范万红
- 作品数:18 被引量:187H指数:8
- 供职机构:深圳出入境检验检疫局更多>>
- 发文基金:国家质检总局科技计划项目深圳出入境检验检疫局科研项目国家科技支撑计划更多>>
- 相关领域:农业科学生物学轻工技术与工程更多>>
- 口蹄疫病毒RT-LAMP检测方法的建立被引量:55
- 2008年
- 为了建立检测口蹄疫的快速实用分子生物学技术,本研究借助新兴的环介导等温扩增技术,建立了一种灵敏、特异、快速的分子生物学检测方法-体外等温扩增检测方法。设计了6条针对FMDV3D基因的8个位点的特异性引物,建立了一套从核酸抽提到检测仅需要75min的快速检测技术。所建立的检测方法灵敏,与实时荧光RT-PCR灵敏度相当;且具有特异性,对其他水泡性疾病病原体检测均为阴性;而且简单,不需要复杂的仪器,常规水浴锅在63.5℃即可进行,肉眼可直接观察检测结果。该方法是适合基层和现场检测而无需送至中心实验室的快速灵敏实用的分子生物学检测方法。
- 秦智锋曾少灵阮周曦陈兵曹琛福花群义吕建强叶奕优范万红毕英佐
- 关键词:口蹄疫病毒环介导等温扩增技术
- 试论进出境动植检人才队伍能力建设被引量:1
- 2016年
- 人才队伍是进出境动植检工作体系中最活跃的要素,在很大程度上影响着动植检工作的效率和质量。为了加强人才队伍的能力建设,制定科学、统一、规范的培训规划和课程设计,本文以进出境动植检岗位资格管理为基础,构建了4级人才梯队结构,分析了体系平稳运行需把握的3个方面,以新进人员为例介绍了能力提升的做法,以期为全国进出境动植检系统提供有益参考。
- 赵增连郑华周明华范万红惠凯孟祥升张总泽
- 关键词:进出境动植物检疫
- 鱼类神经坏死病毒实时荧光RT-PCR检测方法的建立和应用被引量:8
- 2008年
- 根据GenBank中登录的鱼类神经坏死病毒CP基因序列,选择高度保守区域设计引物和TaqMan荧光探针,通过对实时荧光RT-PCR反应条件进行优化,建立了用于检测鱼类神经坏死病毒的实时荧光RT-PCR方法。利用该方法检测鱼类神经坏死病毒及其他多种常见的水生动物RNA病毒,结果只能检测到目的病毒,表明其具有良好的特异性。灵敏性试验发现,其最低检测限可达1.2pg/μL的总RNA。与RT-PCR的灵敏度对比试验表明,其敏感度比RT-PCR高100倍。对同一样品进行检测,在组内及组间的变异系数分别为0.9%以及1.5%,证实其重复性极好,并且从抽提核酸到得出结果仅需4h。对临床500份样品进行鱼类神经坏死病毒检测,结果发现有40份阳性样品。这些结果表明,本研究所建立的实时荧光RT-PCR能对鱼类神经坏死病毒进行准确、快速的检测,具有特异性好、灵敏度高的优点,是开展鱼类神经坏死病的临床检测和疫情监测工作的有力工具。
- 罗卫李惠芳刘荭陈焕春范万红刘宗晓田飞焱王侃吕建强
- 关键词:实时荧光RT-PCR
- 国内养殖鱼类和进境鱼卵中传染性造血器官坏死病毒(IHNV)的检测及基因分析被引量:21
- 2006年
- 用传染性造血器官坏死病病毒(IHNV)的反转录聚合酶链及该方法在来自国内养殖场的患病牙鲆和虹鳟及进口的匙吻鲟鱼卵中检测出IHNV,同时对扩增出的IHNV的DNA片段进行了序列分析。结果表明,从国内养殖的牙鲆和虹鳟中分离出的IHNV与IHNV的标准株RB-1株在序列上都具有98.1%的同源性,推导出在氨基酸序列上分别具有97%和99%的同源性。从进口匙吻鲟鱼卵中分离的IHNV与RB-1株在序列上都具有92.5%的同源性,推导出氨基酸序列有93%的同源性。系统发育树分析结果表明,从国内发病的养殖虹鳟中分离出的IHNV与进口匙吻鲟鱼卵中检测到的IHNV在进化上关系较为密切。
- 刘荭范万红史秀杰陈超吕建强何俊强高隆英江育林
- 关键词:基因分析
- 锦鲤疱疹病毒实时荧光定量PCR检测方法的建立及应用被引量:15
- 2007年
- 研究建立并完善了Taqman实时荧光定量PCR检测锦鲤疱疹病毒(KHV)的方法。首先通过选取KHV病毒TK基因的保守序列(GenBank AB182940),利用PRIMER EXPRESS 2.0设计引物和探针。其中Taqman探针的5’端标记FAM,3’端标记TAMRA。然后利用梯度稀释的阳性样品克隆质粒进行定量PCR反应,制作标准曲线,得到病毒拷贝数与Ct值的关系为:Ct=-3.45 lgX+42.73(相关系数R2=0.989)。通过试验检测得到实时荧光定量PCR对KHV的灵敏度为32个病毒核酸拷贝数,同时,设计的引物和探针对于鱼类细胞系和其它鱼类病毒没有扩增反应,表现出较好的特异性。实验结果表明,实时荧光定量PCR检测KHV的方法,具有特异性好、灵敏度高的特点,可以缩短检测时间,提高检测速度,非常适合口岸进出口检验检疫的要求。
- 范万红刘荭岳志芹吕建强何俊强江育林
- 关键词:锦鲤疱疹病毒实时荧光定量PCR
- H5N1亚型禽流感疫苗对供港鸡免疫效果评价
- 2007年
- 针对供港活鸡饲养周期长(85日龄~105日龄),禽流感抗体滴度要求高(21/28检测样品抗体滴度需≥4log2)的特点,在原有H5N2疫苗对供港活禽免疫效果不理想的情况下,对哈尔滨兽医研究所研制的H5N1亚型禽流感疫苗进行了免疫效果评估。结果显示,H5N1疫苗免疫效果明显高于原有的H5N2疫苗,初步推荐该禽流感灭活疫苗对供港鸡场的免疫程序为:首免7日龄~10日龄,0.3mL/只,皮下注射;二免45日龄,0.5mL/只,肌肉注射。
- 秦智锋钟安清林庆燕罗焕全姚绵鹏范万红陈书琨许保柱阮周曦吕建强曾少灵毕英佐田国彬
- 关键词:免疫程序
- 柯氏艾美耳球虫发育史的研究
- 1998年
- 柯氏艾美耳球虫(Eimeriakofoidi)的内生发育包括2代无性繁殖和1代有性繁殖,第1代裂殖生殖阶段的时间为感染后至48h,第2代裂殖生殖阶段的时间为感染后48~84h,配子生殖阶段始于感染后76h感染后90~138h在肠绒毛中发现成熟的配子体,感染后96h在回肠肠腺中发现卵囊,至138h仍可见最短孢子化时间为9~12h柯氏艾美耳球虫的宿主特异性强,不感染虎皮鹦鹉、八哥。
- 范万红陈淑玉
- 关键词:鹧鸪艾美耳球虫
- 出入境饲料及添加剂检验检疫监控计划及生产企业分类管理办法的研究
- 史卫军朱崧琪孙荣邱克武代德容骆如运范万红鲁刚
- 用饲料安全的理念,全面规划深圳辖区进口饲料安全工作,制定全面的饲料及添加剂安全监管要求,帮助企业提高管理水平,建立与国际接轨的与主要出口目标市场国家等效的监督管理制定,保障深圳辖区饲料和饲料添剂出口贸易的健康发展.该项目...
- 关键词:
- 关键词:饲料饲料添加剂检验检疫管理
- 中美进出口水产品质量安全现状及对策研究被引量:20
- 2015年
- 中美互为水产品贸易大国。通过对中美水产品贸易和质量安全情况进行分析研究发现,随着两国水产品贸易的不断发展,也逐渐暴露出药物残留时有检出、有害生物和致病微生物检出较高、我国进口水产品法律法规标准体系不健全不完善,以及进口水产品检验监管方式需要调整完善等诸多问题。建议:做好顶层设计,健全完善我国进出口水产品法律法规体系、标准体系;坚持改革创新,转变监管方式;落实企业主体责任以及加强中美交流合作,着力构建中美水产品共治新格局。
- 赵海军范万红霍琪苏海龙欧安黄武
- 关键词:水产品
- 鲤春病毒血症病毒糖蛋白基因的克隆及其在毕赤酵母中的初步表达被引量:14
- 2007年
- 根据SVCV糖蛋白基因序列设计引物,在5’引物和3’引物中分别引入酶切位点。以病毒核酸为模板用RT-PCR方法扩增该段糖蛋白基因,将所得的基因片段(517和521)克隆至穿梭载体pGAPZαA/B之GAP启动子下游位点,构建含α信号肽的重组表达载体。获得的重组质粒pGAPZαA-517和pGAPZαB-521经线性化后,电击法转化毕赤酵母SMD1168菌株,构建分泌型表达SVCV糖蛋白的重组酵母菌株。酵母菌落PCR法检测表明,已成功构建分泌表达SVCV糖蛋白的酵母基因工程菌株,斑点印迹法进一步分析表明有目的蛋白的成功表达。
- 付峰刘荭范万红江育林黄倢
- 关键词:鲤春病毒血症病毒糖蛋白毕赤酵母分泌表达