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烟酸或异烟酸类化合物及其用途: 本发明公开了一种烟酸或异烟酸类化合物及其用途。本发明提供的化合物，为式I所示化合物或其药学上可接受的盐、酯、溶剂合物。药效试验证明，本发明提供的巯基烟酸类化合物在体外能抑制肉毒毒素内肽酶活性，同时对肉毒毒素中毒小鼠具有明...; 王慧张万年李涛缪震元卢晓雪庄春林王建新徐西国黄洁吴岳林

TEM-1型β内酰胺酶的原核表达纯化及活性验证被引量：1: 2017年; 目的:产β-内酰胺酶是大肠杆菌、肺炎克雷伯菌等对β内酰胺类抗生素耐药的主要机制之一,该酶能水解青霉素、头孢菌素、碳青酶烯类等多种抗生素,其中TEM型是发现最早且种类最多的β内酰胺酶。探讨TEM-1型β内酰胺酶原核表达载体的构建、酶的纯化及活性验证。方法:利用PCR技术,以大肠杆菌全基因组为模板钓取TEM-1基因,构建p ET22b(+)-TEM-1表达质粒,经测序鉴定后,转入大肠杆菌Transetta(DE3),IPTG诱导表达、亲和纯化,并通过抗生素水解实验验证其酶活性。结果:构建了可溶性表达TEM-1的工程菌,通过亲和纯化最终获得纯度达90%以上的TEM-1型β内酰胺酶,该酶可水解氨苄西林。结论:获得了对氨苄西林具有水解活性的TEM-1型β内酰胺酶,并对其进行了酶动力学参数检测,验证其抗生素水解特性,有利于对临床抗生素的合理应用做出指导。; 李静徐建余宁年智刘传杰黄洁刘雪超李涛王慧; 关键词：TEM-1 Β内酰胺酶纯化酶动力学

肠出血性大肠杆菌O157∶H7 z0986-z1444双缺失突变株构建被引量：1: 2017年; 目的采用Red重组方法敲除肠出血性大肠杆菌(EHEC)O157∶H7 z0986和z1444基因,构建双缺失突变株。方法首先构建z0986、z1444打靶片段;其次以电击法转化感受态细胞,之后通过PCR鉴定所得菌株;最终所得阳性单克隆测定生长曲线。结果 z1444单基因缺失突变株(Δz1444/933)及z0986-z1444双基因缺失突变株(Δz0986/Δz1444/933)构建成功,其生长曲线与野生型EHEC O157∶H7差异均无统计学意义。结论 z0986与z1444基因缺失对EHEC的生长无影响。构建Δz1444/933及Δz0986/Δz1444/933为深入研究z1444基因的功能及作用机制奠定了基础。; 苏莉王建新陈芳红李崭黄洁李涛王慧; 关键词：肠出血性大肠杆菌 RED重组系统

肠出血性大肠杆菌O157：H7 z1445基因缺失株的构建: 2016年; 目的:利用Red重组系统敲除肠出血性大肠杆菌(EHEC)O157∶H7的z1445基因,构建大肠杆菌z1445基因缺失突变株。方法:以O157∶H7为模板,PCR扩增目的基因两侧的同源臂序列,分别经酶切后连接到p UC19-kan质粒的卡那霉素抗性基因kan两侧,PCR获得中间嵌合kan基因(带有FRT位点)的同源线性片段,利用质粒p KD46敲除z1445基因,利用质粒p CP20去除抗性标记基因;PCR鉴定及测序验证目的基因缺失后,测定缺失株及野生株的生长曲线。结果:敲除了z1445基因,突变株与野生株的生长曲线接近。结论:构建了z1445基因缺陷型菌株,为进一步分析z1445基因在O157∶H7与宿主的相互作用中发挥的作用提供了材料。; 刘雪超黄洁李涛刘坤王慧; 关键词：肠出血性大肠杆菌O157:H7 RED重组系统缺失突变株

pilO基因对鲍曼不动杆菌运动能力的影响被引量：1: 2015年; 目的:构建无标记的鲍曼不动杆菌pil O基因缺失突变株,通过表型鉴定pil O基因缺失对鲍曼不动杆菌运动能力的影响。方法:PCR扩增pil O基因上下游各1 kb同源臂,连接至p MO130-TelR自杀质粒,质粒转化大肠杆菌S17-1后再接合至鲍曼不动杆菌4294中;蔗糖诱导自杀质粒与基因组同源重组,以获得基因缺失突变株;蹭行实验观察pil O基因缺失对鲍曼不动杆菌运动能力的影响。结果:构建了pil O基因缺失鲍曼不动杆菌4294菌株突变株;缺失株与野生株生长曲线无明显差异,但蹭行能力显著下降。结论:pil O基因与细菌蹭行能力密切相关,提示其编码鲍曼不动杆菌Ⅳ型菌毛结构蛋白。; 郭通刘雄王德慧李崭黄洁李涛王慧; 关键词：鲍曼不动杆菌

烟酸或异烟酸类化合物及其用途: 本发明公开了一种烟酸或异烟酸类化合物及其用途。本发明提供的化合物，为式I所示化合物或其药学上可接受的盐、酯、溶剂合物。药效试验证明，本发明提供的巯基烟酸类化合物在体外能抑制肉毒毒素内肽酶活性，同时对肉毒毒素中毒小鼠具有明...; 王慧张万年李涛缪震元卢晓雪庄春林王建新徐西国黄洁吴岳林; 文献传递

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黄洁