- 人眼筛板细胞体外培养的研究被引量：3
- 1997年
- 目的研究筛板细胞合成细胞外基质的生理与病理，建立筛板细胞培养模型。方法采用酶消化法对１０只人胚眼筛板组织进行体外培养，并利用电镜和免疫组化技术鉴定。结果所培养的细胞呈多角扁平状，核周胞浆内富含颗粒，核相对透明，核仁清楚；细胞表面有微绒毛，核膜周围有异染色质，胞膜附有基底膜及细胞外基质；免疫荧光染色对Ⅰ、Ⅲ、Ⅳ型胶原及纤维连接蛋白，层粘连蛋白呈阳性；对神经胶质纤维酸性蛋白，Ⅷ因子相关抗原呈阴性。以上均符合筛板细胞的特点，此细胞株现已传代至第４代。结论成功地建立筛板细胞体外培养模型，可用于青光眼发病机制的研究。
- 罗贤民魏厚仁刘绍春吕源淑
- 关键词：筛板青光眼
- 缺氧、低营养对人眼筛板细胞纤维连接蛋白合成的影响被引量：2
- 1998年
- 目的研究筛板间质纤维连接蛋白（ＦＮ）合成与血供的关系。方法在缺氧、低营养条件下对筛板细胞进行体外培养，光镜及电镜下观察其形态变化，采用免疫细胞化学和计算机图像分析对筛板细胞ＦＮ合成行定量分析。结果筛板细胞在缺氧、低营养条件下可发生胞浆内空泡、线粒体异形化、环形样小体等变性改变。缺氧２４ｈ及５％胎牛血清（ＦＣＳ）培养液中，筛板细胞ＦＮ合成量分别为１１．８８２０±３．５６５７、１５．１０２０±２．８９６９ＯＤ，与对照组比较，Ｐ＜０．０５；缺氧４８ｈ及１％ＦＣＳ培养液中，筛板细胞合成ＦＮ量开始减少，与对照组比较仍有不同程度增高。结论缺血可致筛板细胞结构变化和对ＦＮ合成有刺激作用。
- 罗贤民魏厚仁刘绍春刘绍春
- 关键词：青光眼纤维连接蛋白血供
- 静压力对人眼筛板细胞Ⅲ型胶原mRNA表达水平的研究被引量：2
- 1998年
- 目的观察压力对人眼筛板细胞Ⅲ型胶原ｍＲＮＡ表达水平的影响，探讨筛板细胞外间质的变化在青光眼视神经损害中的作用。方法对筛板细胞进行体外培养并施予一定的静压力，采用ｄｏｔｂｌｏｔ杂交方法和计算机图像分析法测定受压后的筛板细胞在不同时期合成Ⅲ型胶原ｍＲＮＡ表达水平。结果静压力４６７～５３３ｋＰａ（１ｋＰａ＝７．５ｍｍＨｇ）下，加压３天的筛板细胞Ⅲ型胶原ｍＲＮＡ表达量吸光度（Ａ）值０５８２８±００５１７，与同期对照组Ａ值０２８３２±００６１３比较，差异有显著性（Ｐ＜０．０５）；加压６天的筛板细胞Ⅲ型胶原ｍＲＮＡ表达水平Ａ值０４１６２±００５１２，与同期对照组Ａ值０３３６７±００５８９比较，仍有不同程度增高，但差异无显著性（Ｐ＞０．０５）；加压９及１２天的筛板细胞Ⅲ型胶原ｍＲＮＡ表达量分别为Ａ值０３２４６±００９５７及０２１６４±００１７１，均低于同时期对照组Ａ值０４０２９±００３２６、０２６０１±００１３４，差异无显著性（Ｐ＜０．０５）。结论在一定时程的压力下，筛板细胞Ⅲ型胶原ｍＲＮＡ的表达有增强作用。
- 罗贤民魏厚仁屈伸张建民
- 关键词：胶原MRNA青光眼
- 压力对培养的人眼筛板细胞及胶原蛋白合成的影响被引量：4
- 1998年
- 目的研究压力对人眼筛板细胞形态学改变及胶原蛋白合成的影响。方法对筛板细胞进行体外培养，在光镜和电镜下观察压力对人眼筛板细胞形态和结构的影响，并使用显微荧光光度计对筛板细胞胶原蛋白合成进行定量测定。结果静压力６．６７ｋＰａ（１ｋＰａ＝７．５ｍｍＨｇ）下，筛板细胞向两端延长，形态变扁；随时间的延长，胞浆内空泡增多，线粒体肿胀、部分空泡化，并可见髓鞘样小体。加压３天的筛板细胞合成胶原蛋白Ⅰ、Ⅲ、Ⅳ型分别为４３．９５±６．３７、６１．３５±１０．３５、８２．９０±１１．３６荧光强度（ａｒｂｉｔｒａｒｙｕｎｉｔ，ＡＵ）与对照组比较，差异有显著性（Ｐ＜０．０５）。加压５天的筛板细胞合成胶原蛋白Ⅰ、Ⅲ、Ⅳ型分别为３３．５０±６．９４、４０．８５±１２．３０、８０．４５±１４．６５ＡＵ，与对照组比较仍有不同程度增高。结论压力引起筛板细胞形态的异常，并促使其合成胶原蛋白增加。
- 罗贤民魏厚仁刘绍春吕源淑张樱
- 关键词：胶原蛋白青光眼病因
- 压力对体外培养的筛板细胞及糖蛋白合成影响被引量：2
- 1997年
- 为研究压力对筛板细胞形态和糖蛋白合成的影响，对筛板细胞进行体外培养并施与一定压力，相差显微镜下观察筛板细胞形态学改变，并采用显微荧光光度计对筛板细胞合成层粘蛋白（ＬａｍｉｎａＬＮ）及纤维连接蛋白（ｆｉｂｒｉｎｅｃｔｉｏｎＦＮ）进行定量测定。结果在静压力（５０ｍｍＨｇ）下，筛板细胞形态变扁，随加压时间延长，胞浆内空泡增多，线粒体肿胀、部分空泡化；胞浆内可见髓鞘样结构；加压３天的筛板细胞合成ＬＮ及ＦＮ分别为４２．２±４．６７、６３．６５±１１．２０荧光强度（ＡＵ），与对照组比较，差异呈显著性（Ｐ＜０．０５），加压５天的筛板细胞合成ＬＮ及ＦＮ分别为３６．６５±８．４５、６０．９０±１１．９１ＡＵ，与对照组比较仍有不同程度增高。显示压力能促使筛板细胞形态异常和糖蛋白合成增加。
- 罗贤民魏厚仁吕源淑张樱
- 关键词：糖蛋白体外培养青光眼
- 缺氧对人眼筛板细胞胶原蛋白合成影响
- 1998年
- 目的:研究缺氧对筛板细胞形态及胶原蛋白合成影响,探讨筛板细胞外基质改变与血供关系。方法:对筛板细胞进行体外培养,运用光镜及电镜观察筛板细胞在缺氧条件下形态和结构改变,采用免疫细胞化学和计算机图象分析观察筛板细胞对胶原蛋白Ⅰ、Ⅲ、Ⅳ型合成影响。结果:缺氧早期对筛板细胞形态无明显影响,但持续缺氧48小时后可发生结构变化,如胞浆内空泡增多、线粒体异形、环形样小体等变形改变。缺氧培养24、48小时,筛板细胞对胶原蛋白Ⅰ型表达量与对照组比较,差异有显著性(P<0.01);胶原Ⅲ型表达量与对照组比较,24小时显著增强(P<0.01),48小时仍有一定增高;胶原Ⅳ型表达量与对照组比较,差异有显著性(P<0.01)。结论:缺氧可增强筛板细胞胶原合成。
- 罗贤民魏厚仁刘绍春常桂兰
- 关键词：缺氧胶原蛋白
- 视网膜下液体对人视网膜神经胶质细胞生长的刺激作用与PVR关系被引量：4
- 1996年
- 研究了２８例孔源性视网膜脱离患者视网膜下液（ＳｕｂｒｅｔｉｎａｌＦｌｕｉｄＳＲＦ）对人视网膜神经胶质细胞（ＲｅｔｉｎａｌＧｌｉａｌＲＧ）生长的刺激作用。结果表明：所有标本通常具有刺激ＲＧ细胞增殖能力，但存在较大范围的活动性，增殖率范围在基线上３６．４～１８１．８％，ＳＲＦ促ＲＧ细胞增殖能力与ＰＶＲ程度呈平行关系，ＰＶＲ在Ｃ级以上，促ＲＧ细胞增殖活力显著性加强（Ｐ＜０．０１）。
- 罗贤民姜德咏聂爱光
- 关键词：视网膜神经胶质细胞PVR
- 人视网膜神经胶质细胞原代培养被引量：4
- 1995年
- 采用组织消化培养法培养出人视网膜神经胶质（ｒｅｔｉｎａｌｇｌｉａ，ＲＧ）细胞，用免疫组织化学技术对细胞进行鉴定，显示培养细胞呈神经胶质纤维酸性蛋白（ｇｌｉａｌｆｉｂｒｉｌｌａｒｙａｃｉｄｐｒｏｔｅｉｎ，ＧＦＡＰ）、Ｓ－１００染色阳性。结合透射及扫描电镜观察，证实为人视网膜神经胶质细胞。
- 罗贤民姜德咏聂爱光
- 关键词：神经胶质视网膜细胞培养视网膜疾病
- 视网膜下液体对人视网膜色素上皮细胞生长的刺激作用及其临床特征被引量：4
- 1996年
- 研究了28例孔源性视网膜脱离患者视网膜下液对人眼视网膜色素上皮细胞生长的作用。所有标本均可刺激视网膜色素上皮细胞增殖，但存在较大范围的活动性，发现增殖刺激活力与视网膜脱离的增殖性玻璃体视网膜病变程度、视网膜脱离范围和脱离持续时间呈正相关，且与视网膜脱离增殖性玻璃体视网膜病变程度及脱离范围相关性最大（P＜0．01）。结果表明：增殖性玻璃体视网膜病变在C级以上，脱离范围超过2个象限、脱离时间超过4周者，视网膜下液促增殖活力显著增强。
- 罗贤民姜德咏
- 关键词：视网膜下液色素上皮细胞视网膜病变
- 视网膜下液对培养的人视网膜色素上皮细胞、神经胶质细胞及成纤维细胞生长的刺激作用被引量：10
- 1996年
- 目的：研究视网膜下液（ｓｕｂｒｅｔｉｎａｌｆｌｕｉｄ，ＳＲＦ）对增殖性玻璃体视网膜病变（ｐｒｏｌｉｆｅｒａｔｉｖｅｖｉｔｒｅｏｒｅｔｉｎｏｐａｔｈｙ，ＰＶＲ）的多种细胞增殖的影响。方法：采用直接细胞计数和３Ｈ－ＴｄＲ掺入率测定ＤＮＡ合成两种方法观察２８例孔源性视网膜脱离患者ＳＲＦ对培养的人视网膜色素上皮（ｒｅｔｉｎａｌｐｉｇ－ｍｅｎｔｅｐｉｔｈｅｌｉｕｍ，ＲＰＥ）细胞、视网膜神经胶质（ｒｅｔｉｎａｌｇｌｉａ，ＲＧ）细胞及成纤维细胞（ｆｉｂｒｏｂｌａｓｔ，ＦＢ）生长刺激作用。结果：所有标本均具有刺激ＲＰＥ细胞、ＲＧ细胞及ＦＢ增殖和ＤＮＡ合成能力，增殖率范围分别在基线上５２．５％～２３３．３％、３６．４％～１７７．８％、５５．４％～２７７．８％之间。ＳＲＦ促细胞增殖率在三种细胞间比较无显著差异。结论：ＳＲＦ具有促多种细胞增殖的能力，推测ＳＲＦ中含有促细胞增殖的活性物质。
- 罗贤民姜德咏聂爱光黄溥倪黄溥倪朱晓华
- 关键词：视网膜色素上皮细胞视网膜疾病病理生理学
