张建中
- 作品数：5 被引量：24H指数：3
- 供职机构：中国疾病预防控制中心更多>>
- 发文基金：国家重点基础研究发展计划国家高技术研究发展计划更多>>
- 相关领域：农业科学医药卫生轻工技术与工程更多>>
- 转基因农产品DNA检测芯片及其制备方法和应用
- 本发明涉及一种转基因农产品DNA检测芯片，该芯片包括片基和位于片基上的核酸探针，该核酸探针包含用于检测目标基因的目标检测探针，该目标检测探针是一系列如SEQ ID NOs.1～50所示的核苷酸序列。本发明还涉及所述转基因...
- 吴永宁张建中周萍萍
- 文献传递
- 转基因水稻潮霉素标记基因PCR检测方法的建立及其在基因水平转移研究中的应用被引量：3
- 2006年
- 为建立用于基因水平转移研究,尤其是DNA经加工和消化后稳定性研究的针对转基因水稻潮霉素标记基因hpt(hygromycinphos photransferase)的定性和实时定量PCR体系,设计针对hpt的上游通用引物多个片段定性PCR扩增体系,以植物叶绿体基因rbcl为内对照,PCR扩增产物经测序验证。将定性PCR中最小片段(236bp)连接到质粒载体pUC18pMDT载体上,提取质粒经验证后做外标。应用TaqMan—MGB荧光探针和引物,建立定量的外标校正曲线法,并评价方法的精密度。建立的定性PCR体系能稳定扩增出236bp～910bp不同大小的5个hpt片段,并经测序验证。实时定量PCR的线性范围为105～10拷贝(R2=0.998),最低能检出10拷贝,重复性好。本研究已成功建立了用于转基因水稻标记基因hpt基因水平转移研究的定性和定量PCR系统。
- 沈立明吴永宁周萍萍张建中魏晓丽
- 关键词：基因基因水平转移聚合酶链反应
- 转基因农产品DNA检测芯片及其制备方法和应用
- 本发明涉及一种转基因农产品DNA检测芯片，该芯片包括片基和位于片基上的核酸探针，该核酸探针包含用于检测目标基因的目标检测探针，该目标检测探针是一系列如SEQ ID NOs.1～50所示的核苷酸序列。本发明还涉及所述转基因...
- 吴永宁张建中周萍萍
- 文献传递
- 不同加工条件下转基因大米潮霉素标记基因(hpt)稳定性研究被引量：14
- 2006年
- 目的从DNA稳定性的角度,探讨转基因大米潮霉素标记基因hpt向食品或消化道微生物转移发生水平转移的可能性。方法利用针对hpt不同大小片段的PCR扩增体系,对hpt在转基因大米加工食品中的稳定性进行研究。结果建立的PCR体系能稳定扩增出hpt236bp-910bp不同大小的5个片段。利用这一PCR体系对s86转基因大米不同加工食品的检测显示,加工米饭、粥大于500bp的片段已降解,爆米花和锅巴大于236bp的hpt片段已降解。对照M86大米加工米饭和粥仅能扩出植物叶绿体基因rbcl片段,爆米花、锅巴及空白对照所有扩增均为阴性。结论hpt在转基因大米加工食品中均已不同程度的发生了降解,不同加工方式对hpt片段降解影响显著,在加工后hpt以较大或完整片段向食品或消化道微生物转移的可能性减小。
- 沈立明吴永宁张建中周萍萍魏晓丽朱祯
- 关键词：转基因大米DNA降解食品加工基因水平转移
- 转基因大豆低密度基因芯片的检测方法研究被引量：8
- 2008年
- 目的建立Roundup Ready转基因大豆(简称RRS)的基因芯片检测方法,探讨其在转基因大豆检测中的应用。方法根据大豆中所转入的外源基因,选择camv35s启动子、nos终止子和cp4epsps基因,以大豆内源基因lectin基因为内参照基因设计了引物和探针,并制备了核苷酸芯片;通过多重PCR对样品核酸进行扩增和荧光标记后,将PCR产物与芯片杂交,检测大豆样品中所含的外源基因,并评价方法的灵敏度。结果检测转基因含量不同的RRS标准参考物,结果显示:camv35s启动子、nos终止子、外源基因cp4epsps检测灵敏度均可达0.45%。结论本研究所建立的基因芯片检测方法有良好的灵敏度及可重复性,有助于实现转基因大豆的高通量、高灵敏的检测。
- 周萍萍尤元海吴永宁张建中
- 关键词：转基因寡核苷酸序列分析聚合酶链反应
