袁仕善
- 作品数：154 被引量：305H指数：8
- 供职机构：湖南师范大学医学院更多>>
- 发文基金：World Health Organization湖南省科技厅资助项目湖南省自然科学基金更多>>
- 相关领域：医药卫生文化科学生物学农业科学更多>>
- 日本血吸虫成虫呕吐物的生化及免疫学特性分析被引量：2
- 2002年
- 目的 分析日本血吸虫成虫呕吐物与感染血清的免疫反应性 ,寻找特异性的血吸虫病诊断抗原。方法 采用 SDS- PAGE和免疫印迹分析呕吐物的免疫反应性 ,过碘酸钠氧化处理以鉴定呕吐物的抗原决定簇的性质。结果 日本血吸虫成虫呕吐物中存在能被血吸虫感染血清识别的特异抗原 31/ 32、4 7、6 0 / 6 2 k Da蛋白及 6 7k Da蛋白 ;31/ 32 k Da蛋白和 6 7k Da蛋白的抗原表位为蛋白 ,而 4 7k Da蛋白和 6 0 / 6 2 k Da蛋白的抗原表位为糖基。结论 日本血吸虫成虫呕吐物中存在血吸虫感染血清识别的特异抗原 ,其中 31/ 32 k Da蛋白已报告可用于血吸虫病诊断 ,4 7k Da蛋白和 6 0 / 6 2k Da蛋白含糖基表位并具有潜在的诊断价值。
- 袁仕善易新元曾宪芳黄跃龙Larry McReynolds
- 关键词：日本血吸虫成虫呕吐物免疫印迹
- 日本血吸虫铁蛋白基因的克隆、表达及其免疫诊断的研究被引量：6
- 2004年
- 目的 :构建、表达、纯化日本血吸虫铁蛋白基因的原核表达重组蛋白 ,并初步观察其免疫诊断价值。方法 :将日本血吸虫铁蛋白基因亚克隆于pGMC载体 ,转化重组体到大肠杆菌E .coli 2 5 6 6进行表达 ;采用电泳层析法分离纯化日本血吸虫铁蛋白 ;用SDS PAGE和Westernblot鉴定表达纯化产物 ;用Dot ELISA分别检测了血吸虫病人及正常人的血清。结果 :重组的日本血吸虫铁蛋白以GMC(粒细胞巨噬细胞集落刺激因子 ) 日本血吸虫铁蛋白融合蛋白的形式在细菌中得到高效表达 ,分子量为 4 0kD ,能被日本血吸虫感染兔血清识别。用重组铁蛋白检测 30例日本血吸虫病人血清和 30例正常人血清 ,阳性率和假阳性率分别为 93 3%和 3 3%。结论 :成功地表达纯化日本血吸虫重组铁蛋白 ,且该蛋白具有一定的免疫诊断价值。
- 王敏易新元曾宪芳袁仕善李先平
- 关键词：日本血吸虫铁蛋白基因克隆免疫诊断
- 2019年衡阳市某三甲医院细菌分布及耐药性分析
- 2021年
- 目的:分析2019年衡阳市某三甲医院常见致病菌的分布及其对常用抗菌药物的耐药情况,为临床合理用药提供依据。方法:使用VITEK2全自动仪器法进行菌株鉴定和药敏试验,根据CLSI 2019年版标准判读结果,使用软件WHONET 5.6进行数据分析。结果:2019年共收集临床非重复分离株8953株,其中革兰阳性菌占29%,革兰阴性菌占71%。位列前5的分离株分别为大肠埃希菌(19.8%)、鲍曼不动杆菌(17.7%)、肺炎克雷伯菌(14.5%)、铜绿假单胞菌(10.0%)、肺炎链球菌(6.7%)。肺炎克雷伯菌耐药情况比大肠埃希菌严重,对于哌拉西林/他唑巴坦、头孢替坦、阿米卡星、亚胺培南和厄他培南,大肠埃希菌保持高度敏感性(>90%),而肺炎克雷伯菌仅对厄他培南高度敏感(100%)。鲍曼不动杆菌对大多数抗菌药物耐药性都较强(>75%),对亚胺培南的耐药率更是高达84.4%。耐甲氧西林金黄色葡萄球菌(MRSA)和耐甲氧西林表皮葡萄球菌(MRSE)的检出率分别为37.9%和78.9%,耐万古霉素、利奈唑胺的葡萄球菌未检出。结论:该院临床分离菌对常用抗菌药物耐药率较高,耐药菌以革兰阴性细菌为主,鲍曼不动杆菌耐药最为严重。
- 陈心怡胡楚婷王秋平任林袁仕善
- 关键词：细菌分布耐药性耐药监测
- 弓形虫致密颗粒蛋白GRA8真核重组表达质粒的体外表达分析
- 2006年
- 目的:分析弓形虫致密颗粒蛋白GRA8真核表达质粒的体外表达。方法:大量提取纯化重组真核表达质粒pVAX1-GRA8,瞬时转染培养的vero E-6细胞,RT-PCR和免疫印迹法检测GRA8在细胞中的表达。结果:从转染pVAX1-GRA8后的vero E-6细胞的RNA中扩增出GRA8的特异条带,转染细胞存在弓形虫感染血清识别的特异蛋白质条带。结论:真核表达质粒pVAX1-GRA8在vero E6细胞中获得表达。
- 钟志宏袁仕善
- 关键词：弓形虫真核表达质粒体外表达
- 弓形虫主要表面抗原1截短型片段的纯化与鉴定
- 2007年
- 目的:表达和纯化弓形虫SAG1,分析其免疫原性。方法:将诱导表达SAG1后菌体裂解,离心,分别收集其上清和沉淀;亲和层析分离纯化裂解上清液中的SAG1,SDS-PAGE和Western blot鉴定SAG1纯度和免疫原性。结果:诱导后重组体pGEX-SAG1/Bl21超声裂解上清液、8M脲溶解沉淀的上清中都含有融合蛋白GST-SAG1,从超声裂解上清液中纯化获得融合蛋白GST-SAG1。结论:亲和层析获得具有免疫原性的SAG1。
- 杨盛清陈海明颜棠尹乐图袁仕善
- 关键词：弓形虫SAG1纯化免疫原性
- SARS病毒N蛋白真核表达质粒构建及诱导的体液免疫被引量：2
- 2005年
- 目的构建SARS病毒核衣壳蛋白(N)的真核表达质粒,并研究其在小鼠体内诱导的体液免疫应答。方法采用PCR方法体外扩增SARS病毒N蛋白基因片段,定向克隆入真核表达载体pVAC,构建pVAC-N重组质粒;大量制备该重组质粒,经基因枪腹部皮内注射免疫BALB/c小鼠三次,间接ELISA法测定免疫鼠IgG抗体效价。结果成功构建了重组表达质粒pVAC-N,免疫小鼠后可诱导产生出特异性的IgG抗体。结论构建的真核表达质粒pVAC-N能诱导小鼠产生特异性抗体,为SARS疫苗的进一步研究打下基础。
- 林绮萍吴少庭翁亚彪袁仕善高世同秦莉雷明军潘晖榕张仁利黄达娜温见翔
- 关键词：SARSN基因真核表达质粒体液免疫
- 血水草血根碱致钉螺肝脏差异表达蛋白质的鉴定被引量：2
- 2010年
- 目的 分析血水草血根碱致钉螺肝脏蛋白质表达的变化.方法 从血水草粉末中分离血根碱,配成5 mg/L水溶液,每500 ml药液投放50只钉螺,25℃浸泡36 h,解剖活螺并收集肝脏,双向电泳分离血根碱处理组和清水对照组钉螺肝脏蛋白质,ImageMaster 2D 5.0软件分析图谱,筛选差异蛋白质,并用质谱鉴定.结果 血根碱组和清水对照组分别检出（433±14）、（385±12）个蛋白质点;质谱鉴定获得11个差异表达蛋白,分别是原肌球蛋白、假定蛋白XP_533132、肌动蛋白87E、角蛋白6A、β-微管蛋白、线粒体内膜蛋白4样蛋白、角蛋白2、咽侧体抑制激素A前体、ENSANGP00000020184、肌动蛋白-3、ENSANGP00000013943.其中假定蛋白XP_533132、ENSANGP00000013943在血根碱处理组表达下调,其余9个蛋白质在血根碱处理组表达上调.结论 血根碱引起钉螺肝脏蛋白质表达发生改变.
- 刘铭彭玲刘建军黄琼瑶彭飞袁仕善
- 关键词：生物碱类蛋白质组学
- 日本血吸虫成虫组分抗原的分离及小鼠免疫试验被引量：4
- 2003年
- 目的 分离日本血吸虫可溶性成虫抗原 (AWA)中的组分抗原 ,分析其诱导的抗血吸虫的免疫保护性。方法 电泳层析法分离日本血吸虫AWA中的组分抗原 ,计算各组分抗原的分子量 ,并分析其免疫学活性。将各组分抗原分别免疫小鼠 ,攻击感染日本血吸虫尾蚴 ,感染后 4 5d剖杀 ,观察各组分抗原的免疫保护效果。结果 采用电泳层析法分离获得多个组分抗原 ,选择收集其中 4个较纯的组分抗原 ,分子量分别为 5 2kD、6 3kD、6 7kD和 74kD ;其中 6 3kD和 6 7kD抗原与感染血清有强的反应 ,而 5 2kD和 74kD抗原则反应弱 ;4种组分抗原均与AWA的免疫血清反应。 6 3kD抗原诱导的免疫保护力水平较5 2kD、6 7kD和 74kD抗原好。结论 电泳层析法分离的 4个血吸虫组分抗原有良好的免疫原性 ,且 6 3kD抗原有一定的免疫保护性。
- 袁仕善易新元曾宪芳黄跃龙张顺Larry McReynolds
- 关键词：日本血吸虫成虫抗原小鼠
- 弓形虫主要表面抗原1截短型片段的克隆与表达
- 2007年
- 为构建弓形虫主要表面抗原1(SAG1)的原核重组表达质粒并获得重组表达蛋白,采用聚合酶链反应(PCR)从弓形虫RH株基因组DNA中扩增SAG1基因,经克隆和测序后,亚克隆至原核表达载体pGEX-4T-1,转化大肠杆菌BL21,PCR和双酶切鉴定阳性菌株,表达产物用SDS-PAGE和Western blot进行鉴定观察其诱导的抗体应答.结果表明,PCR扩增出SAG1基因的特异片段,获得的阳性克隆序列与GenBank中的SAG1基因序列一致,SAG1基因被亚克隆到表达载体pGEX-4T-1,在BL21中表达了SAG1,表达的蛋白能被弓形虫感染兔血清识别.以上结果说明,已成功构建了弓形虫SAG1的重组表达质粒,在大肠杆菌中表达的SAG1具有良好的免疫学活性.
- 杨盛清唐小异袁仕善陈海明尹乐图
- 关键词：弓形虫克隆
- 弓形虫GRA8真核表达质粒的构建与体外表达
- 目的构建弓形虫致密颗粒蛋白GRA8的真核重组表达质粒。方法设计GRA8的特异引物,采用多聚酶链反应(PCR)技术从弓形虫RH株基因组DNA中扩增编码GRA8的基因片段,经克隆至pMD182T载体后,亚克隆至真核表达载体p...
- 袁仕善吴少庭黄达娜张仁利高世同余新炳
- 关键词：弓形虫致密颗粒蛋白
- 文献传递
