目的研究新基因CAC1对胃癌细胞系AGS的细胞周期和细胞周期相关基因表达的调控作用。方法将AGS细胞分为空白对照组、阴性对照组和干扰组,分别给予细胞培养液、阴性对照siRNA和有效的CAC1-siRNA处理,用流式细胞仪检测细胞周期的变化,实时定量PCR和Western blot法检测细胞周期相关基因(p53、cyclin A、cyclin E及CDK2)在mRNA和蛋白水平的表达变化。结果 CAC1沉默后,流式细胞仪检测发现,RNA干扰组的AGS细胞G1期细胞比例[(73.23±3.04)%]较对照组[(45.33±0.82)%]明显增加(P<0.05),S期细胞比例[(5.40±5.83)%]较对照组[(41.07±1.07)%]显著减少(P<0.05)。CAC1沉默后,与对照组相比,干扰组无论是cyclin E的mRNA表达水平(1.000±0.000 vs 0.294±0.011,P<0.05),还是cyclin A的mRNA表达水平(1.000±0.000 vs 0.886±0.039,P<0.05),均出现了明显的下降,p53 mRNA表达水平显著上升(1.000±0.000 vs 2.233±0.122,P<0.05),CDK2mRNA表达水平无明显变化(1.000±0.000 vs 0.952±0.007,P>0.05)。类似地,CAC1沉默后,与对照组相比,干扰组的cyclin E蛋白表达水平(0.667±0.236 vs 0.165±0.046,P<0.05)和cyclin A蛋白表达水平(0.607±0.284 vs 0.208±0.029,P<0.05)均出现了明显的下降,P53蛋白表达水平出现了显著的上升(0.326±0.054 vs 0.656±0.106,P<0.05);而CDK2蛋白表达水平无明显变化(0.864±0.175 vs 0.717±0.100,P>0.05)。结论 CAC1可促进胃癌AGS细胞的G1/S期转换,下调p53的表达,上调cyclin E和cyclin A的表达。
