吴忠华
- 作品数：2 被引量：23H指数：2
- 供职机构：石河子大学农学院园艺系更多>>
- 发文基金：教育部科学技术研究重点项目国家自然科学基金国家科技攻关计划更多>>
- 相关领域：农业科学更多>>
- 库尔勒香梨上ACLSV的RT—PCR检测被引量：18
- 2003年
- 以库尔勒香梨叶片和皮层为材料通过改进提取方法提取总RNA,获得了较完整的RNA,在此基础上进行了反转录和PCR扩增。并进行了库尔勒香梨上ACLSV(Apple chlorotic leaf sopt virus)的RT-PCR检测,建立了该病毒的RT-PCR检测体系。用此体系扩增得到了ACLSV一个长约为358bp的片段。
- 牛建新刘连科朱军覃伟铭吴忠华王小兵
- 关键词：库尔勒香梨RT-PCR
- 库尔勒香梨的苹果茎痘病毒cDNA探针检测技术研究被引量：7
- 2004年
- 以库尔勒香梨叶片和皮层为材料 ,对 2种总RNA提取方法进行了比较研究 ,从中行筛选出了适合库尔勒香梨的提取方法 ;并利用RT PCR反应体系成功合成了生物素标记的cDNA探针 ,在此基础上 ,对影响杂交灵敏度的主要因素进行了试验研究 ,结果表明 ,当探针浓度为 4 0 0ng·ml-1,甲酰胺浓度为 4 5 % ,4 2℃杂交反应 6h ,可获得最高灵敏度。进口硝酸纤维素膜的灵敏度最好 ,基本无背景。Tween2 0的封闭效果比牛血清白蛋白好。对不同组织和不同提取方法提取的总RNA进行了杂交检测 ,结果表明 ,不论幼叶、老叶、皮层及冷冻叶片均可出现杂交信号 。
- 牛建新朱军马兵钢覃伟铭王小兵吴忠华
- 关键词：库尔勒香梨苹果茎痘病毒CDNA探针
