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张伟
作品数:
3
被引量:3
H指数:1
供职机构:
浙江大学医学院附属第二医院
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发文基金:
浙江省自然科学基金
国家杰出青年科学基金
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相关领域:
医药卫生
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合作作者
于晓方
浙江大学医学院附属第二医院
徐荣臻
浙江大学医学院附属第二医院
张旭照
浙江大学医学院附属第二医院
方永明
浙江大学医学院附属第二医院
何智文
浙江大学医学院附属第二医院
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肿瘤相关因子与重大疾病发病机制研究
于晓方
郑树
徐荣臻
张旭照
张伟
肿瘤、艾滋病、乙型肝炎是严重威胁人类健康的重大疾病。该团队经过多年艰苦、不懈的努力,取得了系列原创性研究成果,奠定了中国在国际艾滋病部分领域的领先地位;引领了HIV病毒与宿主蛋白相互作用机制研究的重要方向;同时揭示肿瘤相...
关键词:
关键词:
肝癌
乙型肝炎病毒
药物治疗
胞嘧啶脱氨酶APOBEC3G可能通过G→A突变抑制乙型肝炎病毒的复制
被引量:3
2007年
目的 研究胞嘧啶脱氨酶APOBEC3G(A3G)对HBV复制的影响及作用机制。方法 利用脂质体介导A3G和HBV的真核表达质粒瞬时共转染人肝癌细胞株HepG2,以空载体pcDNA3.1与HBV真核表达质粒共转染为对照,同时转染含增强型绿色荧光蛋白(EGFP)基因的质粒载体以判定转染效率。共转染两天后用荧光定量PCR方法定量细胞内核壳体(cofe)相关HBV DNA水平,用Western blot检测细胞内A3G和HBcAg的表达,并对细胞内cofe相关HBVDNAX基因进行PCR扩增、T.A克隆和测序,分析X基因中的碱基突变。结果 经EGFP判定的转染效率平均为29%。共转染0.5PgA3G和0.5μg HBV的HepG2细胞内core相关HBVDNA量平均下降为对照的8.9%,共转染2μgA3G和0.5μgHBV的平均下降为对照的0.6%。共转染A3G和HBV表达质粒后,HepG2细胞内HBV的X基因中发生G→A突变的数目明显增多,33个克隆中有9个克隆检测到了16-37个G→A突变,突变总数达254个,而对照的33个克隆中仅有2个克隆各检测到2个G→A突变。进一步的分析发现,共转染A3G后发生的G→A突变大多集中于几个热点区域,突变靶点常在GG二核苷酸中的第一个G上。结论 胞嘧啶脱氨酶APOBEC3G可能通过诱导HBVDNA的X基因发生G→A超突变,抑制HBV在人肝癌细胞HepG2中的复制。
张伟
张旭照
方永明
何智文
应松成
徐荣臻
于晓方
关键词:
APOBEC3G
胞嘧啶脱氨酶
乙型肝炎病毒
突变
食管癌相关基因4在肝细胞肝癌中的表达和功能
2015年
目的了解人食管癌相关基因4(ECRG4)在人肝细胞肝癌组织和肝癌细胞系中的表达情况,探讨ECRG4对肝癌细胞增殖、凋亡以及迁移能力的影响。方法提取24例配对肝细胞肝癌组织和癌旁肝组织的总RNA以及正常肝细胞系QSG7701和肝癌细胞系HepG2的总RNA和总蛋白,分别利用即时荧光定量PCR(RT—qPCR)和Western blot法检测ECRG4的表达;构建ECRG4的真核表达质粒ECRG4-pcDNA3.1,转染肝癌细胞系HepG2,进行体外的细胞增殖、凋亡以及迁移实验。结果与癌旁肝组织相比,在肝细胞肝癌组织中ECRG4mRNA表达下调或缺失(98.5%,23/24,P〈0.01);和正常肝细胞系QSG7701相比,ECRG4mRNA在肝癌细胞系HepG2中的表达明显下调(P〈0.05)并且其蛋白表达水平也明显降低。转染ECRG4表达质粒后HepG2细胞的增殖和迁移能力明显低于对照组(P〈0.05),细胞凋亡率明显高于对照组(P〈0.05)。结论ECRG4在肝细胞肝癌中表达下调,在体外肝癌细胞系中过表达ECRG4可抑制细胞的增殖和迁移,促进细胞凋亡,ECRG4可能是肝细胞肝癌潜在的抑癌基因,有望为肝细胞肝癌分子靶向治疗提供新策略。
晁臣
来茜
骆涛波
唐高燕
周韧
张伟
关键词:
肝细胞性
细胞增殖
细胞运动
细胞凋亡
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