王永胜
- 作品数：13 被引量：55H指数：3
- 供职机构：中山大学更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金内蒙古自治区自然科学基金内蒙古自治区教育厅基金更多>>
- 相关领域：生物学农业科学历史地理更多>>
- 根瘤农杆菌介导的抗虫转基因烟草的初步研究被引量：2
- 1999年
- 王永胜扈廷茂刘明秋孔威
- 关键词：转基因烟草农杆菌介导转基因植株根瘤表达质粒大豆胰蛋白酶抑制剂
- 人血管抑素AK(1-3)基因的克隆及在大肠杆菌中的表达
- 2005年
- 用6月龄大月份流产的新鲜肝脏组织为材料,提取总RNA,通过反转录得到cDNA,并以此为模板,经PCR得到人Angiostatin基因的AK(1-3)片段.将此PCR产物直接与载体pMD18-T连接,转化大肠杆菌DH5α.经蓝白菌落筛选,PCR和酶切检测,筛选出阳性克隆,命名为pMDA,测序证明克隆序列与GenBank发表序列一致,大小为858bp.用Sal 和Bgl 酶切将该基因插入载体pQE40,并转化宿主菌M15[pREP4].经质粒电泳PCR和酶切检测筛选阳性克隆,得到表达载体pQEA,插入基因与载体上小鼠DHFR基因重组形成嵌合基因.在30℃,2×YT培养基(Kan25μg/mL+Amp200μg/mL),2mmol/LIPTG条件下诱导pQEA/M15[pREP4]表达.所得菌体总蛋白经SDS-PAGE分析,结果表明,在预期的61kD处得到一条特异带,为AK(1-3)cDNA与载体固有基因DHFR-6хHis的重组蛋白表达产物.实验结果为抗肿瘤药物的研制提供了条件.
- 海燕扈廷茂扈会平汪伟成苏慧敏王永胜
- 关键词：血管抑素
- 番茄1──氨基环丙烷羧酸(ACC)合成酶基因的反义RNA──核酶嵌合DNA序列的构建被引量：18
- 1999年
- 根据番茄ACC合成酶基因（LE—ACC2）DNA序列，以番茄(LycopersiconesculentumMill)果实的总DNA为模板，利用PCR技术扩增得到预期大小的该基因编码区内部分DNA序列，插入到质粒载体pGEM—3zf(＋)的BamHⅠ和HindⅢ位点之间后转化E．coliDH—5α，可选出重组子pRE，经酶切，PCR及DNA序列分析证明克隆成功；将pRE上的目的DNA序列以反义方式构建到我室已合成并克隆的含核酶DNA序列的重组质粒pRⅠ的BamHⅠ和HindⅢ之间，构成含有反义RNA-核酶嵌合DNA序列的重组质粒pREⅠ，经酶切及序列分析，结果与预期一致.
- 仇润祥扈廷茂王永胜张晓海刘中大
- 关键词：番茄ACC合成酶反义RNA
- 内蒙古自治区准格尔旗头道沟遗址发掘简报被引量：1
- 2016年
- 一、遗址概况头道沟遗址位于内蒙古自治区准格尔旗大路新区城壕村西北约3000米,地理坐标北纬40°6′28.95″,东经111°20′10.74″,海拔高度1100米。遗址坐落于黄河西岸的二级阶地上,相对河面高度40-45米。遗址西北约1000米处为呼准铁路黄河特大桥,北部及东部为紧临黄河的现代墓地,南部约150米为沿黄高速公路,遗址西部有一条土路穿过。
- 杨永贺梁云诗沈美辰谭玉华许永杰许永杰洪玉李霞王俞方谭文好梅欣欣范丽媛王永胜
- 关键词：战国晚期灰坑
- 番茄1位氨基环丙烷羧酸(ACC)合成酶基因的分离和克隆被引量：3
- 1998年
- 以番茄基因组ＤＮＡ为模板，利用多聚酶链反应技术（ＰＣＲ）将ＬＥ－ＡＣＣ２基因的编码区的第四外显子进行扩增．所得的ＤＮＡ扩增片段克隆至质粒ｐＥＧＭ－３ｚｆ（＋）的ＢａｍＨＩ和ＨｉｎｄⅢ位点之间，并用限制内切酶酶切、ＰＣＲ扩增及ＤＮＡ序列分析等手段证实已获得ＬＥ－ＡＣＣ２第四外显子序列的克隆．该克隆的碱基序列与国外报道的相关序列相一致，本文还对该基因的反义片段在番茄延熟品种培育上的意义进行了阐述和探讨．
- 刘中大仇润祥王永胜张晓海扈廷茂
- 关键词：番茄ACC合成酶基因基因克隆
- 马铃薯天冬氨酸蛋白酶抑制剂基因克隆和结构分析
- 1996年
- 以马铃薯基因组ＤＮＡ为模板并基于天冬氨酸蛋白酶抑制剂基因的ｃＤＮＡ序列所设计的两个引物，通过ＰＣＲ扩增得到６６６ｂｐ的天冬氨酸蛋白酶抑制剂基因编码区，并将此片段克隆到ｐＵＣ１８的ＳｍａＩ位点．序列分析结果表明该基因除去末端一终止密码子外其可译框架编码２２１个氨基酸残基，前导肽包括３２个氨基酸残基，故该抑制剂的成熟蛋白由１８９个氨基酸组成，第６７位的精氨酸为抑制胰蛋白酶的活性中心．与ｃＤＮＡ相比核苷酸的同源性为９４．３％，氨基酸的同源性为９０％．基因ＤＮＡ无内含子．
- 王永胜刘中大施一燊扈廷茂
- 关键词：天冬氨酸蛋白酶抑制剂基因结构
- 番茄ACC合成酶基因的反义RNA-核酶嵌合基因植物表达载体的构建及对番茄的转化被引量：24
- 2001年
- 将克隆的番茄 ACC合成酶基因的反义 RNA-核酶嵌合的 DNA序列用 Hind 和 Kpn I切割后重组于植物表达载体 p GA643中 ,用三亲融合法导入农杆菌 LBA4 40 4中 ,采用叶盘法转化番茄子叶 ,诱导出再生小植株 ,获得了卡那霉素的抗性植株 .提取植物总 DNA,用p GA643作探针 ,通过斑点杂交 ,已筛选出整合有外源基因的工程植株 .为进一步研究该嵌合基因对 ACC合成酶基因表达的影响及获得商品化的转基因番茄奠定了基础 .
- 张晓海扈廷茂海燕李丽莉王永胜
- 关键词：转基因番茄ACC合成酶反义RNA
- 特异切割番茄1-氨基环丙烷羧酸合成酶mRNA的核酶基因序列的合成与克隆被引量：2
- 1998年
- 根据番茄１－氨基环丙烷羧酸合成酶（ＡＣＣ合成酶）基因ｃＤＮＡ序列，按照锤头状核酶作用模式，设计合成长度分别为４０ｍｅｒ和４８ｍｅｒ的一对引物，经体外退火、延伸、连接，插入质粒ｐＧＥＭ－３Ｚｆ（＋）的ＫｐｎＩ和ＢａｍＨＩ位点之间，经菌落原位杂交、双酶切、聚丙烯酰胺凝胶电泳和序列分析证明，人工合成了特异切割ＡＣＣ合成酶ｍＲＮＡ第６６７～６６９位点ＧＵＣ序列的核酶基因序列。
- 王永胜李浩戈仇润祥刘中大扈廷茂
- 关键词：合成酶核酶蕃茄基因克隆
- 马铃薯天冬氨酸蛋白酶抑制剂基因转化烟草研究被引量：3
- 2000年
- 将马铃薯天冬氨酸蛋白酶抑制剂基因由重组质粒 pAPI189中亚克隆到双元表达载体 pGA643的XbaI和KpnI位点之间 ,构建成高效表达重组质粒pGAPI3。三亲融合法将其转移至农杆菌LB4404。通过叶盘法利用此融合后的含有目的基因的农杆菌转化烟草叶圆片 ,在含有Km的培养基上筛选抗性芽。将抗性芽接种到生根培养基至长成完整植株后再移栽到土质中以获得转基因植株。通过目的基因的特异引物进行PCR检测以及目的基因的片段为探针进行South ern杂交检测 ,证实已获得马铃薯天冬氨酸蛋白酶抑制剂基因的转基因烟草植株。
- 王永胜扈廷茂刘明秋李丽莉孔威
- 关键词：马铃薯转基因烟草
- 水稻发育突变体的遗传学和分子生物学研究
- 该文首先对植物发育生物学的研究进展进行了评述,认为由于分子遗传学的研究思想、方法和技术的介入,使植物发育生物学在胚胎发育、营养生长向生殖生长转变,营养器官和花器官的发育等领域取得引人瞩目的进展,可以说进入了发育生物学研究...
- 王永胜
- 关键词：植物发育生物学矮化突变体诱变育种辐射诱变
- 文献传递
