刘连科
- 作品数：10 被引量：48H指数：5
- 供职机构：石河子大学农学院园艺系更多>>
- 发文基金：教育部科学技术研究重点项目国家自然科学基金国家科技攻关计划引导项目更多>>
- 相关领域：农业科学更多>>
- 库尔勒香梨脉黄病毒RT-PCR检测技术研究被引量：13
- 2003年
- 以库尔勒香梨叶片和皮层为材料 ,对总RNA提取方法进行了研究 ,从中筛选出了适合库尔勒香梨总RNA的提取方法。结果表明 ,要获得良好的RT PCR扩增 ,RT体系中dNTPs浓度、互补引物、AMV、模板的浓度要分别达到 0 .1mmol·L-1、0 .2 μmol·L-1、0 .0 5U·μl-1、0 .0 1μg·μl-1以上。此外 ,使用RNasin能有效抑制RT体系中RNase对病毒RNA的降解作用 ,可使RT过程顺利进行 ;PCR体系中dNTPs浓度至少要达到 0 .1mmol·L-1,0 .2～ 0 .3mmol·L-1可以获得最佳的扩增效果 ;TaqE浓度要达到 0 .0 15U·μl-1以上 ;引物浓度适宜范围 0 .3～ 0 .7μmol·L-1;Mg2 + 要达到 1.2 6mmol·L-1以上。
- 牛建新刘连科王小兵覃伟铭
- 关键词：库尔勒香梨RT-PCR检测技术RNA提取方法
- 苹果两种病毒的RT-PCR检测技术研究
- 以苹果新鲜叶片和皮层为材料,改进总RNA的提取方法,获得纯度高、完整性好的总RNA,在此基础上进行了反转录和PCR扩增。检测到了苹果褪绿叶斑病毒(ACLSV)和苹果茎痘病毒(ASPV),建立了ACLSV、ASPV的RT-...
- 牛建新刘连科
- 关键词：苹果
- 文献传递
- 苹果两种病毒的RT-PCR检测技术研究
- 以苹果新鲜叶片和皮层为材料,改进总RNA的提取方法,获得纯度高、完整性好的总RNA,在此基础上进行了反转录和PCR扩增.检测到了苹果褪绿叶斑病毒(ACLSV)和苹果茎痘病毒(ASPV),建立了ACLSV、ASPV的RT-...
- 牛建新刘连科
- 关键词：苹果RT-PCR检测病毒检测褪绿叶斑病毒
- 文献传递
- 库尔勒香梨上ACLSV的RT—PCR检测被引量：18
- 2003年
- 以库尔勒香梨叶片和皮层为材料通过改进提取方法提取总RNA,获得了较完整的RNA,在此基础上进行了反转录和PCR扩增。并进行了库尔勒香梨上ACLSV(Apple chlorotic leaf sopt virus)的RT-PCR检测,建立了该病毒的RT-PCR检测体系。用此体系扩增得到了ACLSV一个长约为358bp的片段。
- 牛建新刘连科朱军覃伟铭吴忠华王小兵
- 关键词：库尔勒香梨RT-PCR
- 以dsRNA为模板的梨脉黄病毒RT-PCR检测技术研究被引量：20
- 2003年
- 用已知带梨脉病毒(Pearveinyellowvirus,PVYV)的库尔勒香梨植株和库尔勒香梨无病毒实生苗为供试材料,分别选用新鲜幼嫩叶片、4℃条件下保存2～4d的幼嫩叶片、冷冻的幼嫩叶片和皮层为试材,进行dsRNA的分离提取实验,得到了与PVYV基因组RNA长度9306bp相当大小的dsRNA谱带,并以dsRNA为模板,利用设计的特异引物,研究建立了梨脉黄病毒(PVYV)的RT-PCR检测技术体系,能有效地扩增出PVYV的一条长为316bp的特异片段,该技术可广泛用于果树病毒的分子检测。
- 牛建新刘连科朱军覃伟铭
- 关键词：库尔勒香梨双链RNART-PCR
- 利用RT-PCR检测库尔勒香梨苹果茎痘病毒的研究被引量：7
- 2003年
- 以库尔勒香梨新鲜、冷藏、冷冻叶片和皮层为材料 ,对提取双链RNA (dsRNA)的 2种方法和提取总RNA的 3种方法进行了分析比较 ,并对总RNA的提取方法进行了改进 ,获得了纯度较高、完整性较好的dsRNA和总RNA ,在此基础上进行了反转录 (RT)和PCR扩增。在国内首次完成了对苹果茎痘病毒 (ASPV)的RT PCR检测 ,建立了ASPV有效RT PCR反应体系。用此体系扩增到ASPV一个长约 316bp的片段。实验表明以dsRNA和总RNA为模板均能成功进行RT PCR检测 ,且dsRNA优于总RNA。
- 刘连科牛建新王小兵覃伟铭
- 关键词：库尔勒香梨苹果反转录PCR扩增
- 库尔勒香梨病毒病多重RT-PCR检测技术研究被引量：5
- 2004年
- 在建立PVYV和ACLSVRT PCR优化体系的基础上,主要研究了多重PCR中2套引物的浓度和退火温度的影响,研究表明:多重PCR体系中引物Tm值越高、长度越长浓度就需越高;如果Tm值相差不大,退火温度的确定要以Tm值高的引物为准。应用该体系可以节约成本、缩短时间。
- 牛建新刘连科马兵钢朱军李海生何梅
- 关键词：多重RT-PCR
- 应用灰色关联度分析甜瓜主要性状对产量的影响被引量：4
- 2001年
- 应用灰色关联度分析法 ,研究了甜瓜主要性状对产量的影响 ,结果表明各性状对产量影响的大小依次为 :单瓜重 >病情指数 >横径 >果心可溶性固形物含量 >纵径 >全生育期 >
- 辛建华傅振清刘连科
- 关键词：灰色关联度分析甜瓜主要性状单瓜重病情指数横径
- 库尔勒香梨病毒病RT-PCR检测技术研究
- 该研究包括以下主要内容：植物总RNA和病毒双链RNA（dsRNA）提取方法研究、PVYV和PRPMVRT-PCR优化检测体系的建立、多重PCR体系的建立.1.以库尔勒香梨叶片和皮层为材料,对三种植物总RNA和两种病毒ds...
- 刘连科
- 关键词：多重PCR
- 文献传递
- 库尔勒香梨病毒病多重RT-PCR检测技术研究
- 以库尔勒香梨叶片和皮层为材料,对3种植物总RNA和两种病毒dsRNA提取方法进行了比较研究,从中筛选出了最适合于库尔勒香梨的提取方法。研究了RT主要反应成分dNTPs引物、AMV、模板浓度和RNasin以及dsRNA变性...
- 牛建新刘连科
- 关键词：病毒库尔勒香梨多重PCR
- 文献传递
