徐立新
- 作品数：36 被引量：172H指数：7
- 供职机构：首都医科大学更多>>
- 发文基金：北京市自然科学基金国家自然科学基金北京市科技新星计划更多>>
- 相关领域：医药卫生生物学自动化与计算机技术机械工程更多>>
- 比较谷氨酸引起两品种大鼠培养星形胶质细胞肿胀的差异被引量：1
- 2016年
- 目的比较Wistar大鼠及SD大鼠培养星形胶质细胞(AST)对谷氨酸所致细胞肿胀的差异。方法利用新生1 d的Wistar大鼠和SD大鼠进行AST原代及传代培养,传代培养10 d分别给予1、10 mmol/L谷氨酸孵育48 h,通过乳酸脱氢酶释放率检测细胞活性,通过胶质纤维酸性蛋白(GFAP)免疫荧光染色、Image Pro Plus软件测量细胞周长表示细胞体积变化,通过逆转录实时荧光定量PCR法检测水通道蛋白4(AQP4)mRNA表达变化。结果谷氨酸对不同品种大鼠AST活性影响没有差异(P>0.05)。在正常情况下,Wistar大鼠AST周长小于SD大鼠,在给予谷氨酸处理后,均明显大于SD大鼠(P<0.05)。在给予1 mmol/L谷氨酸后,Wistar大鼠AST的AQP4mRNA表达明显高于SD大鼠(P<0.05)。结论 Wistar大鼠AST对谷氨酸所致细胞肿胀较SD大鼠明显,且谷氨酸对两品种大鼠AST上AQP4表达变化的影响存在差异。
- 师忠芳徐立新卢易董丽萍闫旭杨少华袁芳
- 关键词：谷氨酸星形胶质细胞水通道蛋白4
- 胶质瘤染色体1p和19q杂合性缺失与O6-甲基鸟嘌呤DNA甲基转移酶p53和Ki-67蛋白表达的关系被引量：10
- 2011年
- 目的探讨胶质瘤染色体1P和19q杂合性缺失（LOH）与O6-甲基鸟嘌呤DNA甲基转移酶（MGMT）、p53和Ki-67蛋白表达的关系。方法采集146例胶质瘤（45例少突胶质细胞瘤、42例少突星形细胞瘤和59例星形细胞瘤）的肿瘤组织和血液标本，采用聚合酶链反应结合变性高效液相色谱技术检测染色体1P和19qLOH，免疫组化法检测肿瘤组织中MGMT、p53和Ki-67蛋白的表达，并进一步分析其与胶质瘤临床病理特征的关系。结果少突胶质细胞肿瘤和星形细胞瘤中，lpLOH的发生率分别为59．8％和33．9％，差异有统计学意义（P=0．002）；lp和19qLOH的发生率分别为42．5％和16．9％，差异有统计学意义（P=0．001）。MGMT低表达和Ki-67高表达多发生于少突胶质细胞肿瘤中，发生率分别为65．5％和54．0％，而p53高表达多发生于星形细胞瘤和少突星形细胞瘤中，发生率为75．2％。在87例少突胶质细胞肿瘤中，lpLOH和MGMT蛋白低表达多发生于Ⅱ级少突胶质细胞肿瘤中，发生率分别为72．5％和87．5％，而p53和Ki-67蛋白高表达多发生于Ⅲ级少突胶质细胞肿瘤中，发生率分别为83．0％和76．6％。lp和19qLOH在非颞叶和颞叶肿瘤的发生率分别为55．6％和21．2％（P=0．002）。lpLOH与19qLOH、MGMT蛋白表达与p53蛋白表达、MGMT蛋白表达与Ki-67蛋白表达、1p和19qLOH与p53蛋白表达、1PLOH与Ki-67蛋白表达均有关（均P〈0．05）。结论1p和19qLOH及MGMT、p53和Ki-67的蛋白表达与胶质瘤的临床病理学特征有关，检测其LOH状态和表达水平对胶质瘤的诊断和治疗具有指导作用。
- 黄磊江涛袁芳李桂林徐立新崔云
- 关键词：神经胶质瘤杂合子丢失P53KI-67
- 实验性脑星形细胞水肿的CT灌注成像及其病理学研究被引量：7
- 2003年
- 目的 评价星形细胞水肿对局部脑血流量的影响。方法 随机选取体重在 2 80g至36 0 g之间的雄性Wistar大鼠 16只 ,分为实验组和对照组 ,分别将反式 1 氨基环戊基 1,3 二羧酸(tACPD)溶液或生理盐水 (NS)通过微量注射器注入右侧尾状核。脑水含量通过干湿称重法测定 ;动态CT灌注成像通过微机辅助CT脑灌注成像软件完成 ;Evan蓝是否外渗入脑作为检测血脑屏障(BBB)和内皮细胞受损的指示剂 ;组织病理学检查包括光学显微镜和超微电子显微镜 ,均在尾状核注射操作完成后 6h进行。结果 注射tACPD 6h后的脑组织水含量与对照组及实验组对侧尾状核比较差异有显著性意义 (t值分别为 11 2 15和 10 4 37,P值均 <0 0 5 )。组织病理学检查可以显示星形细胞水肿状况及其与微循环的关系 ,组间差异亦存在显著性。Evan蓝外渗试验未见脑组织蓝染 ,提示tACPD的注入并未使血脑屏障的通透性增加。CT灌注成像中 ,实验组和对照组中局部脑血流量(rCBF)、平均通过时间 (MTT)和最大峰值时间 (TTP)测值组间差异有显著性意义 (t值分别为15 6 90、- 7 916和 - 5 2 34,P值均 <0 0 5 ) ,rCBV组间差异无显著性意义 (t=1 815 ,P >0 0 5 )。结论 星形细胞水肿可以诱发或加重局部脑血流量的减低。有效缓解初期星形细胞水肿 ,可以为脑缺血?
- 梁晨阳高培毅袁芳徐立新胡凌
- 关键词：CT灌注成像病理学局部脑血流量
- 缺血性脑卒中大鼠肠黏膜的损害及小肠运动功能障碍被引量：4
- 2010年
- 目的观察缺血性脑卒中大鼠肠黏膜形态学改变及小肠动力变化,探讨二者之间的关系。方法 48只雄性健康Wistar大鼠分为2组,假手术对照组和缺血性脑卒中模型组,模型组又根据实验终止时间分为5个亚组,每组动物8只。采用改良的Longa线栓法建立大鼠大脑中动脉闭塞(middle cerebral artery occlusion,MCAO)模型。分别于缺血后3h、6h、12h、24h、48h进行光镜及电镜下小肠黏膜病理变化的研究以及利用亚甲蓝染色法检测小肠推进比。结果 MCAO组的小肠推进比与对照组相比显著减低,差异有统计学意义(P<0.05),3h组与6h组比较差异有统计学意义(P<0.01),6h组与12h组、12h组与24h组、24h组与48h组之间比较差异无统计学意义。光镜下MCAO组术后6h即可见肠绒毛肿胀、增粗、缩短,24h见绒毛顶端破损、剥脱,固有层裸露,对照组肠黏膜结构基本完整。电镜下MCAO组小肠绒毛上皮细胞内可见线粒体肿胀、嵴断裂,细胞器空泡变性,细胞间紧密连接增宽,可见凋亡细胞。结论缺血性脑卒中后可出现肠黏膜损伤和小肠动力障碍,二者的发生发展可能互为因果。
- 啜佳然朱玉群徐立新袁芳徐有青王晨
- 关键词：肠黏膜
- 腺苷酸活化蛋白激酶在星形胶质细胞中的表达
- 2017年
- 目的通过检测腺苷酸活化蛋白激酶(adenosine monophosphate-activated protein kinase,AMPK)α1、α2、β1、β2、γ1及γ2亚基在培养大鼠星形胶质细胞中的表达,探讨AMPK在星形胶质细胞中以何种形式组成三聚体。方法取新生1 d的Wistar大鼠脑皮层进行星形胶质细胞培养,用胶质原纤维酸性蛋白(glial fibrillary acidic protein,GFAP)和S100β免疫荧光染色鉴定星形胶质细胞。应用反转录聚合酶链反应(reverse transcription polymerase chain reaction,RT-PCR)法检测培养星形胶质细胞中AMPK各亚基的表达情况。结果 GFAP和S100β细胞免疫荧光染色显示,培养细胞95%以上为免疫荧光染色阳性细胞。RT-PCR实验结果显示培养的星形胶质细胞中有AMPKα1、α2、β1、γ1及γ2亚基的特异性目的条带出现,没有AMPKβ2亚基目的条带出现;在出现的5种特异性目的条带中,AMPKα2、β1及γ1亚基目的条带表达相对较多,而AMPKα1及γ2亚基只有微弱表达。结论星形胶质细胞中AMPK由α2、β1及γ1亚基组成三聚体,在星形胶质细胞能量代谢调节中发挥重要作用。
- 师忠芳徐立新闫旭董丽萍袁芳
- 关键词：腺苷酸活化蛋白激酶星形胶质细胞细胞培养缺血性脑损伤
- 少突胶质细胞肿瘤的分子遗传学改变与其部位的相关性研究被引量：3
- 2009年
- 目的研究少突胶质细胞肿瘤分子遗传学改变和肿瘤部位的相关性。方法回顾性地研究了105例胶质瘤。根据影像学资料记录每例肿瘤的部位，运用PCR-变性高效液相色谱技术检测肿瘤染色体1P和19q杂合性缺失的情况，用χ^2检验和Fisher确切概率法评估肿瘤部位和分子遗传学特征之间的相关性。结果位于非颞叶的少突胶质细胞肿瘤与位于颞叶的肿瘤相比，更倾向于具有1P和19q联合杂合性缺失，而星形细胞瘤的分子遗传学特征与其部位之间没有相关性。结论小同分子亚型的少突胶质细胞肿瘤可能发生于不同的脑叶，即具有1P和19q联合杂合性缺失的肿瘤通常发生于非颞叶。
- 黄磊江涛袁芳李桂林徐立新崔云刘恩重
- 关键词：少突神经胶质瘤杂合子丢失肿瘤部位
- 体外培养大鼠星形胶质细胞划痕损伤后水通道蛋白4表达下调
- 目的水通道蛋白4（aquqporin 4,AQP4）是脑内最主要的水通道蛋白,特异表达于星形胶质细胞。我们在大鼠自由落体脑损伤的研究中发现脑外伤引起星形胶质细胞AQP4表达增加,参与外伤性脑水肿的发生发展及消散,本实验进...
- 师忠芳韩明徐立新董丽萍袁芳
- 关键词：星形胶质细胞水通道蛋白4
- 文献传递
- 血清对大鼠星形胶质细胞形态和水通道蛋白-4表达的影响
- 2018年
- 目的通过比较培养大鼠星形胶质细胞在有血清培养基和无血清培养基中的形态及水通道蛋白-4(AQP-4)表达水平,探讨血脑屏障破坏对AQP-4表达的影响。方法取雌性Wistar大鼠大脑皮层细胞,分别在无血清培养基、DMEM培养基加10%胎牛血清(FBS)及无血清培养基加10%FBS中培养。倒置相差显微镜观察星形胶质细胞形态和大小,细胞免疫荧光染色及逆转录实时荧光定量聚合酶链反应(RT-q PCR)检测胶质纤维酸性蛋白(GFAP)、AQP-4及代谢型谷氨酸受体5(m Glu R5)的表达水平。结果在无血清培养基中,星形胶质细胞的细胞核和胞体小且突起细长,折光性强;而在两种添加10%FBS培养基中,星形胶质细胞呈多角扁平形且突起短小,折光性弱。细胞免疫荧光及RT-q PCR结果分析显示,两种加10%FBS培养基中星形胶质细胞GFAP和AQP-4的蛋白和m RNA表达水平均低于无血清培养基(P<0.001),而m Glu R5蛋白和m RNA表达无显著性差异(P>0.05)。结论血清改变培养星形胶质细胞的形态,降低GFAP和AQP-4的表达。
- 贾梅师忠芳王玉娇闫旭徐立新董丽萍李佳欣陈烨袁芳
- 关键词：血清水通道蛋白-4胶质纤维酸性蛋白代谢型谷氨酸受体5
- 介绍一种电药理实验的4孔脑片浴槽
- 2000年
- 介绍一种同时进行 4路液体灌流的多孔脑片浴槽。方法 :用大鼠大脑皮层脑片细胞外电极记录 ,观察自发性癫痫样放电。结果 :通过染料试验证明 4路液体互不通连。用无Mg2 +和含 2 0 μmol/L 4 氨基吡啶的人工脑脊液灌流 1h后 ,各孔脑片均可出现自发性放电 ,并可维持稳定达 3h以上。结论 :此装置可以同时观察
- 徐立新李亮王天佑
- 关键词：脑片癫痫抗癫痫药物
- 亚甲基蓝对大鼠局灶性脑缺血再灌注后血脑屏障的保护作用被引量：4
- 2016年
- 目的探讨亚甲基蓝对大鼠局灶性脑缺血再灌注引起血脑屏障破坏的保护作用。方法雄性Sprague-Dawley大鼠18只随机分为假手术组(n=6)、模型组(n=6)和亚甲基蓝组(n=6)。用线栓法制备大鼠左侧大脑中动脉栓塞1 h再灌注模型。亚甲基蓝组于再灌注即刻及再灌注2 h分别静脉给予亚甲基蓝3 mg/kg、1.5 mg/kg;模型组给予相同体积的生理盐水;假手术组手术操作与模型组相同,不插入线栓,不静脉注射药物。再灌注47 h后HE染色观察大鼠脑缺血周边皮层组织学结构,白蛋白免疫组化染色法检测血脑屏障通透性的变化,免疫组化染色法和免疫荧光双标染色法检测胶质原纤维酸性蛋白(GFAP)和水通道蛋白-4(AQP-4)的表达。结果 HE染色显示,模型组缺血周边大脑皮层的细胞和血管形态不完整,而亚甲基蓝组病理变化减轻;模型组白蛋白、GFAP和AQP-4表达均明显高于假手术组(P<0.01),亚甲基蓝组白蛋白、GFAP、AQP-4表达均低于模型组(P<0.05)。免疫荧光双标染色显示,AQP-4与GFAP在星形胶质细胞上共定位。结论亚甲基蓝可能是通过减轻胶质细胞增生及下调AQP-4表达来改善局灶性脑缺血再灌注损伤引起的血脑屏障破坏。
- 吴敏方庆师忠芳徐立新董丽萍闫旭杨少华袁芳
- 关键词：脑缺血再灌注亚甲基蓝血脑屏障胶质原纤维酸性蛋白水通道蛋白-4
