何婷婷
- 作品数：6 被引量：38H指数：4
- 供职机构：上海师范大学更多>>
- 相关领域：生物学轻工技术与工程化学工程农业科学更多>>
- 乳酸菌降解亚硝酸盐的发酵条件研究被引量：4
- 2013年
- 研究乳酸菌在番茄汁培养基中发酵降解亚硝酸盐的一些影响因素。采用正交设计法,以亚硝酸盐降解率为指标,对番茄汁与水比例、NaCl添加量、培养时间、菌种等因素进行正交试验。实验结果表明影响乳酸菌降解亚硝酸盐的各因素次序为NaCl添加量>培养时间>菌种>番茄汁∶水(体积比)。最佳条件组合是NaCl添加量4%,培养时间18 h,菌种为短乳杆菌,接种量4%,番茄汁∶水为1∶1,在此条件下所做的验证实验结果表明NaNO2的降解率达到83.31%。
- 顾诗雯何婷婷丁少南龚钢明
- 关键词：乳酸菌亚硝酸盐番茄汁正交试验
- 乳酸菌亚硝酸盐还原酶制备及酶学性质被引量：26
- 2011年
- 研究乳酸菌亚硝酸盐还原酶制备。将细胞破碎、硫酸铵盐析从乳酸菌中提取亚硝酸盐还原酶,经DEAE-52纤维素柱层析、Sephadex G-150凝胶过滤纯化,获得酶制品经SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳法测得相对分子质量约为42kDa。酶学性质分析表明,最适温度30℃,最适pH 5.5,以亚硝酸钠为底物,酶的Km值为120.5ug/mL。
- 龚钢明吕玉涛管世敏何婷婷
- 关键词：乳酸菌分离纯化
- 植物乳杆菌亚硝酸盐还原酶相关基因的研究被引量：4
- 2015年
- 植物乳杆菌具有降解亚硝酸盐的能力。根据已知四种类型亚硝酸盐还原酶蛋白序列的保守序列,利用互联网相关蛋白分析软件及生物信息学工具,查找到植物乳杆菌基因组上的亚硝酸盐还原酶疑似基因8个,克隆出全部基因序列,分别构建表达载体p ET-32a(+)-Ni Rs。将构建的质粒转入BL21(DE3)表达菌的感受态细胞中进行诱导表达,表达的目的蛋白,经亚硝酸盐还原酶总活性测定试剂盒检测,结果显示,其中HP蛋白具有显著还原亚硝酸盐的能力。
- 何婷婷龚钢明高然
- 关键词：植物乳杆菌基因克隆
- 大肠杆菌NrfA蛋白表达、纯化及多克隆抗体的制备(英文)
- 2012年
- [目的]为克隆大肠杆菌NrfA基因,构建pET-28a(+)-NrfA表达载体,制备相应的多克隆抗体并鉴定。[方法]以以大肠杆菌基因组DNA为模板,PCR扩增得到NrfA基因编码区,构建pET-28a(+)-NrfA表达载体;经IPTG诱导表达并纯化重组蛋白;再免疫新西兰雄兔,制备多克隆抗体;用ELISA方法检测抗体的效价,WesternΒlotting检测抗体的特异性。[结果]适构建的表达载体pET-28a(+)-NrfA在大肠杆菌中诱导后可以高效表达NrfA蛋白,免疫获得的多克隆抗体用ELISA检测,其效价为1:204900,经WesternBlotting分析,抗体的特异性较好。[结论]成功克隆大肠杆菌的NrfA基因,构建了表达载体,制备的NrfA多克隆抗体具有较高的效价和良好的特异性。为研究细菌有关NrfA奠定了基础。
- 何婷婷龚钢明高然
- 关键词：原核表达多克隆抗体
- 大肠杆菌NrfA蛋白表达、纯化及多克隆抗体的制备
- 2012年
- [目的]克隆大肠杆菌NrfA基因,构建pET-28a(+)-NrfA表达载体,制备相应的多克隆抗体并对其进行鉴定。[方法]以大肠杆菌基因组DNA为模板,PCR扩增得到NrfA基因编码区,构建pET-28a(+)-NrfA表达载体;经IPTG诱导表达并纯化重组蛋白;再免疫新西兰雄兔,制备多克隆抗体;用ELISA方法检测抗体的效价,Western Blotting检测抗体的特异性。[结果]构建的表达载体pET-28a(+)-NrfA在大肠杆菌中诱导后可高效表达NrfA蛋白;免疫获得的多克隆抗体用ELISA检测,其效价为1∶204 900;经Western Blotting分析,抗体的特异性较好。[结论]成功克隆大肠杆菌的NrfA基因,并构建了其表达载体,制备的NrfA多克隆抗体具有较高的效价和良好的特异性,为研究细菌有关NrfA奠定了基础。
- 何婷婷龚钢明高然
- 关键词：原核表达多克隆抗体
- 植物乳杆菌亚硝酸盐还原酶基因在大肠杆菌中表达被引量：6
- 2012年
- 构建乳杆菌亚硝酸盐还原酶基因的重组质粒并表达。以植物乳杆菌基因组DNA为模板,PCR扩增亚硝酸盐还原酶基因,连接到表达载体pET-32a(+)上,构建的重组载体转入大肠杆菌BL21(DE3)中,经IPTG诱导表达后,菌体总蛋白经SDS-PAGE鉴定显示重组质粒诱导表达产物有特异性蛋白条带。该表达产物经细菌亚硝酸盐还原酶试剂盒测定显示有明显的酶活性。实验结果为深入研究植物乳杆菌亚硝酸盐还原酶提供有益的参考。
- 龚钢明何婷婷高能
- 关键词：植物乳杆菌基因表达
