易红
- 作品数：89 被引量：422H指数：11
- 供职机构：中南大学湘雅医院更多>>
- 发文基金：教育部跨世纪优秀人才培养计划国家自然科学基金国家重点基础研究发展计划更多>>
- 相关领域：医药卫生生物学更多>>
- 鼻咽癌细胞中p53相互作用蛋白质的分离和鉴定被引量：11
- 2004年
- 鼻咽癌中p5 3基因突变罕见 ,但绝大部分鼻咽癌中存在p5 3蛋白过表达 /聚集且功能失活 .然而 ,到目前为止p5 3蛋白失活的机制仍然不清楚 .为揭示鼻咽癌中p5 3蛋白功能失活的机制 ,采用免疫共沉淀技术分别富集鼻咽癌细胞系HNE1和HNE2的p5 3结合蛋白 ,SDS 聚丙烯酰胺凝胶电泳 (SDS PAGE)对免疫沉淀复合物进行分离 ,从胶中切取p5 3结合蛋白条带 ,胶内酶解后进行电喷雾串联质谱 (LC ESI MS/MS)分析 ,得到相应的肽序列标签 (peptidesequencetags ,PST) ,通过搜索数据库在鼻咽癌细胞系中鉴定了 9个p5 3结合蛋白 .分别是热休克蛋白 70 (HSP70 )家族成员GRP 78和GRP 75、HSP90家族成员GRP 94、核纤层蛋白A/C (LaminA/C)、α actinin 4、Ezrin/Cytovillin、DNA复制准许因子 /MCM3蛋白 (DNAreplicationlicensingfactor/minichromosomemaintenance 3protein ,MCM3)、CD98/ 4F2heavychain和蛋白激酶C (PKC) .并用免疫共沉淀和蛋白质印迹分析技术对HNE1细胞蛋白条带 3鉴定的p5 3相互作用蛋白之一HSP78进行了验证 .首次在鼻咽癌细胞中鉴定了 9个p5 3结合蛋白 ,为阐明鼻咽癌中p5 3蛋白聚集及失活的机制提供了重要依据和线索 .
- 胡巍肖志强陈主初李建玲张鹏飞冯雪萍易红余艳辉唐新科刘清萍梁宋平
- 关键词：P53鼻咽癌免疫共沉淀相互作用蛋白蛋白质印迹
- 急性髓系白血病GLIPR1基因甲基化及其表达
- 2009年
- 目的:检测GLIPR1基因在急性髓系白血病(AML)细胞株和AML患者骨髓细胞中的甲基化状态和表达水平,探讨其表达水平与启动子甲基化的关系。方法:以5株白血病细胞株,以及54例治疗前AML患者骨髓、48例急性淋巴细胞白血病(ALL)患者骨髓、40例慢性粒细胞白血病(CML)患者骨髓、35例对照骨髓和8例治疗后完全缓解AML患者骨髓为样本,采用RT-PCR检测GLIPR1mRNA表达水平,采用甲基化特异PCR(MS-PCR)方法检测GLIPR1基因甲基化状态,并对GLIPR1mRNA表达水平与其甲基化状态进行相关性分析。结果:GLIPR1基因在AML细胞株中的表达水平低于CML急性变细胞株和ALL细胞株,而前者甲基化水平高于后者。5-aza-2dC处理细胞后,GLIPR1基因在AML细胞株中的表达水平明显上调,而在CML急性变细胞株和ALL细胞株中的表达水平上调不明显。GLIPR1基因在AML骨髓中的表达水平(0.38±0.20)明显低于ALL骨髓(0.76±0.18)、CML骨髓(0.80±0.14)和对照骨髓(0.85±0.12),在完全缓解AML骨髓中的表达水平明显高于治疗前AML骨髓(0.78±0.13vs.0.36±0.20);而ALL和CML骨髓中的表达水平与对照骨髓比较无明显差异(P>0.05)。GLIPR1基因在AML骨髓的甲基化阳性率(81.5%)明显高于ALL骨髓(37.5%)、CML骨髓(27.5%)和对照骨髓(14.3%),在完全缓解AML骨髓中的甲基化阳性率明显低于治疗前骨髓(12.5%vs.75.0%);而在ALL和CML骨髓中的甲基化阳性率与对照骨髓比较无明显差异(P>0.05)。GLIPR1基因在AML骨髓中的表达水平与其甲基化呈负相关。结论:GLIPR1基因在AML中表达下调或缺失及启动子甲基化可能是导致GLIPR1基因表达沉默的原因,GLIPR1基因表达和甲基化水平对判断AML患者的疗效有一定意义。
- 梁婷谭潭肖艳华易红李萃彭芳陈主初肖志强
- 关键词：急性髓系白血病甲基化
- 非小细胞肺癌分泌蛋白的蛋白质组学研究(英文)被引量：7
- 2006年
- 背景与目的:癌细胞分泌蛋白是潜在的血清标志物,而且对肿瘤的早期筛选也具有重要意义。因此,系统、全面地研究肿瘤细胞分泌蛋白对于肿瘤血清标志物的筛选具有重要意义。本研究旨在鉴定肺癌细胞分泌蛋白,为肺癌血清标志物筛选提供实验依据。方法:用含胎牛血清的RPMI-1640培养液培养非小细胞肺癌细胞系A549细胞,收集A549细胞培养液中的蛋白及胎牛血清培养液中的蛋白(对照)进行蛋白双向电泳,应用基质辅助激光解析电离飞行时间质谱(MALDI-TOF-MS)及生物信息学鉴定A549凝胶上特有的蛋白质点。筛选出人属的蛋白质点后,应用RT-PCR方法检测其在肺癌组织及配对远处肺组织中的表达差异;并检测培养液及血清中锰-超氧化物歧化酶(manganesesuperoxidedismutase,Mn-SOD)水平。结果:鉴定出人属的蛋白质点14个,包括肌动蛋白、!烯醇酶(alphaenolase,ENO1)、Mn-SOD、谷胱苷肽S转移酶P(glutathioneS-transferaseP,GSTP1-1)、二氢二醇脱氢酶(dihydrodioldehydrogenase,DDH)、磷酸甘油酸变位酶1(phosphoglyceratemutase1,PGAM1)、葡萄糖依赖性胰岛素释放肽受体(glucose-dependentinsulinotropicproteinreceptor,GIPR)、肽基脯氨基顺反异构酶(peptidyl-prolylcis-transisomeraseA,PPIA)、磷脂酰乙醇胺结合蛋白(phosphatidylethanolaminebindingprotein,PEBP)、蛋白基因产物9.5(ubiquitincarboxyl-terminalhydrolaseisozymeL1,PGP9.5)、peroxiredoxin1(PDX1)、galectin-1及专利蛋白WO0222660等。RT-PCR检测示ENO1、DDH、PEBP、PGP9.5、PDX1、PGAM1、PPIA在肺癌组织中高表达。酶活性检测发现A549培养液中存在Mn-SOD,且发现非小细胞肺癌患者血清中有高水平的Mn-SOD。结论:本研究首次对非小细胞肺癌细胞的分泌蛋白进行了鉴定;发现多种高表达的非小细胞肺癌分泌蛋白基因,其中首次发现ENO1及PEBP基因在非小细胞肺癌中高表达;Mn-SOD是非小细胞肺癌的分泌型血清标志物。该研究为非小细胞肺癌
- 黄凌瑾陈胜喜罗万俊蒋海河张鹏飞易红
- 关键词：分泌蛋白血清标志物蛋白质组学
- 应用蛋白质组学和RNAi技术筛选鼻咽癌细胞中p53功能相关蛋白质被引量：6
- 2007年
- 为了阐明鼻咽癌中高表达的p53蛋白聚集与失活的机制,高通量地检测与p53功能相关的蛋白质,首先采用RNA干扰(RNAi)技术稳定沉默鼻咽癌细胞系CNE2的p53基因表达,然后用蛋白质组技术研究稳定沉默该基因对鼻咽癌蛋白质表达谱的影响.通过对稳定干扰p53基因后鼻咽癌细胞系CNE2的蛋白质表达谱改变的研究,用基质辅助激光解吸电离飞行时间质谱(MALDI-TOF-MS)分析和电喷雾串联质谱(ESI-Q-TOF-MS)验证鉴定了22个差异表达蛋白质.在这些差异表达蛋白质中,有些是已经报道的p53功能相关蛋白质,如热休克蛋白27(HSP27)、异质性胞核核糖核蛋白K(hnRNPK)、14-3-3σ等,其他可能是新的p53功能相关蛋白质,如eIF4B、TPT1、hnRNPH3、SFRS1等.部分差异表达蛋白质如HSP27、14-3-3σ和GRP75经蛋白质印迹分析技术进行了验证,同时pcDNA3.1-FLAG-p53质粒转染CNE2细胞引起了HSP27、14-3-3σ表达下调,GRP75表达上调.在鼻咽癌细胞中鉴定的22个差异表达蛋白质大致可以分为5类,包括信号传导相关蛋白质、分子伴侣、与转录和翻译相关蛋白质、代谢相关蛋白和细胞结构相关蛋白质,涉及到细胞周期的调控、分子基因表达调控、细胞黏附、细胞代谢等众多事件,它们可能作为p53功能相关蛋白质,为阐明鼻咽癌中p53蛋白聚集及失活的机制提供了重要依据和线索.
- 孙懿易红杨轶轩张鹏飞李茂玉李建玲杨芳肖志强陈主初
- 关键词：鼻咽癌蛋白质组学双向电泳MALDI-TOF-MS
- Sorcin蛋白质高表达与胃癌细胞多药耐药的关系被引量：11
- 2006年
- 目的:应用蛋白质组学技术筛选胃癌耐药相关的蛋白质。方法:以胃癌细胞SGC7901和长春新碱诱导的耐药胃癌细胞SGC7901/VCR为研究对象,应用二维聚丙烯酰胺凝胶电泳(2-DE)技术分离两种细胞的总蛋白,图像分析识别差异表达的蛋白质点,基质辅助激光解吸电离飞行时间质谱(MALDI-TOF-MS)及电喷雾串联质谱(ESI-Q-TOF)对差异表达的蛋白质点进行鉴定。Western blot验证差异蛋白质的表达水平,反义核酸技术分析差异蛋白与胃癌耐药的关系。结果:可溶性耐药相关性钙结合蛋白(sorcin)在SGC7901/VCR细胞中高表达,反义核酸抑制sorcin表达可增强SGC7901/VCR对长春新碱的化疗敏感性。结论:Sorcin蛋白质高表达与胃癌细胞多药耐药密切相关。
- 易红杨轶轩汤参娥陈主初张桂英肖志强
- 关键词：多药耐药性胃癌二维电泳质谱
- 鼻咽癌中EGFR调控APP信号通路的初步研究及其意义被引量：1
- 2009年
- 目的探索鼻咽癌(nasopharyngeal carcinoma,NPC)中表皮生长因子受体(epidermal growth factor receptor,EGFR)调控β淀粉样蛋白前体(amyloid beta A4protein,APP)的信号通路及其临床意义。方法采用转化生长因子(transforming growth factors-α,TGF-α)诱导CNE2细胞24h作为研究模型,分别采用EGFR酪氨酸激酶的选择性小分子抑制剂PD153035,MAPK抑制剂PD98059,PI3K抑制剂Wortmannin处理2h再用TGF-α作用24h作为实验组,Western blot检测阻断剂APP蛋白的表达和分泌变化情况。免疫组化检测EGFR和APP蛋白在NPC与慢性鼻咽炎症上皮组织中的表达差异。结果PD153035+TGF-α组APP蛋白表达与分泌有所下调,wortmannin+TGF-α组APP蛋白下调明显,PD98059+TGF-α组APP表达无明显变化。EGFR和APP在NPC组织中的表达高于鼻咽炎症上皮组织,且差异有统计学意义(P<0.05)。结论NPC中APP蛋白主要受EGFR信号通路中的PI3K调控,EGFR和APP与NPC的发生有关。
- 汤参娥邹海燕李萃易红冯雪萍彭芳陈主初肖志强
- 关键词：鼻咽癌表皮生长因子受体淀粉样蛋白前体信号通路
- RACK1在大肠癌癌变过程中的表达和意义被引量：4
- 2013年
- 目的:研究RACK1蛋白在正常大肠黏膜组织、大肠癌癌前病变组织及大肠癌中的表达,初步探讨其在大肠癌发病中的作用。方法:收集92例大肠癌组织、20例大肠腺瘤组织、20例大肠炎性息肉组织和23例正常大肠黏膜组织。采用免疫组织化学方法检测RACK1在正常大肠黏膜组织、大肠癌癌前病变及大肠癌组织中的表达,统计分析RACK1表达水平与大肠癌临床病理特征之间的关系。结果:随着大肠癌癌变的演进,RACK1的表达水平进行性上调(P<0.05)。RACK1的表达水平与大肠癌患者年龄、性别、淋巴结转移及Duke分期无明显关系(P>0.05),但与大肠癌的分化程度呈正相关(P<0.05)。结论:RACK1在大肠癌癌变过程中进行性上调,其表达上调可能与大肠癌的发病有关。
- 朱薇贺修胜肖志强易红姜浩
- 关键词：大肠癌RACK1癌变过程免疫组织化学
- p53沉默对人鼻咽癌细胞株CNE2放射生物学特性的影响被引量：10
- 2008年
- 目的:研究p53沉默对鼻咽癌(NPC)细胞株CNE2放射敏感性的影响,探讨NPC中过表达的p53蛋白是否参与了放射诱导的细胞损伤和凋亡过程。方法:以稳定干扰p53基因表达的鼻咽癌细胞株CNE2sip53和对照细胞株CNE2/pSUPER为对象,采用集落存活分析法分析在不同放射剂量照射后的细胞存活分数(SF)并计算放射生物学参数D0,α,β和放射敏感比(SER);采用MTT法检测放射线对细胞生长的影响;采用流式细胞术检测放射线对细胞周期及凋亡的影响。结果:CNE2sip53细胞照射后的SF值高于CNE2/pSUPER细胞;与CNE2/pSUPER细胞相比,CNE2sip53细胞D0值和SF2值均增大,而α值,β值和SER均减小;放射线诱导CNE2sip53细胞凋亡及对细胞增殖的抑制作用弱于其对CNE2/pSUPER细胞的作用;放射线诱导CNE2/pSUPER细胞阻滞于G1期,而诱导CNE2sip53细胞阻滞于G2期。结论:稳定沉默鼻咽癌细胞中p53基因表达后,细胞对放射的敏感性降低,提示NPC细胞中过表达的p53蛋白参与了放疗诱导的NPC细胞损伤和凋亡过程。
- 石慧英孙懿易红冯雪萍陈主初肖志强
- 关键词：鼻咽癌放射生物学P53
- Raf激酶抑制蛋白对鼻咽癌细胞增殖的影响被引量：2
- 2008年
- 目的:探讨Raf激酶抑制蛋白(RKIP)对鼻咽癌细胞增殖的影响。方法:采用脂质体转染方法将反义RKIP核酸表达质粒pcDNA3.1(-)-asRKIP及空白载体pcDNA3.1(-)分别转染鼻咽癌细胞系6-10B细胞,用West-ern印迹检测RKIP表达,建立RKIP表达下调的稳定转染细胞和对照细胞系。采用四甲基偶氮唑蓝(MTT)法、流式细胞术和软琼脂集落形成实验检测RKIP表达下调对鼻咽癌细胞增殖、细胞周期分布和停泊非依赖性生长的影响。结果:建立了RKIP表达下调的6-10B鼻咽癌细胞系;RKIP表达下调促进6-10B细胞增殖和停泊非依赖性生长,并加速其越过G0/G1期。结论:RKIP具有抑制鼻咽癌细胞增殖和停泊非依赖性生长的作用,可能在鼻咽癌发病中具有重要作用。
- 欧阳果良陈彦易红冯雪萍张鹏飞李茂玉李萃阮林彭芳陈主初肖志强
- 关键词：鼻咽癌RAF激酶抑制蛋白增殖细胞周期
- 鼻咽癌细胞株6-10B质膜的分离及其蛋白质表达谱分析被引量：1
- 2013年
- 建立鼻咽癌(Nasopharyngeal carcinoma,NPC)细胞株6-10B的质膜蛋白质表达谱,为鼻咽癌癌变机制研究提供有益数据资料。运用差速离心联合双水相的方法纯化NPC细胞6-10B质膜,Western blot印迹和电镜检测验证质膜纯度,一维凝胶电泳分离质膜蛋白质,液相色谱/串联质谱结合生物信息学鉴定质膜蛋白质,肿瘤差异蛋白质组数据库(dbDEPD)搜索质膜蛋白质与其他肿瘤的相关性。共鉴定到406种非冗余蛋白质,质膜蛋白质和质膜相关蛋白共255个(占62.8%),dbDEPD搜索显示145种质膜蛋白质中的46个与其他肿瘤相关,其中18个质膜蛋白质与其他肿瘤转移相关,进一步分析发现质膜蛋白质CD225、CD104和p63与同属头颈部肿瘤的口腔癌转移相关,提示它们也可能是NPC潜在的转移相关蛋白。本研究建立了NPC细胞株6-10B的质膜蛋白质表达谱数据库,为NPC癌变分子机制研究提供有价值的数据和信息。
- 张鹏飞曾谷清汤参娥易红梁宋平陈主初肖志强
- 关键词：鼻咽癌质膜蛋白质组双水相质谱
