徐慧莉
- 作品数：8 被引量：16H指数：3
- 供职机构：上海交通大学医学院附属仁济医院更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金上海市卫生局科研基金上海市科学技术委员会资助项目更多>>
- 相关领域：医药卫生生物学更多>>
- 肺腺癌干细胞表达小细胞肺癌相关抗原的实验研究
- 2013年
- 肿瘤干细胞(cancer stem cells,CSC)是指一类具有自我更新(self-renewal)能力的未分化细胞。在肺腺癌中,CSC的自我更新调控机制类似胚胎干细胞,即高表达OCT4、Nanog和Sox2多潜能基因,但目前对其表型特征尚存争议。该文采用成球试验(sphere-forming assay)从SPC-A1细胞株中富集CSC后进行分子表型分析。结果显示,此类肺球体细胞(pulmospheres)同时表达肺脏近端和远端呼吸上皮的多个谱系(lineage)标志,包括纤毛柱状细胞标志FoxJ1、非纤毛柱状细胞(即Clara细胞)标志CCSP、肺神经内分泌细胞标志GRP、II型肺泡细胞标志SP-C及其转录调控因子TTF-1。这些肺球体细胞也能够被3株小细胞肺癌特异性单抗(2F7、4B3和E6)所识别。通过基因沉默技术使得肺球体细胞中OCT4表达转阴后,上述标志(除E6外)均消失。研究结果揭示,肺癌CSC具有肺脏呼吸上皮多潜能细胞的表型特征。此外,初步研究结果发现,中药冬虫夏草(Hirsutella Hepialid of Cordyceps Sinensis)的被毛孢菌丝体中含有新颖抗癌成分,能够显著遏制肺球体细胞增殖,提示对其进行分离鉴定,将是研制开发肺癌CSC靶向药物的一个发展方向。
- 吴丽霞徐慧莉陈复华张艳胡晶莹刘蕾薛建祥董强刚王维林
- 关键词：肺腺癌肿瘤干细胞
- 靶向肺腺癌干细胞OCT4多潜能基因的体外抗癌效应研究被引量：2
- 2012年
- 八聚体结合转录因子4(octamer-binding transcription factor 4,OCT4)是干细胞维持自我更新所必需的多潜能基因(pluripotent gene)。近年来已有多项临床研究报道,肺腺癌中存在OCT4阳性细胞的患者预后差,揭示OCT4是此类肿瘤的一个重要治疗靶标。该文借助小RNA(micro RNA)介导的基因沉默及cDNA表达芯片筛查技术,证明OCT4在肺腺癌细胞中具有转录调控功能。实验显示,15-脱氧–前列腺素J2(15d-PGJ2)与去铁胺(desferrioxamine,DFO)组合,可以显著下调肺腺癌细胞中OCT4的表达并有效抑制细胞增殖及集落形成。研究结果显示至少在体外实验条件下,药理性调控OCT4表达具有显著抗癌效应。该结果为探索肺癌靶向治疗新技术提供了思路。
- 宁仁利黄进肃吴丽霞李榕徐慧莉周瑾董强刚
- 关键词：肺腺癌OCT4抗癌效应
- 靶向TTF-1转录因子诱导人肺腺癌干细胞表型分化被引量：2
- 2011年
- 肿瘤干细胞(cancer stem cells,CSC)的典型特征是能够自我更新并分化形成肿瘤内各类癌细胞,但其分子调控机制还不清楚。本实验采用微纳米介导的小RNA(microRNA)基因沉默技术,探讨了选择性灭活甲状腺转录因子-1(thyroid transcription factor-1,TTF-1)对肺腺癌CSC分化的影响。结果显示,肺腺癌CSC属于具有胚胎干细胞(embryonic stem cells,ESC)样表型的原始未分化细胞,此类癌细胞表达ESC自我更新核心调控环(OCT4、Nanog和Sox2)以及细支气管肺泡干细胞(bronchioalveolar stem cells)标志CCSP和SP-C、Ⅰ型肺泡细胞标志AQP5、纤毛细胞标志Foxj1和肺发育相关转录因子TTF-1及GATA6,而TTF-1灭活细胞仅表达SP-C和GATA6,此类细胞经培养后具有SP-C^-AQP5^+Ⅰ型肺泡细胞样表型。上述结果表明,TTF-1是维持肺腺癌CSC生物学特性的关键基因,靶向该基因将迫使其表型分化。
- 李焱薛明明亓雪莲耿沁徐慧莉董强刚
- 关键词：肿瘤干细胞肺腺癌分化
- miR-103/MTHFR轴抑制肝细胞癌中LINE-1基因的甲基化水平被引量：1
- 2022年
- 目的:研究肝细胞癌(hepatocellular carcinoma,HCC)组织中长散在核元件1(long interspersed nuclear element-1,LINE-1)基因的甲基化状态,并探讨调控DNA整体甲基化的可能因素。方法:使用Taqman实时荧光定量PCR方法检测LINE-1基因的甲基化水平,用实时荧光定量PCR检测微RNA(microRNA,miRNA,miR)-103和亚甲基四氢叶酸还原酶(methylenetetrahydrofolate reductase,MTHFR)mRNA的表达水平,采用蛋白质印迹法和免疫组织化学法检测MTHFR蛋白的表达水平。利用癌症基因组图谱(e Cancer Genome Atlas,TCGA)数据库,分析HCC组织中不同miRNA的表达水平,利用miRDB等靶基因预测数据库预测miR-103的靶基因,采用荧光素报告基因实验检验miR-103与其靶基因MTHFR的直接相互作用。将miR-103-mimics、miR-103-inhibitor及各自阴性对照(negative control,NC)或过表达miR-103/MTHFR慢病毒颗粒转入肝癌BEL-7402细胞中,检测不同处理对LINE-1基因甲基化的影响。结果:HCC组织中LINE-1基因甲基化水平较癌旁组织下降,且这种低甲基化与预后差相关。TCGA数据库分析结果显示,miR-103是HCC组织中高表达且表达上调的miRNA之一,miR-103表达高的患者较表达低者预后差,这种表达上调在176例患者的样本中得到验证。miR-103过表达可直接抑制MTHFR的表达,导致LINE-1基因甲基化水平降低。HCC患者癌组织较癌旁对照组织的MTHFR mRNA和蛋白水平降低。MTHFR过表达的细胞中LINE-1基因甲基化水平升高。结论:LINE-1基因的甲基化水平受miR-103/MTHFR轴调控,在HCC组织中降低且与患者预后相关;miR-103在HCC组织中高表达,提示miR-103/MTHFR/DNA整体甲基化可能是HCC进展中的重要变化过程。
- 刘玉玲梁顺顺徐慧莉胡晶莹张源洲罗晓莹
- 关键词：肝细胞癌DNA甲基化MTHFR
- 人肺腺癌干细胞分子表型及PLAGL2基因的生物学功能研究被引量：7
- 2012年
- 目前,不断有证据证明肿瘤源自组织成体干细胞或其祖细胞的恶性转化,这些转化的干(祖)细胞称为肿瘤起始细胞(tumor-initiating cells)或肿瘤干细胞(cancer stem cells,CSC)。但肺癌CSC细胞的起源尚不清楚。该实验室曾报道人体肺腺癌中存在一类表达OCT4(octamer-binding transcription factor 4)的细支气管肺泡干细胞(bronchioalveolar stem cell,BASC)样CSC。该研究采用RNA干扰技术灭活了此类癌细胞中的锌指蛋白转录因子编码基因多形腺瘤样基因2(pleiomorphic adenoma gene-like 2,PLAGL2),证明该基因表达沉默驱使肺腺癌CSC分化形成了I型肺泡细胞(alveolartype 1 cells,AT1)样细胞并失去致瘤能力。借助基因芯片筛查技术平台,发现肺腺癌CSC具有与人体肺脏未分化干细胞和肺泡祖细胞相似的分子表型,提示此类肺干(祖)细胞可能是肺腺癌潜在的细胞起源。此外,该研究结果还揭示肺腺癌CSC的分化受TTF-1(甲状腺转录因子-1)和PLAGL2的双重调控,通过基因操作以及药理性诱导可以驱使此类癌细胞分化。这些结果为针对肺癌CSC的靶向治疗提供了新的思路。
- 薛明明宁仁利黄进肃李钟李榕徐慧莉董强刚
- 关键词：肺腺癌肿瘤干细胞分子表型细胞起源
- 靶向灭活肺腺癌干细胞OCT4多潜能转录因子后的差异表达基因分析被引量：4
- 2013年
- 应用全基因组cDNA表达芯片杂交技术,筛查了OCT4多潜能转录因子阳性(OCT4+)的肺腺癌干细胞及其OCT4表达沉默(OCT4-KD)细胞中的差异表达基因。发现与OCT4+细胞比较,OCT4-KD细胞有2 138个基因显示差异表达,其中1 554个基因表达上调,584个基因表达下调。这些差异表达基因涉及细胞周期、细胞增殖、细胞凋亡以及细胞迁移等功能,参与肿瘤通路、EGFR信号通路和低氧/p53信号通路等多个信号转导通路。选择差异表达最显著的基因进行分析,显示其中20个基因特异性表达在OCT4+细胞,而47个基因仅在OCT4-KD细胞中表达,该组基因可以作为肺腺癌中OCT4+细胞可资鉴别的特征性基因。此外,研究还发现在肺腺癌干细胞中,OCT4表达受HIF1α调控,应用RNA干扰技术选择性灭活HIF1α基因引起OCT4表达转阴和细胞表型分化,而采用棘霉素干预HIF1α的转录活性也明显下调了OCT4表达。实验结果揭示,肺腺癌干细胞中存在HIF1-OCT4调控轴,此发现为发展OCT4靶向治疗新技术提供了研究思路。
- 黄进肃宁仁利吴丽霞李榕张艳徐慧莉董强刚
- 关键词：肺腺癌肿瘤干细胞OCT4
- 多形性腺瘤基因锌指蛋白PLAGL2的研究进展被引量：3
- 2012年
- 多形性腺瘤基因样蛋白2(PLAGL2)是一类源于多形性腺瘤基因(PLAG)家族的锌指蛋白,家族成员还包括PLAG1和PLAGL1,三者在结构上高度同源,但具有不同的功能,主要与结合的DNA不同有关。近年来,对于PLAG1、PLAGL1和PLAGL2的结构、功能和作用机制等方面的研究取得了较大进展,且发现PLAGL2与细胞代谢及多种系统性疾病的发生和发展有关,而在肿瘤抑制或肿瘤促进方面存在争议。文章就PLAGL2的结构、转录机制、生物学功能及其与系统性疾病和肿瘤的关系等方面的研究进展进行综述。
- 薛明明宁仁利徐慧莉董强刚
- 关键词：生物学功能肿瘤
- Nanog多潜能转录因子在肺腺癌干细胞中的转录功能分析被引量：3
- 2013年
- 综合shRNA介导的基因沉默和全基因组表达芯片杂交技术,筛查了肺腺癌肿瘤干细胞(cancer stem cells,CSC)中靶向灭活Nanog多潜能基因后的差异表达基因。发现Nanog沉默引起了1 605个基因差异表达,其中95个基因属于受Nanog转录调控的靶基因。对差异表达基因进行KEGG分析后发现,Nanog的一个重要功能是转录抑制蛋白酶体编码基因表达。此外,研究还发现在此类细胞的特征性基因表达谱中,25个基因的表达受Nanog调控,包括15个基因在Nanog沉默后表达上调和10个基因表达下调。上述研究结果揭示,Nanog多潜能转录因子在肺腺癌的CSC中具有转录调控功能。
- 黄进肃张艳李榕吴丽霞宁仁利徐慧莉董强刚
- 关键词：肺腺癌肿瘤干细胞NANOG
