,Caspase-12)]、Wnt7和β-连环蛋白(β-catenin)的表达水平。结果·MCAO模型小鼠脑梗死区水含量较假手术组增加,EB渗出量明显增多(均P<0.05),小鼠脑血管内皮细胞和周细胞之间的黏附性下降;腹腔注射4-PB
- 董海平谢海怡马晓晓王震虹
- 关键词：内质网应激血脑屏障
- MALAT1介导β-catenin通路参与Salvinorin A减轻脑卒中后血脑屏障损伤的机制
- 2022年
- 目的探讨MALAT1介导β-catenin通路参与Salvinorin A减轻脑卒中后血脑屏障(BBB)损伤的机制。方法选取SD大鼠制作大脑中动脉栓塞模型(MCAO),进行Salvinorin A减轻脑卒中后脑损伤相关实验。选取人脑微血管内皮细胞(HBMECs)制作糖氧剥夺(OGD)模型,进行MALAT1介导β-catenin通路参与Salvinorin A脑保护机制的相关实验。结果Salvinorin A可明显减轻缺血再灌注后的神经功能损伤,脑水肿,BBB通透性破坏和内皮细胞损伤;而MALAT1干扰后Salvinorin A对内皮细胞的保护和β-catenin的促表达等作用被阻断。结论Salvinorin A可能通过调控内皮细胞中LncRNA-MALAT1表达,促进β-catenin的表达来减轻内皮细胞损伤,进而减轻缺血再灌注后的BBB损伤。
- 马晓晓董海平周薇忻纪华王震虹
- 关键词：脑卒中血脑屏障Β-CATENIN
- 右美托咪啶预处理经AMPK/SIRT1通路抑制大鼠脑缺血再灌注损伤的炎性反应被引量：22
- 2018年
- 目的探讨右美托咪啶(Dex)预处理对大鼠大脑缺血再灌注(I/R)损伤后炎性反应的作用机制。方法 72只SD大鼠随机分为6组,每组12只。(1)假手术组(Sham组),大鼠经腹腔注射3%戊巴比妥钠(50 mg/kg)麻醉后,只游离右侧颈内动脉,不制作成大脑中动脉闭塞(MCAO)模型;(2)脑缺血组(IR组):造模后,大鼠脑缺血90 min后再灌注;(3)Dex10组及Dex50组:造模后,缺血前30 min分别腹腔内注射10、50μg/kg Dex;(4)Dex50+Yoh组:造模后,在给予50μg/kg Dex前10 min腹腔内注射育亨宾(Yoh)0.5 mg/kg;(5)Yoh组:造模后,缺血前30 min腹腔注射Yoh 0.5 mg/kg。对各组大鼠进行神经功能损伤评估、梗死面积评估、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)及白介素-1β(IL-1β)水平测定、TUNEL染色及SIRT1蛋白检测和神经运动功能评分(TMS)检测。结果 IR组的神经功能评分、梗死面积、TUNEL(+)细胞数、TNF-a和IL-1β水平及SIRT1蛋白表达量均明显高于Sham组,再灌注后第1、2、5天时TMS评分均明显低于Sham组,差异有高度统计学意义(P<0.01)。Dex10组、Dex50组的神经功能评分、梗死面积、TUNEL(+)细胞数、脑匀浆中TNF-a和IL-1β水平均明显低于IR组、Dex50+YOH组、YOH组;TMS评分、SIRT1蛋白表达量均明显高于IR组、Dex50+YOH、YOH组,差异有高度统计学意义(P<0.01)。Dex50组神经功能评分、梗死面积、TUNEL(+)细胞数、脑匀浆中TNF-a和IL-1β水平均明显低于Dex10组;再灌注后第1、2、5天时TMS评分、SIRT1蛋白表达量明显高于Dex10组(P<0.01)。Dex50+YOH、YOH组间各项检测指标比较,差异无统计学意义(P>0.05)。结论 Dex预处理可激活α_2受体通过AMPK/SIRT1通路抑制大鼠脑缺血再灌注损伤,减轻炎性反应并发挥神经保护作用。
- 董海平周薇王震虹何振洲
- 关键词：右美托咪啶再灌注损伤脑缺血
- Kappa阿片受体激动剂salvinorin A调节血管内皮生长因子减轻大鼠前脑缺血后脑水肿的研究被引量：2
- 2015年
- 目的探讨kappa阿片受体(KOR)激动剂salvinorin A(SA)对前脑缺血再灌注(I/R)损伤大鼠脑水肿和神经功能的改善作用及机制。方法成年雄性SD大鼠经夹闭颈动脉联合低血压建立前脑I/R损伤模型,并根据不同处理方式分为I/R组、I/R+DMSO组、I/R+SA组和I/R+SA+nor BIN(KOR拮抗剂),另设立假手术组。采用Western blotting和免疫组织化学方法检测各组大鼠脑组织血管内皮生长因子(VEGF)蛋白表达;评估脑水肿情况;I/R后1、2、5 d对各组大鼠神经功能进行评定。结果前脑I/R损伤后,I/R组和I/R+DMSO组脑水含量显著高于假手术组(P<0.05),I/R+SA组脑水含量显著低于I/R组(P<0.05),I/R+SA+nor-BIN组脑水量显著高于I/R+SA组(P<0.05)。脑组织VEGF蛋白表达检测结果显示:I/R+SA组显著高于I/R组(P<0.01),I/R+SA+nor-BIN组显著低于I/R+SA组(P<0.05)。I/R+SA组I/R损伤后1、2、5 d神经运动功能评分均显著高于I/R组、I/R+DMSO组和I/R+SA+nor BIN(P<0.05)。结论 SA可以减轻I/R损伤造成的脑组织水肿并改善神经功能,其机制可能与通过KOR上调VEGF蛋白表达有关。
- 张磊董海平何振洲王震虹
- 关键词：脑缺血再灌注脑水肿
- 右美托咪定复合舒芬太尼用于老年胃癌患者腹腔镜根治术术后镇痛效果观察被引量：9
- 2018年
- 目的探讨右美托咪定复合舒芬太尼用于老年胃癌患者腹腔镜根治术后的镇痛效果。方法选取2016年1~12月在上海交通大学医学院附属仁济医院南院拟行择期腹腔镜根治术的胃癌患者,经过纳入、排除标准删选后90例,按照随机盲法,分为三组,每组各30例。对照组(S组):舒芬太尼(2μg/kg)+胃复安(20 mg);右美托咪啶低剂量组(D1组):右美托咪定(1μg/kg)+舒芬太尼(2μg/kg)+胃复安(20 mg);右美托咪定高剂量组(D2组):右美托咪定(2μg/kg)+舒芬太尼(2μg/kg)+胃复安。观察三组患者术后1 h(T_1)、2 h(T_2)、6 h(T_3)、12 h(T_4)、24 h(T_5)、48 h(T_6)的疼痛程度[视觉模拟评分(VAS评分)]、镇静程度(Ramsay评分),并比较三组患者术后的不良反应。结果三组患者术后T_1、T_2、T_3、T_4、T_5、T_6时间点VAS评分逐渐降低(P<0.05),且T_2~T_6各时间段D1、D2组VAS评分显著低于S组,差异有统计学意义(P<0.05),T_3~T_6时间段,D2组的VAS评分明显低于D1组,差异有统计学意义(P<0.05);三组患者术后T_1、T_2、T_3、T_4、T_5、T_6时间点Ramsay评分逐渐增高,且T_5、T_6时间点的D1、D2组Ramsay评分均比S组高,差异有统计学意义(P<0.05)。三组患者之间恶心、呕吐、窦性心动过缓、嗜睡等不良反应发生率比较,差异无统计学意义(P>0.05),且三组患者均无明显的呼吸抑制。结论右美托咪定与舒芬太尼存在协同作用,复合使用可明显降低患者的镇痛评分,同时不增加呼吸抑制、恶心呕吐等并发症的风险,可安全有效地用于老年胃癌患者腹腔镜根治术的术后镇痛。
- 董海平张磊王震虹
- 关键词：舒芬太尼术后镇痛静脉
