曾磊
- 作品数：3 被引量：11H指数：1
- 供职机构：郑州大学生物工程系更多>>
- 发文基金：国际科技合作与交流专项项目国家自然科学基金更多>>
- 相关领域：生物学更多>>
- 杜氏盐藻叶绿体双筛选载体pchlN-CAT-BAR的构建及转化
- 杜氏盐藻是一种单细胞真核绿藻,可在0.05-5 M NaCl培养液中生长,无细胞壁,呈椭圆形或梨形,有两根等长的鞭毛,胞体内含有一个约占自身体积50/%的巨大杯状叶绿体。目前,在以藻类为生物反应器的研究中,模式生物衣藻的...
- 曾磊
- 关键词：杜氏盐藻叶绿体转化CAT基因BAR基因
- 文献传递
- 杜氏盐藻寡糖基转移酶亚基STT3a功能结构域的克隆与表达分析被引量：9
- 2010年
- 为了研究STT3a基因在杜氏盐藻耐盐及鞭毛再生方面的作用,根据衣藻、拟南芥等STT3a蛋白的氨基酸高度保守序列VCVFTA、DVDYVL设计一对简并引物,采用RT-PCR及3'RACE的方法扩增杜氏盐藻STT3a蛋白功能结构域的cDNA序列。序列分析显示克隆的cDNA全长1650bp,具有一定保守性,与衣藻、拟南芥和人的相似性分别为48%、50%和46%。实时荧光定量PCR结果显示杜氏盐藻STT3amRNA水平随着盐浓度的升高而逐渐增加,其水平在3.5mol/LNaCl浓度时比在1.5mol/LNaCl浓度时升高了11倍(P<0.01)。另外,与没有脱鞭毛的杜氏盐藻相比,STT3amRNA在鞭毛再生过程中持续高表达。本研究显示杜氏盐藻STT3a基因的高表达可以增强其盐适应和鞭毛再生能力。
- 王翠李杰柳丽平曾磊薛乐勋
- 关键词：杜氏盐藻耐盐
- 杜氏盐藻叶绿体转化载体pchlN-CAT-BAR的构建被引量：1
- 2010年
- 目的:利用同源重组方法将外源选择标记基因转入杜氏盐藻叶绿体中并表达。方法:以光非依赖性的原叶绿素酸酯还原酶chlN基因为同源片段,以氯霉素乙酰转移酶(cat)基因和除草剂草丁膦(PPT)抗性bar基因为选择标记,构建盐藻叶绿体转化载体pchlN-CAT-BAR,并通过基因枪法转入野生型盐藻细胞,筛选转化藻株。对转化株和野生对照组的细胞计数结果进行统计学分析。结果:在200mg/L氯霉素的选择下,野生型盐藻12d左右死亡,转化藻仍正常生长,再经4mg/LPPT继代筛选3～5代,得到表达氯霉素和PPT抗性的盐藻转化株。盐藻转化株和野生株1个月内藻株生长差异有统计学意义(P<0.05)。结论:以chlN基因作为同源片段构建盐藻叶绿体转化载体是可行的。
- 曾磊潘卫东王翠薛乐勋
- 关键词：杜氏盐藻叶绿体转化
