肖志强 作品数:178 被引量:576 H指数:12 供职机构: 中南大学湘雅医院 更多>> 发文基金: 国家自然科学基金 教育部跨世纪优秀人才培养计划 国家重点基础研究发展计划 更多>> 相关领域: 医药卫生 生物学 理学 自动化与计算机技术 更多>>
正常人大肠上皮衰老相关蛋白质组研究 背景与目的大肠上皮衰老是一个渐进性、多基因参与的复杂过程,随着衰老的发生发展,一方面肠上皮的多种生理功能下降;另一方面包括大肠癌在内的肠道疾病的发病率显著升高,但其发生机制尚不明确。本研究的目的是利用蛋白质组学(prot... 李明 肖志强 陈主初 冯雪萍 张鹏飞 李峰文献传递 人结肠上皮衰老相关蛋白质的筛选 被引量:2 2005年 目的:筛选与人结肠上皮衰老相关的蛋白质以探讨人结肠上皮衰老及对癌症易感的分子机制。方法:应用双向凝胶电泳技术分离青年人及老年人的正常结肠上皮的总蛋白,经银染显色、图像分析、识别差异表达的蛋白质点,应用基质辅助激光解吸电离飞行时间质谱得到相应的肽质量指纹图谱,搜索数据库鉴定部分差异蛋白质点。结果:建立了青年人和老年人的正常结肠上皮的双向凝胶电泳图谱,质谱鉴定得到青年人和老年人之间的表达差异大于2倍的蛋白质点19个,包括17种非冗余蛋白质,它们的功能涉及物质代谢、能量产生、物质转运、抗氧化以及蛋白质的翻译、修饰和折叠等。结论:筛选并鉴定了17种结肠上皮衰老相关的蛋白质,提示线粒体功能受伤、抗氧化能力下降是结肠上皮衰老的重要原因,为揭示结肠上皮的衰老机制及衰老的结肠上皮对癌症易感的机制提供了线索。 朱果 肖志强 陈主初 李建玲 张鹏飞 杨轶轩 冯雪萍 袁伟健关键词:结肠上皮 衰老 癌症 蛋白质组学 细菌膜蛋白质组成分提取方法的建立及优化 被引量:1 2004年 陈仁 范学工 张艳 代洪 肖志强 冯学萍 唐祖胜关键词:蛋白质组学 双向电泳技术 亚健康便秘人群结肠黏膜蛋白质组的筛选鉴定与临床应用 被引量:2 2011年 筛选亚健康便秘人群结肠黏膜变化的分子标志物,为亚健康便秘人群的结肠黏膜改变机制提供理论依据.采用双向凝胶电泳(two-dimensional electrophoresis,2-DE)对亚健康便秘人群及健康志愿者结肠黏膜组织进行蛋白质分离,ImageMaster2D Elite分析软件进行图像分析,基质辅助激光解吸电离飞行时间质谱(matrix-assisted laser desorption/ionization time of flightmass spectrometry,MALDI-TOF-MS)得到相应的肽质量指纹图(peptide mass fingerprint,PMF),搜索数据库鉴定差异蛋白.建立了亚健康便秘人群及健康志愿者结肠黏膜组织2-DE图谱,分析出其凝胶的平均蛋白质点数(501.00±37.16,536.00±41.63),两者平均差异蛋白质点数为46.00±7.82,取20个表达量明显改变的蛋白质点进行质谱分析,鉴定出17个蛋白质.其中7个蛋白质点表达下调,10个蛋白质点表达上调.差异蛋白质点包括蛋白质合成与分解、分子伴侣、氧化还原调节及信号传导等相关蛋白质.随即应用免疫印迹(Western blot)技术分析差异蛋白β-actin、YWHAZ及PBP-Ⅰ(phosphatidylethanolamine-binding proteinⅠ)在两类组织中的表达水平及临床意义.结果表明,亚健康便秘人群和健康志愿者的结肠黏膜组织蛋白表达存在差异,β-actin、YWHAZ表达下调及PBP-Ⅰ上调参与了亚健康便秘的发生,对此状态进行合理干预,可使身体向健康转化. 邓辉 张运丽 钟白云 刘蔚东 晏群 冯斯斯 肖志强关键词:结肠黏膜 亚健康 便秘 蛋白质组 免疫印迹 塞来昔布诱导大肠癌细胞凋亡与细胞色素C依赖性信号途径活化相关 被引量:11 2004年 目的 观察塞来昔布对大肠癌细胞株HT 2 9的凋亡诱导作用 ,并通过分析塞来昔布作用后的HT 2 9细胞的细胞色素C、Caspase 9和多聚ADP核糖多聚酶 (PARP)蛋白表达的变化 ,探讨其诱导大肠癌细胞凋亡的分子机制。方法 大肠癌细胞凋亡用吖啶橙 /溴化乙啶染色结合荧光显微镜、流式细胞仪 (FCM )技术测定 ,细胞色素C、Caspase 9和PARP蛋白表达用Western印迹技术检测。 结果 荧光染色法显示塞来昔布在 0~ 12 0 μmol/L呈浓度和时间依赖性诱导HT 2 9结肠癌细胞凋亡。FCM结果显示典型的亚二倍体“凋亡峰” ,凋亡率分别为 (7.31± 2 .37) %~ (4 8.30± 2 .86 ) %。塞来昔布诱导线粒体释放细胞色素C入胞质 ,激活Caspase 9,继而裂解活化PARP。结论 塞来昔布可诱导大肠癌细胞株HT 2 9细胞凋亡 ,其机制涉及细胞色素C依赖性凋亡调节信号通路。 张桂英 彭杰 肖志强 唐发清关键词:塞来昔布 大肠癌细胞 细胞色素C CASPASE-9 PARP 信号途径 人支气管上皮不典型增生与浸润癌组织的比较蛋白质组学研究 被引量:4 2004年 为筛选支气管上皮鳞状不典型增生进展的分子标志物 ,采用改良的脱氧胆酸 三氯醋酸 (deoxycholate trichloroaeticacid ,DOC TCA)法提纯支气管上皮总蛋白质进行双向电泳 (two dimensionalelectrophoresis,2 DE) ,应用ImageMaster 2D分析软件、Student’st 检验识别差异蛋白质点 ,基质辅助激光解吸电离飞行时间质谱(matrix assistedlaserdesorption/ionizationtime of flightmassspectrometry ,MALDI TOF MS)得到相应的肽质指纹图 (peptidemassfingerprint,PMF) ,搜索数据库鉴定差异蛋白质 .由此获得人支气管上皮不典型增生和浸润癌组织的 2 DE图谱及其凝胶的平均蛋白质点数 (12 73 0 0± 4 3 31,132 6 0 0± 6 6 6 3) ,且两阶段间平均差异蛋白质点数为 5 6 0 0± 8 96 .取 38个差异蛋白质点进行PMF分析 ,鉴定出一些与细胞生长、分化或肿瘤发生等有关的蛋白质 ,随即应用免疫组化检测差异蛋白质EGFR、c Jun、Mdm2在两类组织中的表达 ,其结果也显示了类似的表达差异 .支气管上皮不典型增生恶性转化过程中存在蛋白质的差异表达 ,这些差异蛋白质可能以不同的方式参与了癌变过程 ,且EGFR、c Jun、Mdm2的免疫组化验证结果与质谱结果的一致性表明 。 吴晓英 陈主初 肖志强 李萃 汪春年 李建玲 冯雪萍 张鹏飞关键词:比较蛋白质组学 人支气管上皮 差异表达蛋白质 激光捕获显微切割技术纯化的鼻咽癌和正常鼻咽上皮细胞的比较蛋白质组学研究 被引量:7 2008年 为筛选鼻咽癌(nasopharyngeal carcinoma,NPC)的分子标志物,采用激光捕获显微切割技术(laser capture microdissection,LCM)分别从NPC组织和正常鼻咽上皮组织(normal nasopharyngal epithelial tissue,NNET)中切割纯化NPC细胞和正常鼻咽上皮细胞(normal nasopharyngal epithelial cells,NNEC),应用二维凝胶电泳(two-dimensional electrophoresis,2-DE)分离LCM纯化细胞的蛋白质,图像分析识别差异表达的蛋白质点,基质辅助激光解吸电离飞行时间质谱(MALDI-TOF-MS)和电喷雾电离串联质谱(ESI-Q-TOF-MS)鉴定差异蛋白质点,Western blot检测差异蛋白cytokeratin8(CK8)在LCM纯化的NPC细胞和NNEC以及具有不同分化程度或转移潜能的4株NPC细胞中的表达,免疫组织化学检测CK8在63例NPC、28例NNET及20例颈淋巴结转移NPC组织中的表达水平.建立了LCM纯化的NPC细胞和NNEC的2-DE图谱,质谱鉴定了29个差异蛋白质,其中15个蛋白质只在NPC表达或表达明显增高,14个蛋白质在NPC中表达下调或缺失;Western blot结果显示,CK8的表达水平在NPC中较NNET明显下调,并与NPC细胞株的分化程度和转移潜能有关;免疫组织化学结果显示,CK8在NPC组织中的表达较NNET明显下调,在颈淋巴结转移NPC中的表达较原发NPC明显上调.研究结果提示,CK8与NPC分化及淋巴结转移相关,有望成为预测NPC转移和区别NPC分化程度的分子标志物. 程爱兰 黄卫国 张鹏飞 李茂玉 彭芳 李峰 李萃 易红 李美香 陈主初 肖志强关键词:激光捕获显微切割 鼻咽癌 二维凝胶电泳 基质辅助激光解吸电离飞行时间质谱 鼻咽癌患者血清自身抗体多因素判别公式的建立及初步验证 2011年 目的探讨采用作者前期通过蛋白质组学研究发现的四种鼻咽癌(NPC)患者血清自身抗体来建立多因素判别公式对NPC的临床诊断价值。方法 采用本实验室建立的酶联免疫吸附试验方法(ELISA)分别检测了36例NPC患者、20例其它肿瘤患者及20例健康体检者血清抗细胞角蛋白19(CK19),抗Rho GDP解离抑制因子2(Rho-GDI-2),抗热休克蛋白70(HSP70)和抗亮氨酸氨基肽酶(LAP3)抗体浓度,并对4种抗体浓度采用多因素判别分析方法建立判别函数。结果鼻咽癌患者血清中4种抗体的含量明显高于正常对照组。以4种抗体组成的判别函数对NPC判别的灵敏度为41.7%,特异性为95%,判别正确率为61.8%。结论四种自身抗体组成的多因素判别公式有助于NPC的筛查和诊断。 易斌 罗建清 周欢群 姚润 肖志强关键词:鼻咽癌 酶联免疫吸附试验 自身抗体 标志物 肿瘤放射抗拒性的研究进展 被引量:2 2011年 放疗是肿瘤的主要治疗手段之一,长期以来,国内外针对提高肿瘤疗效进行了多方努力,但总的疗效改变不明显。放射抗拒一直是制约肿瘤放疗疗效的瓶颈,是放疗失败的主要原因之一。放疗效果与肿瘤、宿主及肿瘤和正常组织的放射剂量效应有关。目前采用的各种肿瘤放疗,大多是不同个体使用相似的放疗方案,但是不同个体放射敏感性有明显差异,因此。 冯雪萍 肖志强 肖健云关键词:肿瘤放疗 放射抗拒 放射增敏 胃癌细胞株多药耐药性的蛋白组学研究 背景与目的肿瘤细胞的多药耐药性(Multidrug Resistance,MDR)是指肿瘤细胞接触一种化疗药物并对其产生耐药后,同时对其他化学结构和作用机制不同的化疗药物亦产生耐药。我国胃癌在各种恶性肿瘤中占首位,胃癌细... 杨轶轩 肖志强 张桂英 朱果 易红 冯雪萍 张鹏飞文献传递