杨海荣
- 作品数：7 被引量：15H指数：3
- 供职机构：军事医学科学院微生物流行病研究所病原微生物生物安全国家重点实验室更多>>
- 发文基金：国家重点基础研究发展计划更多>>
- 相关领域：医药卫生农业科学更多>>
- BALB/c小鼠滴鼻免疫灭活SARS病毒对全身性免疫的影响被引量：4
- 2004年
- 目的 了解灭活SARS病毒滴鼻免疫小鼠对全身性免疫的影响。方法 将 5周龄雌性BALB c小鼠随机分为两组 ,每组 10只 ,免疫组小鼠每只免疫 5 0 μg的灭活病毒悬液 ,对照组注射等体积PBS。分别在免疫的 8d和 14d处死小鼠 ,分离脾细胞和外周血淋巴细胞 ,流式细胞仪观察其淋巴细胞表型 ;间接ELISA法测定其血清中抗SARS病毒特异性抗体IgM和IgG。结果 第 8天脾脏的CD4 + T细胞的构成比增加 (P =0 .0 2 7)。外周血淋巴细胞表型在第 8天即开始发生改变 ,在第 14天变化明显 ,与对照组差异有显著性 ,CD4 + ,CD8+ ,CD3+ T细胞构成比和T B比值显著降低 (P <0 .0 5、0 .0 1、0 .0 1、0 .0 1) ,同时CD4 5R B2 2 0 + 细胞 (B细胞 )构成比显著增加 (P =0 .0 0 0 )。但是此时血清中特异性抗体未能被检测到。结论 在未应用佐剂的情况下 ,小鼠滴鼻接种灭活SARS病毒虽然可以导致诱导机体免疫细胞表型的变化 ,却未能诱导抗体的产生。
- 寇志华张松乐邢丽李彬赵光宇王东勇杨海荣张强周育森
- 关键词：小鼠免疫作用滴鼻免疫流式细胞分析严重急性呼吸综合征
- 炭疽AVA疫苗特异性抗体分泌细胞检测方法的建立被引量：1
- 2007年
- 目的 应用酶联免疫斑点（ELISPOT）技术,建立一种检测炭疽AVA免疫后特异性抗体分泌细胞的方法,用于检测和评价炭疽无菌培养滤液抗原特异性抗体形成细胞的功能.方法 无菌分离小鼠脾细胞,建立一系列特异性ELISPOT检测炭疽无菌培养滤液抗原特异性抗体分泌细胞的参数：包括抗原最佳包被浓度、细胞最适孵育时间、反应体系中细胞浓度以及亲和素抗体工作浓度的确定,同时检测上清中抗体效价,并以不相关抗原包被,检验方法的敏感性和特异性.结果 当抗原包被浓度为7.5μg/mL时,不同细胞浓度反应曲线最稳定 细胞数为5×10^6/mL时,不同包被浓度形成的斑点数适量,易于计数 且在抗体稀释度相同情况下,脾细胞孵育时间为3～6 h所获得的斑点数最清晰,背景着色最浅,容易被仪器识别 同时,特异性抗原包被组所获得的斑点频数高于无关抗原包被组（P＜0.01） 反应体系上清中未检测到抗原特异性抗体.结论 该方法敏感、特异,可用于AVA抗原免疫后体液免疫评价.
- 吕进张松乐董梅何蕊江海燕张良艳邢丽杨海荣王希良
- 肌肉注射灭活SARS病毒早期对BALB/c小鼠黏膜论著部位淋巴细胞表型的影响被引量：1
- 2003年
- 目的 :了解灭活SARS病毒肌肉途径注射小鼠后早期对小鼠黏膜免疫系统的影响。方法 :将 5周龄的雌性BALB/c小鼠随机分为两组 ,每组 5只 ,实验组每只小鼠经肌肉注射溶于 1 0 0 μlPBS中的 5 0 μg纯化的灭活SARS病毒 ,对照组注射等量的PBS ,3d后处死小鼠 ,用流式细胞仪测定不同黏膜组织中淋巴细胞表型的变化。结果 :肌肉注射灭活SARS病毒使鼻黏膜相关淋巴组织 (NALT)中CD+ 4 荧光强度显著增加 (P <0 .0 5 )、CD+ 3 荧光强度有增加趋势 (P =0 .0 5 2 ) ;鼻通道 (NP)淋巴细胞中CD+ 4 和CD+ 8构成比显著增加 (P <0 .0 5 )、CD+ 3 构成比和T/B比值有增加趋势 ,而CD+ 4 ,CD+ 3 和B细胞荧光强度都有显著增加 (P <0 .0 5 ) ;肺CD+ 8构成比显著降低 (P <0 .0 5 )、B细胞构成比显著增加 (P <0 .0 1 )、CD+ 4 构成比有降低趋势 (P =0 .2 38)、T/B比值有降低趋势 (P =0 .0 77)、CD+ 4 /CD+ 8比值有增加趋势 ,而CD+ 3 荧光强度显著增加 (P <0 .0 5 )、CD+ 4 荧光强度有增加趋势 (P =0 .0 86 ) ;小肠派氏集合淋巴结 (PP)中B细胞构成比显著增加 (P <0 .0 5 )。结论 :肌肉注射SARS灭活病毒早期 ,可以使多部位黏膜淋巴组织的淋巴细胞表型发生变化 。
- 张松乐王东勇寇志华赵光宇李彬杨海荣卢玉杰
- 关键词：SARS病毒重症急性呼吸综合征黏膜免疫
- BALB/c小鼠肌肉注射灭活SARS病毒对系统免疫细胞表型的影响被引量：5
- 2003年
- 目的 :了解灭活SARS病毒肌肉注射途径对系统免疫的影响。方法 :将 5周龄雌性BALB/c小鼠随机分为两组 ,每组 1 0只 ,免疫组小鼠每只注射 5 0 μg的灭活病毒悬液 ,对照组注射等体积PBS。每组分别在免疫的 8d和1 4d处死 5只小鼠 ,分离脾细胞和外周血淋巴细胞 ,流式细胞仪观察其淋巴细胞表型。结果 :第 8天脾脏的淋巴细胞表型变化较为明显 ,CD+ 4 T细胞的构成比增加 (P =0 .0 0 1 ) ,CD+ 4 /CD+ 4 比值明显增多 (P =0 .0 0 7)。外周血淋巴细胞表型在第 1 4天变化明显 ,与对照组有极显著差异 ,CD+ 4 ,CD+ 8,CD+ 3 T细胞构成比和T/B比值显著降低 (P =0 .0 0 5 ,0 .0 0 0 ,0 .0 0 6和 0 .0 0 1 ,) ,同时CD4 5R/B2 2 0 + 细胞 (B细胞 )构成比显著增加 (P =0 .0 0 0 )。结论 :肌肉途径免疫灭活SARS病毒早期即可诱导机体系统免疫细胞表型的变化 。
- 寇志华张松乐赵光宇李彬王东勇杨海荣曹务春
- 关键词：SARS病毒重症急性呼吸综合征流式细胞分析
- 人用禽流感疫苗H5N1株三级毒种库的建立被引量：1
- 2007年
- 目的：建立人用禽流感疫苗H5N1株三级毒种库，为生产疫苗提供毒种。方法：用SPF鸡胚培养病毒，对型别、滴度和无菌等各项检测合格后，建立人用禽流感疫苗H5N1株三级毒种库。结果：在33℃培养52h条件下，毒种滴度为1：640-1：1280；厌氧菌、细菌、真菌、支原体、血吸附病毒、非血吸附病毒和外源性禽白血病病毒检测均为阴性。将毒种在鸡胚上传至12代，滴度在1：320-1：640之间，中和抗体滴度在1：160以上，EID50在6．7以上；毒种HA、NA基因序列检测与公布的HA、NA基因序列的同源性达99．0％，代次之间达99．9％。结论：本工作为研制人用禽流感疫苗贮备了标准毒种。
- 张松乐邢丽罗德炎何蕊杨海荣张钰王希良
- 关键词：流感鸡胚流感疫苗H5N1
- 炭疽杆菌培养上清液抗原的制备及免疫保护效果测定被引量：4
- 2006年
- 目的制备炭疽培养上清液抗原并对其免疫效果进行测定。方法将炭疽A16r菌种接种于培养基中培养,收集无菌滤液,并进行超滤浓缩,经Al(OH)3佐剂吸附后,皮下免疫Balb/c小鼠,用炭疽Vollum(s)强毒株腹腔攻击测定其免疫效力。结果制备出具有高保护性的上清液抗原,9 h产物对Balb/c小鼠免疫效果良好(94.4%)。结论本研究为进一步研究炭疽疫苗免疫保护机制和炭疽疫苗改进研究打下基础。
- 董梅马丽娟张松乐张良艳郭习勤邢丽杨海荣王希良
- 关键词：炭疽杆菌培养上清液
- 一种痢疾多价基因工程菌苗及其制备方法
- 本发明公开了一种痢疾多价基因工程菌苗。本发明所提供的痢疾多价基因工程菌苗，它的活性成分是既表达侵袭蛋白抗原IpaA、IpaB、IpaC和IpaD，又表达福氏和宋内氏双价LPS－O多糖抗原的痢疾多价基因工程菌苗株。经不同实...
- 王希良邢丽罗德炎张松乐王栋江海燕杨海荣张良艳高杰英
- 文献传递
