周伟
- 作品数：5 被引量：15H指数：3
- 供职机构：云南中医学院中药学院更多>>
- 发文基金：云南省应用基础研究基金国家自然科学基金云南省教育厅科学研究基金更多>>
- 相关领域：医药卫生农业科学更多>>
- 滇龙胆香叶醇-10-羟化酶基因克隆、生物信息学分析和表达被引量：4
- 2017年
- 目的克隆滇龙胆Gentiana rigescens香叶醇-10-羟化酶(geraniol-10-hydroxylase,G10H)基因,对其进行定量表达以及生物信息学分析。方法采用PCR技术获得G10H的c DNA序列,对G10H蛋白进行理化性质、二级结构和三级结构等生物信息学分析,并利用实时荧光定量PCR方法检测G10H基因在滇龙胆根、茎、叶中的表达情况。结果克隆得到滇龙胆G10H基因,全长为1 400 bp,ORF 1 248 bp,编码415个氨基酸。生物信息学预测该基因编码蛋白质分子式为C_(2131)H_(3390)N_(586)O_(615)S_(17),等电点为7.62,不稳定系数为44.20,疏水性系数GRAVY为-0.245。G10H基因在滇龙胆根、茎、叶中均有表达,其中在根中表达量最高,茎中最低。结论首次从滇龙胆中克隆得到了G10H基因,为进一步阐明该基因的羟基化功能在滇龙胆龙胆苦苷生物合成途径中的重要作用奠定基础。
- 周伟李媛吴昕怡刘小莉
- 关键词：基因克隆生物信息学基因表达
- 滇龙胆龙胆苦苷生物合成三个基因克隆、表达及与龙胆苦苷积累的相关性研究
- 目的克隆获得滇龙胆龙胆苦苷生物合成途径中可能的三个关键酶基因:3-羟基-3-甲基戊二酰辅酶A还原酶(HMGR)、香叶醇-10-羟化酶(G10H)和环烯醚萜合酶(IS)的c DNA序列,对三个基因进行原核表达,并分析它们的...
- 周伟
- 关键词：基因克隆龙胆苦苷含量
- 文献传递
- 酿酒酵母基因工程菌的构建及工艺优化研究进展被引量：3
- 2016年
- 酿酒酵母是合成天然产物的重要宿主菌,但在酿酒酵母中构建遗传稳定性好、基因表达可控的代谢途径并获得高产菌株仍然是代谢工程和合成生物学中的难点,笔者系统介绍了目前酿酒酵母工程菌的构建及发酵条件优化的研究进展为其代谢与合成提供一定的参考。
- 李媛张爱丽周伟钱子刚
- 关键词：酿酒酵母发酵优化合成生物学
- 云南药用龙胆资源分布和评价被引量：4
- 2015年
- 龙胆是中药的常用药之一,而龙胆属是龙胆科中的一个大属,云南龙胆属植物资源丰富,具有巨大的研究价值和挖掘潜力。本文主要对云南的药用龙胆属植物资源种类、分布、应用属性、化学、药理功效进行综述,以期为云南龙胆属植物资源的深入挖掘和开发利用提供一定的支持。
- 周伟秦艳梅刘小莉
- 关键词：龙胆属资源分布化学成分药理活性
- 滇龙胆3-羟基-3-甲基戊二酰辅酶A还原酶基因克隆、表达及分析被引量：4
- 2018年
- 目的：从药用植物滇龙胆中克隆得到3-羟基-3-甲基戊二酰辅酶A还原酶（3-hydroxy-3-methylglutaryl CoA reductase,HMGR）基因的c DNA全长,构建原核表达载体使其在大肠埃希菌中表达,对其进行定量表达并进行生物信息学分析。方法：利用PCR扩增克隆得到滇龙胆HMGR基因c DNA全长。构建p EASY-E1-HMGR表达载体,IPTG诱导表达。利用生物信息学方法分析克隆到的c DNA序列并预测结构和功能。采用实时荧光定量聚合酶链式反应（Real-time PCR）分析滇龙胆根、茎、叶在4个不同发育时期的HMGR表达情况。结果：克隆出两组HMGR基因,其中一组HMGR c DNA全长1 747 bp,开放阅读框长1 697 bp,编码565个氨基酸,定名为GRHMGR-1;另一组HMGR c DNA全长1 731 bp,开放阅读框长1 572 bp,编码523个氨基酸,定名为GRHMGR-2。SDS-PAGE显示重组质粒成功表达目的蛋白。Blastp发现,GRHMGR-1,GRHMGR-2与同属植物黄龙胆、秦艽的亲缘关系最为相近。结构分析显示都含有2个HMG-CoA结合位点,2个NADPH结合位点,预测都定位于内质网上。HMGR在滇龙胆根、茎、叶这4个不同发育期均有表达,表达量最高的是叶。结论：首次从滇龙胆中克隆到可能编码HMGR酶的基因,可为深入探讨滇龙胆龙胆苦苷生物合成奠定基础。
- 周伟吴昕怡张琳刘小莉
- 关键词：基因克隆原核表达生物信息学分析
