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甲型流感病毒（H1N1）感染介导的小鼠肺免疫损伤机制研究: 流感是一种急性呼吸道传染病,患病率高,在老年和儿童中死亡率很高,世界范围内每年都有大量的流感死亡病例报道,流感对世界公共卫生已经构成了严重的威胁。特别是2009年世界范围内暴发的猪源性甲型流感病毒,传染性强,波及世界21...; 吕进; 关键词：甲型流感病毒免疫防御天然免疫获得性免疫; 文献传递

炭疽疫苗免疫小鼠外周血T_H2,T_H1和浆细胞免疫应答动态观察: 2008年; 为了深入了解炭疽两种疫苗——A16R芽孢苗与炭疽无菌培养滤液佐剂吸附苗(anthrax vaccine adsorbed,AVA苗)诱导小鼠免疫应答类型的差异,筛选疫苗免疫评价有效的免疫学参数,分别从抗体及细胞应答水平上对炭疽两种疫苗免疫Balb/C小鼠后免疫应答产生过程进行了动态观察.抗体检测结果分析显示,A16R芽孢苗免疫小鼠血清中可同时检测到抗芽孢抗体与抗AVA抗体,AVA免疫可诱导小鼠产生高效价的抗AVA抗体;两种疫苗免疫小鼠血清IgG抗体亚型均以IgG1和IgG2b为主,A16R免疫组IgG2a明显高于AVA免疫组.细胞应答结果分析显示,两种疫苗免疫外周血中均可检测到抗原特异性的TH2,TH1和浆细胞应答.TH2应答于免疫后5天即可在外周血中检测到,至观察末期仍可维持在较高水平;TH1应答,A16R免疫组出现早于AVA免疫组,免疫后5天即可检测到,AVA免疫组于二次免疫的7天才出现,观察末期两组均可检测到低水平的TH1应答;两种疫苗免疫小鼠外周血中均可检测到抗原特异性的浆细胞,A16R免疫组出现早,维持时间长,至观察末期仍呈现上升趋势,AVA免疫组,浆细胞出现较晚,维持时间较短,观察末期仅检测到低水平的浆细胞.上述结果表明,多抗原刺激物的A16R芽孢苗较AVA能更有效的诱导细胞免疫应答;炭疽疫苗免疫后小鼠外周血中TH2,TH1和浆细胞细胞应答,可以同抗体一起,作为疫苗有效性的免疫评价指标.; 吕进何蕊董梅张良艳王希良; 关键词：免疫应答酶联免疫斑点抗体分泌细胞

流感病毒感染介导的免疫病理损伤研究进展被引量：48: 2009年; 流感病毒感染(如暴发性流行或高致病性禽流感H5N1感染)可以造成广泛的病理损伤及严重的并发症,其肺部病理损伤以肺水肿及广泛的炎性渗出为特点,并伴有大量的中性粒细胞、巨噬细胞、淋巴细胞浸润及促炎因子和趋化因子的产生.组织学及病理学研究表明,过度的宿主应答反应是介导病理损伤的主要原因之一,而这些在流感病毒感染过程中介导组织损伤的免疫分子与细胞,在病毒的有效清除过程中同样至关重要.主要对甲型流感病毒感染过程中免疫系统的多种效应成分如何引发及加重病理性损伤等有害方面加以综述.为深入了解流感病毒感染防御机制及寻找并设计出既无害又能有效地治疗流感病毒感染的策略提供理论指导.; 吕进王希良; 关键词：流感病毒免疫病理损伤免疫防御

炭疽芽孢苗与吸附PA苗诱导小鼠体液免疫应答初步观察: 炭疽芽孢杆菌是人畜共患炭疽病的重要病原体，是公认的重要生物战剂之一，目前人用疫苗有两种：即炭疽减毒活芽孢苗和炭疽弱毒株无菌培养滤液佐剂吸附苗，自研制成功以来，已在人群中长期使用，为了深入了解炭疽疫苗的免疫应答机制，为疫苗...; 吕进; 关键词：炭疽芽孢杆菌体液免疫抗体分泌细胞; 文献传递

流感病毒灭活疫苗研究进展被引量：4: 2007年; 流感病毒灭活疫苗白1945年在美国首先获准上市以来，已广泛应用于临床。但由于其不能刺激机体产生分泌型免疫球蛋白A（sIgA）的粘膜免疫保护作用；制备过程严重依赖于鸡胚；接种途径单一；以及不同型别间交叉免疫保护效果较差等缺点，限制了其应用范围。我国白2005年7月1日起禁止肌肉注射免疫中使用铝盐佐剂，为流感病毒灭活疫苗的研究提出了新的课题——提高流感病毒灭活疫苗的安全性、有效性，以应对流感的暴发流行。; 吕进王希良; 关键词：流感病毒灭活疫苗粘膜佐剂

炭疽AVA疫苗特异性抗体分泌细胞检测方法的建立被引量：1: 2007年; 目的应用酶联免疫斑点（ELISPOT）技术,建立一种检测炭疽AVA免疫后特异性抗体分泌细胞的方法,用于检测和评价炭疽无菌培养滤液抗原特异性抗体形成细胞的功能.方法无菌分离小鼠脾细胞,建立一系列特异性ELISPOT检测炭疽无菌培养滤液抗原特异性抗体分泌细胞的参数：包括抗原最佳包被浓度、细胞最适孵育时间、反应体系中细胞浓度以及亲和素抗体工作浓度的确定,同时检测上清中抗体效价,并以不相关抗原包被,检验方法的敏感性和特异性.结果当抗原包被浓度为7.5μg/mL时,不同细胞浓度反应曲线最稳定细胞数为5×10^6/mL时,不同包被浓度形成的斑点数适量,易于计数且在抗体稀释度相同情况下,脾细胞孵育时间为3～6 h所获得的斑点数最清晰,背景着色最浅,容易被仪器识别同时,特异性抗原包被组所获得的斑点频数高于无关抗原包被组（P＜0.01）反应体系上清中未检测到抗原特异性抗体.结论该方法敏感、特异,可用于AVA抗原免疫后体液免疫评价.; 吕进张松乐董梅何蕊江海燕张良艳邢丽杨海荣王希良

甲型流感病毒(H1N1)感染介导的小鼠免疫损伤机制研究: 流感是一种急性呼吸道传染病，患病率高，在老年和儿童中死亡率很高，世界范围内每年都有大量的流感死亡病例报道，流感对世界公共卫生已经构成了严重的威胁。特别是2009年世界范围内暴发的猪源性甲型流感病毒，传染性强，波及世界21...; 吕进; 关键词：甲型流感病毒免疫防御天然免疫获得性免疫

流感病毒免疫防御机制研究进展: 2009年; 流感病毒感染引起免疫损伤的同时可以激发机体产生免疫应答，在病毒的清除与疾病的恢复及再次感染过程中发挥着有效的防御作用。尽管流感病毒经常发生变异，但自然感染诱导的免疫防御机制仍可提供一定程度的交叉保护作用。这一系列免疫应答的激发及形成包括多种分子及细胞的参与，其发生、发展及转归直接决定着疾病的严重程度及免疫预防的有效性。了解天然免疫应答、粘膜免疫应答及获得性免疫应答的激发与维持可为流感病毒的防治及疫苗的研制提供思路。; 吕进王希良; 关键词：免疫防御天然免疫应答粘膜免疫获得性免疫应答

以乙型肝炎病毒核心蛋白颗粒为载体的流感通用疫苗的构建被引量：2: 2010年; 目的构建以乙型肝炎病毒核心蛋白(Hepatitis B virus coreprotein,HBc)颗粒为载体的含流感病毒M2基质蛋白胞外功能区(M2 ectodomain,M2e)和核蛋白(Nucleoprotein,NP)保守表位的流感通用疫苗,评价其抗不同亚型流感病毒感染的保护作用。方法采用基因工程方法将流感病毒M2e的3拷贝重复片段与NP的CTL表位串联,插入HBc刺突顶端的免疫优势决定区,构建重组表达质粒pET-21a-HBc-3M2e-NP,转化大肠杆菌BL21(DE3),IPTG16℃低温诱导表达。表达的融合蛋白HBc-3M2e-NP经纯化后,电镜观察病毒样颗粒形成情况。纯化的融合蛋白分别经鼻腔和腹腔免疫小鼠,对照组注射等体积的PBS,间接ELISA法检测小鼠血清IgG抗体水平;流式细胞术检测小鼠脾组织中CD4+、CD8+T淋巴细胞水平;以流感病毒攻毒,检测融合蛋白的保护效果。结果重组表达质粒pET-21a-HBc-3M2e-NP经PCR及双酶切鉴定证明构建正确。表达的融合蛋白相对分子质量约为29000,以包涵体和可溶性两种形式表达,且可与鼠抗M2e单抗发生特异性反应。纯化的融合蛋白纯度大于90%,且能够自动装配成病毒样颗粒。用该病毒样颗粒免疫小鼠,可诱导小鼠产生针对不同流感病毒毒株的特异性抗体;2种途径免疫的小鼠脾组织中CD4+T淋巴细胞含量和CD4+/CD8+T淋巴细胞比例均较对照组明显升高;攻毒试验结果显示,具有交叉保护作用。结论构建的流感通用疫苗能够诱导机体产生高水平的体液免疫和细胞免疫应答及有效的交叉保护作用,为流感通用疫苗的深入研究奠定了基础。; 花艳红洪渊东吕进陈中伟张伟张良艳周宇王希良; 关键词：流感疫苗病毒样颗粒核蛋白

高致病性人禽流感H5N1疫苗滴鼻免疫应答效果的初步研究被引量：2: 2009年; 目的通过高致病性人禽流感H5N1全病毒-MF59佐剂疫苗滴鼻免疫Balb/c小鼠,评价该疫苗所诱导的系统免疫与黏膜免疫应答效果。方法以不同剂量抗原按比例与MF59佐剂配伍制成粘膜疫苗,滴鼻免疫Balb/c小鼠,二免2周采血检测血清IgG、IgM效价及血清中HAI(HAinhibitor)的中和抗体效价,同时收集鼻、肺灌洗液,检测其IgG和sIgA抗体效价。结果H5N1+MF59组血清抗体效价较H5N1组有显著升高(P<0.01);在各剂量组中,随着剂量的增加抗体效价呈上升趋势,12μg后抗体效价呈下降趋势,以H5N1+MF59(12μg)组效价最高;肺鼻灌洗液中,均可检测到特异性分泌型IgA、IgG,其中特异性分泌型IgA效价略高于IgG;抗体亚型的分布以IgG1、IgG2b为主。结论灭活高致病性禽流感全病毒H5N1在佐剂MF59作用下可诱导机体产生体液免疫应答,同时还可以在黏膜局部产生特异性分泌型IgA、IgG,为高致病人禽流感病毒H5N1黏膜疫苗的研制奠定了基础。; 何蕊吕进张良艳董梅王希良; 关键词：滴鼻免疫免疫应答

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吕进

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